空气微生物监测标准操作规程

空气微生物监测标准操作规程1.目的：正确进行空气微生物监测一、采集指征：1.医院感染监控重点科室，每月常规监测。2.发生医院感染暴发流行时。二、采集方法：平板暴露法1.采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。2.采样高度：与地面垂直高度80~150cm。3.布点方法：室内面积≤30㎡，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1m处；室内面积30㎡，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。4.采样方法：将普通营养琼脂平板（直径9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即送检。三、平板暴露法结果计算公式：将平板置37℃温箱内培养24h计数菌落。空气细菌菌落总数（CFU/m3）=50000N/(A×T)式中A为平板面积（cm2)；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu）。四、结果判定Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板），未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；五、注意事项1.采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样。2.平皿应新鲜透亮，在保质期内。2.目的：正确进行物体表面微生物监测一、采集指征1.医院感染监控重点科室，每月常规监测。2.发生医院感染暴发流行时。二、采集方法1.采样时间：在消毒处理后4h内进行采样。2.采样面积：被采表面100cm2,取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。3.采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个，用浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支（最好用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子），在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入5ml含蒸馏水的试管中（最好是含相应中和剂的无菌洗脱液试管内），立即送检。4.门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。三、结果计算方式：物体表面细菌菌落总数检查：0.5ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。（cfu/cm2）=平板菌落数×采样液稀释倍数/采样面积（cm2）四、结果判断：Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类区域：细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅶ类区域工作人员：细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌为消毒合格。3.目的：正确进行医务人员手的微生物监测一、采集指征1.医院感染监控重点科室，每月常规监测。2.发生医院感染暴发流行时。二、采集方法1.采样时间：在接触患者或从事医疗活动前进行采样。2.采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有5ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米cm2计算。三、结果计算方式：0.5ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。手细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×采样液稀释倍数30×2四、结果判断Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类区域：细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅶ类区域工作人员：细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的医护人员手不得检出沙门菌为消毒合格。4.目的：正确进行医疗用品的微生物监测一、采集指征1.医院感染监控重点科室，每月常规监测。2.发生医院感染暴发流行时。二、采集方法1.采样时间：在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。2.采样量及采样方法：可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中“无菌检查法”规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。3.无菌检查：参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中“无菌检查法”。三、结果计算方式：1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放37℃温箱内培养24~48h计数菌落。物体表面细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×采样液稀释倍数×采样面积（cm2）四、结果判断标准：进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。接触粘膜的医疗用品细菌菌落总数≤20cfu/g或100cm2,不得检出病原微生物。5.目的：正确进行血液和腹膜透析所用的水及透析液的微生物学监测一、采集指征1.医院感染监控重点科室，每月常规监测。2.发生医院感染暴发流行时。二、采集方法采样点：透析用水出口（自来水经过过滤、软化、活性炭吸附、去离子逆渗透等步骤处理后的出口）、透析液出口（即透析结束时透析液离开透析器的出口）。如疑有透析液污染或严重感染病例，应增加采样点，如原水口、透析液配比机、反渗水出口、贮水罐出口、透析液进口等。三、培养结果计算方式：取透析用水或透析液1ml放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放37℃温箱内培养24~48h计数菌落。细菌菌落数（cfu/ml）=平板上菌落数×采样液稀释倍数×所取液体的容积（ml）四、结果判断标准：透析用水的细菌落菌总数≤100cfu/ml；透析结束时，透析液细菌落菌总数≤2000cfu/ml，并且无致热原物质存在。