程序升温毛细管色谱法

程序升温毛细管色谱法分析白酒中微量成分的含量一、目的要求1．了解毛细管色谱法在复杂样品分析中的应用。2．了解程序升温色谱法的操作特点。3．进一步熟悉内标法定量。二、基本原理程序升温是指色谱柱的温度，按照适宜的程序连续地随时间呈线性或非线性升高。在程序升温中，采用较低的初始温度，使低沸点组分得到良好分离，然后随着温度不断升高，沸点较高的组分就逐一“推出”。由于高沸点组分能较快的流出，因而峰形尖锐，与低沸点组分类似。显然在初始温度期间，高沸点组分几乎停留在柱入口，处于“初期冻结”状态，随着柱温升高，移动速率逐渐加快，某组分的浓度极大值流出色谱柱时的柱温称为该组分的保留温度Tr。这是一个可用于定性分析的特征参数。在程序升温测酒时，可以用双柱双气路，即用两根完全相同的色谱柱、两个检测器并保持色谱条件完全一致，这样可以补偿由于固定液流失和载气流量不稳等因素引起的检测器噪声和基线漂移，保持基线平直。当使用单柱时，可先不进样运行，将空白色谱信号（基线信号）储存起来，然后进样，记录样品信号与储存的空白色谱信号之差。白酒中微量芳香成分十分复杂，可分为醇、醛、酮、酯、酸等多类物质，共百余种。极性和沸点变化范围很大，传统的填充色谱法不可能做到一次同时分析它们。色谱技术并结合程序升温操作，利用PEG一20M固定液的交联石英毛细管往，以内标法定量，就能直接进样分析白酒中的醇、酯、醛、有机酸等几十种物质。三、仪器与试剂1．GC1120型气相色谱仪，色谱柱EconoCapCaxbowax,30m×0.32mmID×0.25μm,氢火焰离子化检测器，N2000色谱工作站，微量注射器。2．试剂乙醛、乙酸乙酯、甲醇、正丙醇、正丁醇、异戊醇、己酸乙酯、乙酸正戊酯和乙醇（均为分析纯）。四、实验步骤1．按GC112A型气相色谱仪操作方法使仪器正常运行，并调节至如下条件：进样口温度：250℃。检测器温度：250℃；载气N2气流量20mL/min；氢气和空气的流量分别为30mL/min和400mL/min。柱温：起始温度40℃，保持2min；然后以5℃/min升温至180℃。2．标准混合溶液配制在1个10mL容量瓶中预先加人约3/4体积的60%（体积分数）乙醇水溶液，然后分别加入4.0uL乙醛（d=0.78）、乙酸乙酯（0.78）、甲醇（0.79）、正丙醇（0.80）、正丁醇（0.81）、异戊醇（0.81）、己酸乙酯（0.90）、乙酸正戊酯（0.88），用乙醇－水溶液稀释至刻度，混匀。3．标准单样溶液配制在9个10mL容量瓶中预先加人约3/4体积的60%（体积分数）乙醇水溶液，然后在个容量瓶中分别加入4.0uL乙醛、乙酸乙酯、甲醇、正丙醇、正丁醇、异戊醇、己酸乙酯、乙酸正戊酯，用乙醇－水溶液稀释至刻度，混匀。4．样品制备预先用被测白酒荡洗过的10mL容量瓶，移取4.0uL乙酸正戊酯至容量瓶中，再用白酒样稀释至刻度，摇匀。5．实验操作注人1.0ulL白酒样品至色谱仪，进样两次求平均值，记录色谱图。注入1.0uL标准溶液，每次同步开启程序升温、色谱工作站记录色谱图，记录各标准物出峰时间、峰面积，进样两次求平均值。注入1.0uL标准单样溶液至色谱仪，同步开启程序升温、色谱工作站记录色谱图，记录标准物出峰时间。根据记录，确定所测物质在色谱图上的位置。6．如果样品出峰不在标准物以内，那么不计算此峰含量。五、数据及处理(1）利用工作站对标准溶液的色谱图进行图谱优化和积分，并输人各色谱峰的名称和含量，并注明内标物及含量。求出各组分对内标物的相对校正因子。=𝑓𝑓=××Mi、Ai分别为组份的质量、峰面积，MS、AS分别为内标的质量、峰面积。M=VdM：质量V：体积d：密度(2）调出白酒样品的色谱图，进行图谱优化和积分，利用标准溶液的各组分对内标物的相对校正因子，计算白酒样品中各组分的含量。𝐶=×𝐶×其中：Ci——组份i的含量，g／LCs——内标物的含量，g／L——组份i的峰面积As——内标物的峰面积——组份i的相对校正因子C=M/VC:浓度M：质量V：体积六、注意事项(l）在一个程序升温结束后，需等待色谱仪回到初始状态并稳定后，才能进行下次进样。(2）如果测定的组分沸点范围变化大，应采用多内标法定量。七、思考题1．简述程序升温的优点。2．严格来说白酒分析应采用多内标法定量，为什么？