肠道病原菌的分离与鉴定三

肠道病原菌的分离与鉴定三肠道病原菌的分离鉴定（3）细菌的药敏实验结果观察厌氧菌培养法及厌氧菌生长状态小白鼠感染肺炎球菌实验结果观察细菌致病性试验双糖铁培养基的制备成分：脲胨、乳糖、蛋白胨、葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、琼脂、蒸馏水、酚红水溶液制法：加热溶解校正pH为7.2，然后加入0.4％酚红水溶液，分装试管，高压灭菌，使成为底层较深的斜面。用途：初步鉴别肠道致病菌用，可以观察葡萄糖、乳糖的发酵，并可观察有无H2S产生及细菌有无动力。原理该培养基中只加少量的葡萄糖与较多量的乳糖。细菌分解糖类产酸可使培养基局部指示剂改变颜色。当分解葡萄糖的细菌在斜面上生长时，产生的酸少，又在有O2的情况下氧化，生成CO2和H2O，失去改变局部酸碱度的作用，所以培养基斜面部分不变色。但当细菌分解乳糖时产生酸量较多，故培养基斜面部分可变色。细菌在高层中生长时，因处于无O2状态，产生的酸不分解，故使高层部分培养基指示剂变色。硫酸亚铁可与产生的H2S作用，生成FeS使培养基变黑。硫代硫酸钠是一种还原剂，防止培养基中氧化物与H2S作用而影响FeS的生成。生化反应结果观察菌名葡萄糖乳糖麦芽糖甘露醇蔗糖靛基质尿素硫化氢阿拉伯胶糖鼠李糖蕈糖木胶糖肌醇动力甲型付伤寒杆菌⊕-⊕⊕---+/-⊕⊕⊕--+乙型付伤寒杆菌⊕-⊕⊕---+++⊕⊕⊕⊕+/-+鼠伤寒杆菌⊕-⊕⊕---+++⊕⊕/-⊕/-⊕/-+/-+丙型付伤寒杆菌⊕-⊕⊕---+⊕⊕⊕⊕-+猪霍乱杆菌⊕-⊕⊕---+/--⊕-⊕-+伤寒杆菌+-++---+/-+/--++/--+肠炎杆菌⊕-⊕⊕---+++⊕⊕⊕⊕-+血清学鉴定（1）沙门氏菌属取一载玻片与沙门氏菌属、群、型血清做玻片凝集试验。①取可疑培养物，先与A--E群沙门氏菌多价O血清做凝集试验，阳性者认为该菌属于沙门氏菌属。②用沙门氏菌属各群特有的单价O因子血清做凝集反应，可判定其属于沙门氏菌属何群。③用该群内各菌所特有的H因子血清作玻片凝集反应，可最后判定为何种菌。主要沙门氏菌抗原结构表群菌名O抗原H抗原第一相第二相A甲型副伤寒菌1.212.a1.2B乙型副伤寒菌1.4.5.12.b1.2鼠伤寒杆菌1.4.5.12.i1.2C丙型副伤寒菌6.7.Vic1.5猪霍乱杆菌6.7c1.5D伤寒杆菌9.12.Vid--肠炎杆菌1.9.12g.m--E鸭沙门氏菌3.10.e.h1.6厌氧培养法材料：厌氧罐、厌氧气袋、钢丝绒、厌氧手套箱、干燥皿、焦性没食子酸等。方法：厌氧菌的培养方法种类较多，总体上可以分为三大类：物理法、化学法和生物耗氧法。1、物理法：厌氧罐培养法、厌氧气袋法、钢丝绒法、厌氧手套箱法2、化学法：平皿焦性没食子酸法3、生物耗氧法