美英欧药典微生物限度标准与中国药典的比较

美英欧药典微生物限度标准与中国药典的比较苏德模•我国颁发的药品微生物限度标准已有二十多年。先按剂型制订微生物限度标准，后根据用药途径制订标准，但与外国药典比较，还存在明显差距。现将美英欧药典微生物限度标准的特点和发展趋势及中国药典微生物限度标准的现状和展望简要介绍。一、美英欧药典微生物限度标准1微生物限度微生物限度是判定药品受到微生物污染的程度及可能潜在的危险。因此，根据药性、用药途径污染的数量的差异，提供合理的指导标准。这些标准的制定，正确、有效地规范了药品生产、检定和监督的程序，是促进生产发展和产品质量的提高不可缺或无。2USP和BP、EuP规定微生物限度的品种•(1)USP•19版（1975年），品种数有35个。•22版（1990年）有140多个，•23版（1995年）有150多个，•24版（2000年）有212个，•27版（2004年）有263个品种。分为三类：一类为原料，有96个品种，超过1/3；二类为口服制剂，有85个品种；三类为外用制剂，有82个品种。制剂品种共167个，约占2/3。27版比24版新增63个品种。删去2个品种。（2）BPBP1973版收载微生物污染检查法，•1988版规定微生物限度的品种有20个，•1998及EuP1997规定微生物限度的品种有43个,•2002及EuP2002有60个品种。分为二类：一类为原料，有53个品种；二类为制剂，有6个品种。2002版比1998版新增14个品种，删去3个品种。3控制菌及检验量•USP要求10g或10ml样品不得有大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。•原料、口服制剂•多数品种要求检查大肠埃希菌和沙门菌，•少数口服品种还规定10g或10ml不得有金黄色葡萄球菌和.铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌。•也有少部分品种控制肠道菌、肠杆菌科、大肠菌群。•局部用制剂•多数品种规定10g或10ml不得有金黄色葡萄球菌和.铜绿假单胞菌，•少数品种还规定10g或10ml无大肠埃希菌、沙门菌。•BP和EuP要求1g样品不得有大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌或肠道菌和某些革兰氏阴性菌，10g样品不得有沙门菌。•原料多数品种要求检查大肠埃希菌或大肠埃希菌和沙门菌，少数品种还规定1g或1ml不得有金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌。•口服制剂仅有6个品种（氢氧化铝干混悬剂、复合镁加铝口服干混悬剂等）还规定肠道菌和某些革兰氏阴性菌。4活菌总数活菌总数包括需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数。（1）USP•原料、制剂细菌总数1g或1ml不超过10～104cfu霉菌和酵母菌数1g或1ml不超过10～103cfu。•天然药物品种也有例外。如红三叶草、红三叶草粉和艾榴脑等其细菌数1g不超过106、106、107cfu。USP27如原料药中欧车前壳其霉菌和酵母菌数1g不超过103cfu。艾榴脑（Eleuthero）其霉菌和酵母菌数1g不超过105cfu。（2）BP和EuP•原料、制剂细菌总数1g或1ml不超过102～104cfu，霉菌和酵母菌数1g或1ml不超过103cfu。53个品种中多数品种仅规定了细菌数，未规定霉菌和酵母菌数。有15个品种规定细菌数、霉菌和酵母菌数。•天然药物细菌总数1g或1ml不超过103～106cfu，霉菌和酵母菌数1g或1ml不超过103cfu。5美英欧药典微生物限度的特点（1）品种不断增加•USP从19版的35个品种至27版的265个品种，历经8版，平均每版增加近30个品种，发展较快。•BP1998、EuP1997从43个品种至BP2002、EuP2002的60个品种，5年一版的新版药典增加不到20个品种，发展较慢。（2）微生物限度各有侧重•USP规定微生物限度的品种是全面的，包括原料、口服制剂和外用制剂。原料、口服和外用制剂品种数各占1/3。•BP和EuP仅规定原料和口服制剂品种的微生物限度，不包括外用制剂。其中原料品种占规定微生物限度品种数近90%（53/60），口服制剂品种仅占1/10（6/60）。BP和EuP以控制原料的微生物污染为主，制剂品种为辅。（3）微生物限度的差异①细菌数、霉菌和酵母菌数•USP•原料和口服制剂(2/3)多数品种要检查细菌数、霉菌和酵母菌数，少数品种不检查细菌数、霉菌和酵母菌数；少部分品种只检查细菌，不检查霉菌和酵母菌；个别品种（欧车前壳）只检查霉菌和酵母菌，不检查细菌。•外用制剂品种(1/3)绝大多数未规定细菌数、霉菌和酵母菌数，少数品种只规定了细菌数，未规定霉菌和酵母菌数。细菌数分的档次有10档（10，102，2×102,3×102，5×102，103，104，105，106，107）。霉菌和酵母菌数有11档（10，2×10,5×10，102，15×10，2×102，3×102，5×102，103，104，105）。菌数的档次分得如此精细，值得研讨。BP和EuP•原料、口服制剂的绝大多数品种规定了细菌数、霉菌和酵母菌数，•有8个原料品种（注射葡聚糖1、胰酶、木薯淀粉等）和1个制剂品种（平婆颗粒）未规定细菌数、霉菌和酵母菌数。细菌数分档，有5档：（102，103，104，105，107），霉菌和酵母菌数分档，有3档：（102，104，105）。细菌数的档次少，霉菌和酵母菌数只一个档，1g或1ml不超过102cfu。简单易行，符合实际。•植物药的要求用前加沸水处理的草药细菌数1g或1ml不超过107cfu，霉菌和酵母菌数不超过105cfu；用前不加沸水处理的草药细菌数1g或1ml不超过105cfu，霉菌和酵母菌数不超过104cfu。总的来看，美英欧药典对植物药的细菌数、霉菌和酵母菌数的控制比较宽松。••②控制菌•USP•原料和口服制剂的绝大多数品种规定无大肠埃希菌和沙门菌,•有29个品种只规定大肠埃希菌未规定沙门菌，有15个品种（阿拉伯胶、琼脂、脱氧胆酸等）只规定沙门菌未规定大肠埃希菌。•在上述品种中有19个还规定无铜绿假单胞菌，另有19个品种还规定无金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。•26版有1个品种乳蓟提取物（milkthisleextract）规定检查肠道菌（enterobacterial）1g小于103。•27版有12个品种（马栗、乳蓟提取粉、红三叶草等）规定检查肠道菌.其中9个品种规定肠道菌1g小于103，•3个品种规定肠道菌1g小于102。•乳蓟胶囊、乳蓟片规定检查肠道菌（enterobacterial）1g小于102。•1个品种锯叶棕胶囊(sawpalmettocapsules)规定检查肠道菌和大肠菌群1g小于102，•1个品种缬草提取粉（powderedvalerianextract）规定检查大肠菌群和肠杆菌科（Enterobacteriaceal）1g小于103。•表1天然药物微生物限度（USP27）原料活菌数（1g或1ml）大肠埃希菌（10g或10ml）沙门菌（10g或10ml）红三叶草红三叶草粉c106104106104————红三叶草浸出粉红三叶草片106104106104————马栗马栗粉106104106104————马栗提取粉106104——缬草提取粉104103——乳蓟提取粉104103——乳蓟胶囊104103——乳蓟片104103——锯叶棕胶囊104102——c指附加要求不得超过103/g,－要求不得有,＋见专论•27版未收载肠道菌、大肠菌群和肠杆菌科的检查方法，但品种项下有限度要求。•外用制剂品种一般检查金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。其中•有7个品种（苯佐卡因耳用溶液、糠酸莫米松乳膏等）还规定活菌总数1g或1ml小于102cfu,10g或10ml无大肠埃希菌和沙门菌；有7个品种（硝酸米糠唑局部用粉、硫酸多粘菌素B和杆菌肽锌局部吸入剂、磺胺嘧啶银乳膏等）还规定活菌总数。•BP和EuP•原料和口服制剂品种绝大多数规定检查大肠埃希菌，•有28个品种规定大肠埃希菌和沙门菌，•有6个品种（干燥氢氧化铝、复合-镁加铝口服干混悬剂等）还规定1g或1ml肠道菌及某些革兰阴性菌小于102。•英欧药典先收载了肠杆菌科及某些革兰阴性菌的检查方法，而品种项下无限度规定，直至2002版有6个品种规定了肠杆菌科及某些革兰阴性菌的限度要求。•总的说来，USP对控制菌的要求较严。规定10g或10ml样品不得有大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。26版开始检查肠道菌，27版除控制大肠菌群外，还控制肠道菌、肠杆菌科，未控制梭菌。有的品种同时控制肠道菌和大肠菌群或肠杆菌科和大肠菌群。BP和EuP除规定10g或10ml样品不得有沙门菌外，1g或1ml样品不得有大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌，要求不如USP严。尽管BP和EuP早有控制肠道菌和某些革兰阴性菌、梭菌的要求，但规定此要求的品种较少。•USP多数品种检查细菌和霉菌和酵母菌，少数品种不检查细菌和霉菌和酵母菌。细菌数、霉菌和酵母菌数分档过多。BP和EuP多数品种只检查细菌，不检查霉菌和酵母菌；少数品种检查细菌、霉菌和酵母菌。细菌数、霉菌和酵母菌数分档适度。表2药物制剂的微生物质量(BP2002、EuP2002)类别及要求•1类要求无菌的制剂，按有关专论剂型和其他标准灭菌的制剂，应符合无菌检查的规定。•2类局部用和呼吸道用制剂，并要求无菌者外a.需气菌总数需气菌和霉菌和酵母菌不超过102/1g或1mlb.透皮斑：无肠道菌和某些其他革兰阴性菌/1斑，其他制剂：肠道菌和某些其他革兰阴性菌不超过101/1g或1ml。c.不得有铜绿假单胞菌/1g或1ml或1斑•d.不得有金黄色葡萄球菌/1g或1ml或1斑•3类•A口服和直肠给药的制剂••a.活菌总数细菌不超过103，霉菌和酵母菌不超过102/1g或1ml••b.不得有大肠埃希菌/1g或1ml••B.含天然原料动物、植物、矿物的口服制剂，不包括抗菌制剂，有关当局同意的原料微生物污染活菌超过103/g或ml，4类规定的草药除外。•a.活菌总数，细菌不超过104、霉菌和酵母菌不超过102/g或ml。•b.肠道菌和某些其他革兰阴性菌不超过102/g或ml•c.不得有沙门菌（10g或10ml）•d.不得有大肠埃希菌(1g或1ml)•e.不得有金黄色葡萄球菌(1g或1ml)•4类•草药应符合一种或多种植物药（全草、切碎、粉末）•A.用前加沸水处理的草药•a.活菌总数，细菌数不超过107，霉菌和酵母菌不超过105/g或ml。•b.用适当稀释，大肠埃希菌不超过102/g或ml。•B.用前不加沸水处理的草药•a.活菌总数，细菌不超过105、霉菌和酵母菌不超过104/g或ml。•b.肠道菌和某些革兰氏阴性菌不超过103/g或ml。•c.不得有大肠埃希菌(1g或1ml)•d.不得有沙门氏菌(10g或10ml)二、中国药典微生物限度标准•1.现状•1972年我国开展药品微生物污染检查工作，经几年的调查研究，1978卫生、化工、商业三部联合颁发了我国第一个“药品卫生标准”。该标准主要为中药、化学药，按丸、片、散、冲及糖浆、合剂、水剂等剂型规定了微生物限度。包括细菌总数、霉菌总数；口服药品1g或1ml不得检出大肠埃希菌、沙门菌，外用药品1g或1ml不得检出铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌；口服药品不得检出活螨。•1980年版《药品卫生检验方法》中收载了破伤风梭菌检查法，并对用于深部组织、创伤、溃疡及阴道用药开始检查破伤风梭菌。至此形成了我国药品微生物限度检查法及限度标准的基本框架。•15年后，中国药典1990年版第二增补本收栽20个化学药品种的微生物限度标准。中国药典1995年版收载了微生物限度检查法，对少数剂型收载了微生物限度。按剂型制订微生物限度标准，是根据我国国情决定的。从发展看，以品种来制定标准较为合理。•由于新剂型层出不穷，按剂型制订微生物限度标准十分复杂，中国药典2005年版根据用药途径制订药品微生物限度标准是必要的，无论化学药或中药制剂的微生物限度，都有大的变动，同时对含药材原粉和含豆豉、神曲等发酵成分的制剂增订了检查大肠菌群及含豆豉、神曲等发酵成分的制剂还增订了细菌数、霉菌和酵母菌数(表1)。•2.展望