第25章疱疹病毒

第25章疱疹病毒2概述第一节单纯疱疹病毒第二节水痘－带状疱疹病毒第三节巨细胞病毒第四节EB病毒第五节其它疱疹病毒主要内容THEEND3疱疹病毒科(Herpesviridae)是一组中等大小、有包膜的DNA病毒，现有114个成员，根据其生物学特点可分为三个亚科：•α亚科：主要包括单纯疱疹病毒属的单纯疱疹病毒1型和2型（HSV-1，2）,及水痘病毒属的水痘-带状疱疹病毒（VZV）。•β亚科：主要包括巨细胞病毒（CMV），玫瑰疹病毒属的人疱疹病毒6型（HHV-6）和7型（HHV-7）。•γ亚科：主要包括淋巴滤泡病毒属的EB病毒（EBV）和细长病毒属的人疱疹病毒8型（HHV-8）。概述4疱疹病毒的共同特点1.形态特点：病毒体呈球形，核衣壳二十面体立体对称结构，线性双链DNA，存在末端重复序列和内部重复序列。核衣壳周围有一层厚薄不等的非对称性披膜。最外层是包膜，有糖蛋白刺突。2.培养特点：人疱疹病毒（EB病毒除外）均能在二倍体细胞核内复制，产生明显的CPE，核内出现嗜酸性包涵体。病毒可通过细胞间桥直接扩散。感染细胞同邻近未感染的细胞融合成多核巨细胞。3.感染特点：病毒表现为增殖性感染和潜伏性感染。后者病毒不增殖，其基因的表达受到抑制，稳定地持续于细胞核内，刺激因素作用后可转为增殖性感染。有部分病毒还具有整合感染作用，与细胞转化和肿瘤的发生相关。5一、病毒特性球形，由核心、衣壳、被膜及包膜组成，衣壳呈20面立体对称含双股DNA，包括两个互相连接的长片段（L）和短片段（S），L和S的两端有反向重复序列。包膜表面含糖蛋白，参与病毒对细胞吸附/穿入、控制病毒从细胞核膜出芽释放及诱导细胞融合。并有诱生中和抗体和细胞毒作用。HSV有HSV-1和HSV-2二个血清型；HSV的抵抗力较弱，易被脂溶剂灭活第一节单纯疱疹病毒6二、临床意义HSV感染在人群中非常普遍，人类是其惟一的宿主。HSV包括HSV-1和HSV-2两种不同类型。1.原发感染HSV-1原发感染多发生在婴幼儿或儿童，常为隐性感染。HSV-2原发感染为生殖器疱疹，大多发生在青少年以后。2.潜伏感染和复发3.先天性感染HSV-2通过胎盘感染，易发生流产、胎儿畸形、智力低下等先天性疾病。4.HSV-2感染与肿瘤发生7(一)标本采集(二)检验方法1.病毒体、抗原及其他标志物的直接检查1）间接IFA或免疫组化染色检测病毒抗原2）电镜负染3）Wright-Giemsa染色镜检，观察核内包涵体及多核巨细胞三、微生物学检验82.病毒分离培养确诊HSV感染的“金”标准。标本接种人胚肾、人羊膜或兔肾等易感细胞。HSV引起的CPE常在2~3d后出现。HSV-1和HSV-2的单克隆抗体、HSV型特异性核酸探针等可用于鉴定和分型。3.特异性抗体检测对临床诊断意义不大。9一、病毒特性类似于HSV，其基因组为125kb的双链DNA；具有30多种结构与非结构蛋白，部分与HSV有交叉；VZV能够在人胚组织细胞中缓慢增殖，出现CPE较HSV局限，可形成细胞核内嗜酸性包涵体。该病毒只有一个血清型。第二节水痘-带状疱疹病毒10二、临床意义水痘-带状疱疹病毒可由同一种病毒引起两种不同的病症。水痘是VZV的一种原发性感染，也是儿童的一种常见传染病，传染性强，2~6岁为好发年龄，患者是主要传染源。儿童时期患过水痘，病毒可潜伏在脊髓后根神经节或者颅神经的感觉神经节等部位，当机体受到某些刺激，细胞免疫功能损害或低下等，均可诱发带状疱疹。复发感染时，活化的病毒经感觉神经纤维轴索下行至皮肤，在其支配皮区繁殖而引起带状疱疹。一般在躯干，呈单侧性，疱疹水疱集中在单一感觉神经支配区，串联成带状，疱液含大量病毒颗粒。11一般根据临床症状和皮疹特点即可对水痘和带状疱疹作出诊断，但症状不典型或者特殊病例则需辅以实验诊断。临床标本主要有疱疹病损部位的涂片、皮肤刮取物、水疱液、活检组织和血清。可通过病毒分离、免疫荧光、原位杂交或PCR方法，检测患者组织或体液中VZV或其成分。三、微生物学检验12一、病毒特性CMV具有典型的疱疹病毒形态。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种属特异性，人巨细胞病毒（HCMV）只能感染人，在人纤维细胞中增殖。细胞中增殖缓慢，初次培养30～40d出现CPE，细胞肿大变园，核变大，核内出现绕有一轮“空晕”的大型包涵体，形似“猫头鹰眼”。第三节巨细胞病毒13二、临床意义在人类CMV感染非常普遍，并且人是HCMV的唯一宿主。初次感染多在2岁以下，大多呈隐性或潜伏感染，但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。在孕妇，CMV原发或复发感染均可引起胎儿宫内感染或围产期感染，导致胎儿畸形、智力低下或发育弛缓等1．先天性感染2．产期感染3．儿童及成人感染4．细胞转化以及与肿瘤的关系141.病毒分离：是诊断CMV感染的有效方法。2.抗原检测：主要应用特异性抗体作免疫荧光，直接检测白细胞、活检组织、组织切片、支气管肺泡洗液等临床标本中的CMV抗原。3.抗体检测：特异性IgG抗体需测双份血清以作临床诊断，同时了解人群感染状况；IgM抗体只需检测单份血清，用于活动性CMV感染的诊断。4.病毒核酸：检测核酸杂交、PCR三、微生物学检验15第四节EB病毒一、病毒特性EB病毒系疱疹病毒科嗜淋巴病毒属EBV抗原分为2类：①病毒潜伏感染时表达的抗原，包括EBV核抗原(EBNA)和潜伏感染膜蛋白（LMP），这类抗原的存在表明有EBV基因组。②病毒增殖性感染相关的抗原，包括EBV早期抗原(EA)和晚期抗原EBV衣壳抗原(VCA)和EBV(MA)。16二、临床意义1．传染性单核细胞增多症2．Burkitt淋巴瘤多见于5～12岁儿童，3.鼻咽癌BV与鼻咽癌关系密切，171.病毒分离2.病毒抗原及核酸检测检测病毒特异性蛋白质抗原（如病毒核蛋白EBNA等）多采用免疫荧光法。利用核酸杂交和PCR或RT-PCR，可在病变组织内检测病毒核酸和病毒基因转录产物。但核酸杂交法的敏感性低于PCR法。3.血清学诊断用免疫荧光法或免疫酶法，检测病毒VCA-IgA抗体或EA-IgA抗体，滴度≥1:5~1:10或滴度持续上升者，对鼻咽癌有辅助诊断意义。传染性单核细胞增多症患者血清中VCAIgM抗体阳性率较高。三、微生物学检验18一、人疱疹病毒6型第五节其它疱疹病毒人疱疹病毒6型(humanherpesvirus-6,HHV-6)在人群中的感染十分普遍，60~90%的儿童及成人血清中可查到HHV-6抗体，健康带毒者是主要的传染源，经唾液传播。HHV-6的原发感染多见于6m至2岁的婴儿，感染后多无症状，少数可引起幼儿丘疹或婴儿玫瑰疹。常急性发病。病原体检查可采集早期原发感染病儿的唾液和外周血淋巴细胞标本，接种经PHA激活的人脐血或外周血淋巴细胞作HHV-6病毒分离。也可用原位杂交和PCR技术检测受感染细胞中的病毒DNA。间接免疫荧光法常用于测定病毒IgM和IgG类抗体，以确定是近期感染和既往感染。19二、人疱疹病毒7型◎是一种普遍存在的人类疱疹病毒◎从婴儿急性、慢性疲劳综合征和肾移植患者的外周血单核细胞中均分离出HHV-7。绝大多数人都曾隐性感染过HHV-7，2岁以上的婴儿HHV-7抗体阳性率达92%。HHV-7主要潜伏在外周血单个核细胞和唾液腺中，唾液传播是其主要的传播途径。◎该病毒的分离培养条件与HHV-6相似，特异性PCR、DNA分析等试验可用于病毒鉴定。因CD4分子是HHV-7的受体，抗CD4单克隆抗体可抑制HHV-7在CD4+T细胞中增殖。由于HHV-7与HIV的受体皆为CD4分子，两者之间的互相拮抗作用，将为HIV的研究开辟新的途径。20三、人疱疹病毒8型人疱疹病毒8型(HHV-8)，1993年从艾滋病患者伴发的卡波济肉瘤(Kaposisarcoma,KS)组织中发现。该病毒为双链DNA（165kb），主要存在于艾滋病卡波济肉瘤组织和艾滋病患者淋巴瘤组织。HHV-8与卡波济肉瘤的发生、血管淋巴细胞增生性疾病及一些增生性皮肤疾病的发病有关。21