肾上腺素对内毒素致雄性大鼠炎症性肝损害的保护作用

肾上腺素对内毒素致雄性大鼠炎症性肝损害的保护作用柴敏、姚渊、徐蓉、谢珊珊前言：我国肝炎发病率不断呈上升趋势，临床上对于治疗肝炎的新药物的研究也在不断发展，肾上腺素(EPI)作对于肝炎症性损伤的保护作用在临床上尚处于研发阶段，有很大的临床应用前景。本实验利用内毒素脂多糖(LPS)会造成小鼠肝脏炎症性损伤，比较是否给予EPI的不同组小鼠间的肝脏是否形成炎症性损伤及其损伤程度，不同剂量的EPI对肝脏的保护作用是否存在剂量关系。实验材料与试剂实验对象：50只SPF级SD大鼠（由××实验室提供）实验动物介绍：SD大鼠：由美国的Sprague&Dawley农场的R.W.Dawley用杂合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠杂交后育成的一个白化封闭群大鼠。SPF级动物：机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，但非特定的微生物和寄生虫是容许存在的。一般指无传染病的健康动物，是目前国外使用最广泛的实验动物。筛选标准：体重为200g左右的雄性大鼠实验仪器与试剂实验仪器与器材：Beckman全自动生化分析仪CX-5型，静脉注射器，剪刀，镊子，自动分析天平，小试管，移液管实验试剂：LPS（同一厂家生产，同批号）,EPI（同一厂家生产，同批号）,生理盐水，标记染料（苦味酸，品红）实验动物分组及处理方式分组方法：分为5组，每组10只。采用完全随机分组法。1、编号：按动物体重从小到大编号并标记。2、取随机数：给每个编号一个随机数（查随机数表或从计算机获得）。3、确定组别：根据受试对象获得的随机数决定受试对象的组别。处理方式：第一组：为空白对照组，先静脉注射生理盐水6mg/kg，再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。第二组：为LPS组，先静脉注射LPS6mg/kg，再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。第三组：为EPI低剂量组，先静脉注射LPS6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.12μg/kg/min,持续6小时。第四组：为EPI中剂量组，先静脉注射LPS6mg/kg，再静脉点滴肾上腺素0.3μg/kg/min,持续6小时。第五组：为EPI高剂量组，先静脉注射LPS6mg/kg，再静脉点滴肾上腺素0.6μg/kg/min,持续6小时。备注：对照组所用生理盐水及其剂量为参考文献所得。实验相关检测指标的取样及观察1、于LPS注射前、注射后两小时采用内眦静脉取血法分别取适量血，检测血清ALT、AST、TNFα、IL-1β和IL-10水平。2、于LPS注射后六小时断头处死并取血，检测血清ALT、AST、TNFα、IL-1β和IL-10水平。3、对实验动物进行解剖，取肝脏，观察其组织病理学改变。结果的分析方法1、比较第一组与第二组的各项指标：LPS是否对大鼠肝脏造成炎症性损伤及其损伤程度。2、比较第二组与第三、四、五的各项指标：EPI对LPS造成的大鼠肝脏炎症性损伤是否具有一定的保护作用。3、对第三、四、五组的各项指标进行比较：不同剂量的EPI对大鼠肝脏炎症性损伤的保护作用是否存在剂量关系。统计分析：采用SPSS软件作各组间的方差分析比较其差异性。参考文献：1、杨文敏，曾其毅《中国循证儿科杂志》2007年2卷四期2、BozkurtS,ErsoyE,TekynHE.Thecytoprotectiveeffectofiloprostagainstcarbontetrachlorideinducedhecrosisinratliver[J].ResCommonMolPatholPhannacol,1997,95(3):343.