红枣多糖的提取工艺研究

红枣多糖提取工艺研究学科：天然产物提取工艺学姓名：周华英学号：091474135摘要：探讨了利用热水浸提法提取红枣多糖的工艺参数。通过单因素试验及正交实验确定了红枣水溶性多糖最佳提取工艺条件为：固液比1：15，温度80℃，浸提时间6h，浸提2次。红枣多糖得率为2.97%。关键词：红枣；多糖；提取工艺红枣属鼠李科，其果实营养丰富，既可食用又可入药，具有滋阴补肾、强身健体、软化血管、开胃健脾等多种药用功能【1】。红枣富含糖类、粗纤维、维生素、氨基酸、矿物质等多种营养成分【2】。研究表明，红枣多糖是红枣中具有重要生物功能的有效成分，该多糖是一种蛋白质复合多糖，营养保健价值很高【3~5】。本实验希望通过对红枣多糖的提取工艺进行研究来探索出红枣多糖的最佳提取工艺，为工厂化生产提供参考。1材料与方法1.1材料优质红枣，购于集贸市场；试验所用化学试剂均为分析纯。1.2仪器高速组织捣碎机；旋转蒸发仪；离心机；分光光度计等。1.3多糖的提取工艺流程红枣洗净→去核→烘干→粉碎→热水浸提→过滤→滤渣→反复提取→合并滤液→离心→浓缩→无水乙醇沉淀→静置离心→沉淀复溶于水中→无水乙醇沉淀→离心→沉淀用无水乙醇洗涤→冷冻干燥→多糖粗品。1.4单因素试验1.4.1提取次数对红枣多糖得率的影响称取粉碎后的红枣50g，采用1:15的料液比，80℃，6h，分别提取l、2、3次,研究提取次数对红枣多糖提取的影响。1.4.2溶剂(水)加入量对红枣多糖得率的影响称取粉碎后的红枣50g，采用1:7、1：15、1：20的料液比(红枣／溶剂体积)，80℃，6h分别提取2次，研究溶剂加入量对红枣多糖提取的影响1.4.3浸提温度对红枣多糖得率的影响称取粉碎后的红枣50g，采用1:15的料液比，于60℃，80℃,100℃提取6h，分别提取2次，研究温度对红枣多糖提取的影响。1.4.4浸提时间对红枣多糖得率的影响称取粉碎后的红枣50g，采用1:50的料液比,80℃，提取2、4、6h，分别提取两次，研究提取时间对红枣多糖提取的影响。1.5正交试验在单因素试验基础上，确定上述4因素的上下临界限，按照L9(34)正交表进行正交试验，确定最佳提取工艺。1.6试验指标测定方法【6】(1)多糖含量测定：采用硫酸一苯酚法并对其加以改良。标准曲线溶液的配剂，准确称取20mg干燥至恒重的葡萄糖，500mL蒸馏水定容，各吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，并以水补至0.5mL，加入5％的苯酚0.3mL，再加入浓硫酸1.8mL，混匀后，放人沸水浴中30min，冷却后于490nm测吸光度，绘制标准曲线。样品溶液的测定：将提取的多糖粗品溶于水，稀释，按上述步骤操作，测吸光度，用标准曲线计算糖含量。(2)多糖得率及提取效率的计算公式：多糖得率(%)=(m2/m1)×100%。m2为红枣原料质量(g)，m2为多糖质量(g)。提取效率(%)=(单次多糖得率/总多糖得率)×100%2结果与分析2.1单因素试验2.1.1硫酸—苯酚法测定多糖的标准曲线通过改良的硫酸—苯酚法测定多糖的回归方程：y=0.0235x+0.0038，r=0.9942.1.2提取次数对红枣多糖得率的影响称取红枣50g，采用1:15的料液比,80℃，提取6h。滤渣分别进行第2次与第3次提取,结果见表1。由表1可知，提取一次,可提取红枣多糖为78.33％，提取两次，可提取93.93%，随着提取次数的增加,提取效率显著下降，且提取次数越多,后序的浓缩负荷越重。表1提取次数对红枣多糖提取的影响(单位：％)实验指标提取效率合计123实验得率2.610.520.213.34提取效率78.3315.606.371002.1.3料液比对红枣多糖得率的影响各料液比红枣多糖提取结果见表2。表2料液比对红枣多糖提取的影响(单位：％)实验指标料液比1：71：151：20多糖得率1.682.531.87提取效率23.5275.9074.80由表2可知，在料液比值较小时，随着加水倍数的提高，多糖提取率增加。当红枣水由1：7的比例增加到1：15时，多糖提取率由1.68%增加到%2.53，增加了52.38%。但若进一步提高加水倍数，多糖提取率变化不明显。2.1.4提取温度对红枣多糖得率的影响各提取温度下红枣多糖提取结果见表3。表3温度对红枣多糖提取的影响(单位：％)实验指标温度406080多糖得率0.951.882.47提取效率28.556.474.2由表3可以看出，随着温度的升高，多糖提取率增加，在80℃时提取率最高。这是由于温度升高，分子运动加剧，多糖从红枣细胞中的溶出率增加。此外，提取温度是影响多糖得率的一个主要因素，故根据试验结果选择红枣多糖提取温度采用80℃浸提。2.1.5提取时间对红枣多糖得率的影响各提取时间下红枣多糖提取结果见表4。由表4可知，随着时间的延长，多糖得率增加，当时间2h增加至6h时，多糖得率由2.53%增加到3.78%，增加了37.5%。表4提取时间对红枣多糖提取的影响(单位：％)实验指标提取时间/h226糖得率多2.533.443.78提取效率75.90103.20113.402.2正交试验在单因素试验基础上，经分析确定提取温度为80℃，对其它3个因素料液比，提取次数和提取时间选用L(2³)表作正交试验。试验结果见表5。表5正交试验结果试验号A料液比B提取次数/次C提取时间/h多糖得率/%11:7121.4721:7262.9431:15162.2641:15222.73K14.413.734.20合计9.40K24.995.675.20R0.581.941.00由表5可知，影响红枣多糖得率的诸多因素的主次顺序为BCA，即提取次数提取时间料液比，从K值可知，最佳工艺组合为A2B2C2。由于该条件组合不在正交试验中，故需做验证试验。验证结果为在该组合条件下红枣多糖得率为2.97%。因此，红枣多糖最佳提取条件为料液比为1：15,提取时间6h,提2次，温度80℃。3结论影响红枣中多糖提取结果的诸因素及其主次顺序为提取次数提取时间料液比。红枣多糖最佳提取工艺条件为：固液比1:15，温度80℃，浸提时间6h，浸提2次。其得率为2.97％。【参考文献】：【1】曲泽洲，王永蕙．中国枣树志·枣卷[M]．北京：中国林业出版社，1993．【2】K.Hanubusa，J．Gyong．High—LevelofcyclicAMPinthejujubeplum[J]．J．ofmedicinalplantresearch，1982，42：380-384．【3】林勤保．大枣多糖的分离和纯化[J]．食品工业科技，1998，(4)：20—21．【4】张庆.大枣多糖体外抗补体促进小鼠脾细胞的增殖作用【J】.中药药理与临床，1998，14（5）：19．【5】李雪华.大枣多糖的提取与抗活性氧研究【J】.广西科学，2000，7（1）：54．【6】宁正祥.食品成分分析【M】.北京：中国轻工业出版社，1997．