肉毒碱对神经—肌肉接头处兴奋传递的影响

肉毒碱对神经—肌肉接头处兴奋传递的影响五年十一班机能实验第六组一、实验目的•了解家兔的解剖结构•探究肉毒碱对神经—肌肉接头处兴奋传递的影响二、实验原理肉毒碱为一种氨基酸衍生物，能够选择性的阻断神经肌肉接头处突触前膜乙酰胆碱的释放，而抑制接头处的兴奋传递，因此肌肉不能接受兴奋而松弛。本实验采取沿家兔股静脉注射的方法观察肉毒碱对胫骨前肌神经肌肉接头处兴奋传递的影响。三、实验对象：家兔哺乳动物手术器械一套、生物信号采集处理系统、张力换能器、兔手术台、刺激电极、气管插管、呼吸机、20%氨基甲酸乙酯溶液、任氏液、生理盐水、10%肉毒碱溶液、乙酰胆碱四、实验器材和药品五试验步骤流程图麻醉固定气管插管分离胫骨前肌,静脉及其相关神经连接相关装置电刺激未处理的神经注射肉毒碱后电刺激神经在神经接头处滴加乙酰胆碱后,刺激神经实验结果实验结论麻醉固定六、实验步骤1.麻醉固定：家兔称重，耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液（5ml/kg），待家兔麻醉后仰卧固定在兔台上。2.手术操作：①气管插管：参照实验十三“家兔呼吸运动的调节”②胫骨前肌，股静脉及相关神经的处理：仰卧固定家兔，在股三角剪毛用手触摸股动脉，沿股动脉走向做4~5cm切口，止血钳分离皮下组织和筋膜，可见由外向内依次为股神经，股动脉和股静脉，其中动脉位于另两者之后，先小心分离神经，再分离动静脉之间的结缔组织（注意勿伤血管小分支）分离出静脉2~3cm备用，可直接用4号针头注射给药。胫骨前肌位于胫骨内侧，皮肤切口从另一条腿膝关节向下至踝关节上（注意不要切断皮下组织的几支血管），切断横韧带（在踝关节上）然后用镊子挑起外侧最上一根肌腱，穿一线结扎，在结扎线远端的3mm处剪断肌腱，向上分离以暴漏部分胫骨前肌，滴以任氏液，加以保护。然后分离同侧坐骨神经（大腿凹处，股二头肌深层，分开肌肉），可见主干分成腘中神经和腓总神经，分离后在腘中神经的下方用线结扎，用任氏液保持湿润，把电极连在腓总神经上，将胫骨前肌结扎线水平穿过滑轮再垂直连于张力换能器钩上，连接好换能器与生物信号采集处理系统。3实验项目1电刺激神经，观察记录到的张力曲线。2沿股静脉注射10%肉毒碱溶液(0.2ml/kg），再电刺激神经，观察张力曲线并与正常情况下的曲线对比分析。3在神经肌肉接头出滴加乙酰胆碱后再刺激神经，观察张力曲线的变化并分析结果。1、气管2、肺3、心脏4、横隔膜5、肝脏6、胆囊7、胃8、小肠9、盲肠10、十二指肠11、大肠12、肾脏13、输尿管14、膀胱15胫骨前肌15七、预测结果注射肉毒碱一段时间后，观察到张力曲线同正常情况下的相比幅值减少，频率降低。再滴加乙酰胆碱可观察到幅值和频率恢复大致和正常情况相同。因此可证明肉毒碱可以影响神经—肌肉接头处乙酰胆碱的释放而影响兴奋的传递参考文献：《医学机能学实验教程》第二版胡还忠《生理学》第七版《神经肌肉接头疾病》——沈扬《机能实验科学》——邓先科李国华