维生素C标准操作规程

XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第1页共6页维生素C检验操作规程1.目的建立维生素C检验标准操作规程，规范操作2.范围适用于维生素C的检查3.依据：中国药典2010版二部4.职责4.1起草：QC，审核：QA，批准人：质量负责人4.2QC实施本规程。4.3QA监督本规程的实施。5.内容5.1.1性状本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄；水溶液显酸性反应。本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。5.1.2熔点5.1.2.1试液及仪器一般实验仪器和熔点仪5.1.2.1分析步骤取供试品，置研钵中研细，移置扁形称量瓶中，采用105℃干燥；取两端熔封的毛细管，于临用前锯断其一端，将开口的一端插入上述预处理后的供试品中，再反转毛细管，并将熔封一端轻叩桌面，使供试品落入管底，再借助长短适宜（约60cm）的洁净玻璃管，垂直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上，将上述装有供试品的毛细管放入玻璃管上口使其自由落下，反复数次，使供试品紧密集结于毛细管底部；装入供试品的高度应为3mm。放入WRS-1D型熔点仪中。全熔时毛细管内的液体应完全澄清。个别药品在熔融成液体后会有小气泡停留在液体中，此时容易与未熔融的固体相混淆，应仔细辨别。起草人日期20年月日审核人日期20年月日批准人日期20年月日生效日期颁发部门质量部分发部门XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第2页共6页熔点为190-192℃，熔融时同时分解。5.1.3比旋度5.1.3.1试液及仪器一般实验仪器和旋光仪5.1.3.2分析步骤取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液，供试液的测定温度应为20℃±0.5℃，使用波长589.3nm的钠D线，（汞的404.7nm和546.1nm也有使用）。供试液与空白溶剂用同一测定管，每次测定应保持测定管方向、位置不变。旋光度读数应重复3次，取其平均值，按规定公式计算结果。以干燥品（药品标准中检查干燥失重）或无水物（药品标准中检查水分）计算。100αα固体样品[α]tλ=液体样品[α]tλ=lcld式中λ为使用光源的波长，如使用钠光灯的D线可用D代替；t为测定温度；l为测顶管的长度，dm；α为测得的旋光度；d为液体的相对密度；c为100ml溶液中含有被测物质的重量g，（按干燥品或无水物计算）测定含量时，取2份供试品测定读数结果其极差应在0.02°以内，否则应重做5.2鉴别5.2.1鉴别（1）5.2.1.1试液及仪器一般实验仪器二氣靛酚钠试液：取2，6-二氯靛酚钠0.lg，加水100ml溶解后，滤过，即得。硝酸银试液：取硝酸银17.5g,加水适量使溶解成1000ml,摇匀。5.2.1.2分析步骤称取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份（每份5ml），在一份中加硝酸银试液0.5ml，观察：在另一份中加二氯靛酚钠试液1-2滴，观察。5.2.2鉴别（2）红外光谱XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第3页共6页5.2.2.1试液及仪器一般实验仪器和红外分光光度计5.2.2.2分析步骤取供试品约1mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉约200mg，充分研磨混匀，移置于直径为13mm的压模中，使铺布均匀，压模与真空泵相连，抽气约2分钟后，加压，保持2-5分钟，除去真空，取出制成的供试片，用目视检查后均匀，无明显颗粒。对空气作为背景扫描完后，立即放入供试片进行扫描，录制光谱图。比较本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集450图）5.3检查5.3.1溶液的澄清度与颜色5.3.1.1试液及仪器一般实验仪器5.3.1.2分析步骤称取本品3.0g，加水15ml振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，测定时，以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在420nm的波长士2nm以内测试吸光度。除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2mn以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数，以在0.3〜0.7之间为宜。仪器的狭缝波带宽度宜小于供试品吸收带的半高宽度的十分之一，否则测得的吸光度会偏低；狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸光度不再增大为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数，或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸收度的规定波长范围（nm）220～240241～250251～300300以上吸光度＜0.4＜0.2＜0.1＜0.055.3.2炽灼残渣5.3.2.1试液及仪器一般实验仪器5.3.2.2分析步骤取本品1.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1ml润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在500~600℃；炽灼使完全灰化，移置干燥XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第4页共6页器内，放冷，精密称定后，再在500~600℃炽灼至恒重，即得。计算遗留残渣。残渣%=W坩埚+样后-W坩埚W样×100%式中W坩埚+样后--------炽灼后恒重的坩埚与样品称样量；W坩埚-------------炽灼前恒重的坩埚称样量。5.3.3铁5.3.3.1试液及仪器一般实验仪器和原子吸收分光光度计标准铁溶液精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。5.3.3.2分析步骤称取本品5.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铁溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。在248.3nm的波长处分别测定。调节增益使能量值位于0.9-1.0之间，然后将显示转为吸光度。吸入空白溶液后按自动调零。吸入标准溶液（A），记录吸光度值，若仪器灵敏度低，则关闭火焰后调节喷雾状态，之后重新点火测试。反复几次，直至获得满意的结果。测定一组标准溶液(A)，记录其相应吸光度后绘制工作曲线。测定待测试样溶液(B)，根据待测试样吸光度在工作曲线上查得实际浓度5.3.4铜5.3.4.1试液及仪器一般实验仪器和原子吸收分光光度计标准铜溶液精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。5.3.4.2分析步骤取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铜溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。在324.8nm的波长处分别测定。调节增益使能量值位于0.9-1.0之间，然后将显示转为吸光度。吸入空白溶液后按自动调零。吸入标准溶液（A），记录吸光度值，若仪器灵敏度低，则关闭火焰后调节喷雾状态，之后重新点火测试。反复几次，直至获得满意的结果。测定一组标准溶液(A)，记录其相应吸光度后绘制工作曲线。测定待测试样溶液(B)，根据待测试样吸光度在工作曲线上查得实际浓度XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第5页共6页5.3.5重金属5.3.5.1试液及仪器一般实验仪器稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。本液含HC1应为9.5%～10.5%。酚酞指示液：取酚酞lg,加乙醇100ml使溶解，即得。变色范围：PH8.3～10.0(无色—红）。氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。醋酸盐缓冲液（pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶5解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2moI/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示），用水稀释至100ml，即得。硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/l氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml、）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。1mol/l氢氧化钠溶液：取澄清的氢氧化钠饱和溶液56ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。5.3.5.2分析步骤取三只比色管，分别标记为甲，乙，丙。甲管中加标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5)2ml后,加水稀释成25ml，乙管中加本品1.0g，加水溶解成25ml，丙管中加人本品1.0g，加水适量使溶解，再加标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5)2ml后，用水稀释成25ml;若供试品溶液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管、丙管一致；再在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。5.3.6草酸5.3.6.1试液及仪器一般实验仪器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。氯化钙试液：取氯化钙7.5g，加水使溶解成100ml，即得。5.3.6.2分析步骤XXXXX公司当前版本编号STP-MM-02-001-Rev.01.12替代版本编号规程名称维生素C检验操作规程第6页共6页取本品0.25g，加水4.5ml，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为对照品溶液。供试品溶液产生的浑浊与对照品溶液比较。5.4.含量测定5.4.1试液及仪器一般实验仪器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。碘滴定液（0.05mol/L)取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倾人100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷,取上层清液，即得。本液应临用新制。5.4.2分析步骤精密称取本品约0.2g，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。含量%=V×F×TW×100%式中V————供试品消耗滴定液的体积，ml；F————滴定液的校正值；T————滴定液的滴定度，8.806mg/ml。6.相关文件与记录********************************************************************************************