电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响

中国组织工程研究第20卷第32期2016–08–05出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchAugust5,2016Vol.20,No.32ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH4859·研究原著·苗玲，女，1974年生，吉林省洮南市人，汉族，2005年吉林大学毕业，副教授，主要从事基础外科研究。中图分类号:R394.2文献标识码:A文章编号:2095-4344(2016)32-04859-06稿件接受：2016-05-10电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响苗玲(吉林省白城医学高等专科学校，吉林省洮南市137100)引用本文：苗玲.电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响[J].中国组织工程研究，2016，20(32):4859-4864.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.32.022ORCID:0000-0001-5444-1213(苗玲)文章快速阅读：文题释义：海马体：又名海马回、海马区、大脑海马，海马体主要负责记忆和学习，日常生活中的短期记忆都储存在海马体中，如果一个记忆片段，比如一个电话号码或者一个人在短时间内被重复提及的话海马体就会将其转存入大脑皮质，成为永久记忆。电针：电针是针刺疗法中的一种，是电刺激和针刺效应的结合，具有方便快捷、容易定量、可持续刺激等优点，是目前临床治疗缺血性脑血管疾病的常用针刺方法。脾虚证：中医的脾虚证指机体因脾气不足、失其健运而导致各种外在表现的证候类型，多由饮食不节所致。病理条件下，若脾失健运，气血津液生化不足，则髓海不充，脑失所养，从而出现记忆力减退、思维迟钝等症，治当益气健脾养血以养脑神。若脾失升清，清阳不升，浊阴不降，则脑气失养，九窍不利而出现健忘、头昏、眼花、耳鸣等症，治当益气升阳。摘要背景：脾虚证不仅对人体的免疫系统和消化系统等产生不同程度的影响，且脾与脑存在密切的生理联系，因此脾虚证还会影响到中枢神经系统的正常功能。目的：分析电针在脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化中的作用机制。方法：60只SD大鼠随机分为3组：正常组、对照组以及电针组。对照组和电针组均制备脾虚证动物模型，模型制备后2周，电针组实施电针治疗。造模后2周，测量正常大鼠和模型大鼠的体质量。治疗后1，2，3，4周，分别取各组5只动物进行组织学检测，观察海马区神经干细胞增殖分化情况。结果与结论：①体质量：造模后2周模型组显著低于正常组(P0.05)；②BrdU阳性细胞数：造模后2，3，4周电针组均显著高于正常组和对照组(P0.05)；③BrdU/巢蛋白阳性细胞数：对照组造模后1周显著低于同期正常组和电针组，2，4周显著低于同期电针组，3周显著低于同期正常组(P0.05)；2，3，4周电针组均显著高于正常组(P0.05)；④BrdU/胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数：造模后1，2，4周对照组显著低于其他2组，2周电针组显著高于正常组(P0.05)；⑤BrdU/神经元特异性烯醇化酶阳性细胞数：造模后1，2周对照组显著低于其他2组，3周电针组显著高于正常组(P0.05)。⑥结果表明，电针可以有效促进海马区神经干细胞的增殖，并促进细胞向星形胶质细胞、神经元方向进行分化。关键词：干细胞；分化；电针；脾虚证；海马区；神经干细胞；细胞增殖；细胞分化；动物实验主题词：干细胞；神经干细胞；海马；细胞分化电针在脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化中的作用60只SD大鼠对照组20只正常组20只制备脾虚证动物模型针刺双侧足三里穴制备脾虚证动物模型测量体质量获取标本，免疫组化检测电针组20只苗玲.电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响P.O.Box10002,Shenyang110180(BaichengMedicalCollege,Taonan137100,JilinProvince,China)AbstractBACKGROUND:Spleendeficiencyhasvaryingimpactontheimmunesystemanddigestivesystemofthehumanbody,andcanalsodamagethenormalfunctionofthecentralnervoussystemasthereisacloserelationshipbetweenthespleenandbrain.OBJECTIVE:Toexploretheeffectofelectroacupunctureontheproliferationanddifferentiationofneuralstemcellsintherathippocampusofspleendeficiencysyndrome.METHODS:SixtySprague-Dawleyratswererandomlydividedintothreegroups:normal,controlandelectroacupuncturegroups.Theanimalmodelofspleendeficiencysyndromewaspreparedinthecontrolgroupandelectroacupuncturegroup.Twoweeksaftermodeling,ratsintheelectroacupuncturegroupweregivenelectroacupuncturetreatment,andthechangesofbodymassinnormalratsandmodelratsweremeasured.Fiveratsfromeachgroupweretakentoobservethehistologicalchangesofneuralstemcellsinthehippocampusat1,2,3,4weeksaftertreatment.RESULTSANDCONCLUSION:Thebodymassofratsinthemodelgroupwassignificantlylowerthanthatinthenormalgroupat2weeksaftermodeling(P0.05).Intheelectroacupuncturegroup,thenumberofBrdUpositivecellswassignificantlyhigherthanthatinthenormalgroupandcontrolgroupat2,3,4weeksaftermodeling(P0.05);thenumberofBrdU/Nestinpositivecellswassignificantlyhigherthanthatinthenormalgroupat2,3,4weeks(P0.05);thenumberofBrdU/glialfibrillaryacidicproteinpositivecellswassignificantlyhigherthanthatinthenormalgroupat2weeks(P0.05);andthenumberofBrdU/neuronspecificenolasepositivecellswassignificantlyhigherthanthenormalgroupat3weeks(P0.05).Inthecontrolgroup,thenumberofBrdU/Nestinpositivecellswassignificantlylowerthanthatinthenormalgroupandelectroacupuncturegroupat1weekaftermodeling,significantlylowerthanthatintheelectroacupuncturegroupat2and4weeks,andsignificantlylowerthanthenormalgroupat3weeks(P0.05);thenumberofBrdU/glialfibrillaryacidicproteinpositivecellswassignificantlylowerthanthatinthenormalgroupandelectroacupuncturegroupat1,2,4weeks;andthenumberofBrdU/neuronspecificenolasepositivecellswassignificantlylowerthanthatinthenormalgroupandelectroacupuncturegroupat1,2weeks.Takentogether,theseexperimentalfindingsshowthatelectroacupuncturetreatmenteffectivelypromotestheproliferationofhippocampalneuralstemcellsthatareinducedtodifferentiateintoastrocytesandneurons.Subjectheadings:StemCells;NeuralStemCells;Hippocampus;CellDifferentiationCitethisarticle:MiaoL.Electroacupuncturepromotestheproliferationanddifferentiationofneuralstemcellsintherathippocampusofspleendeficiencysyndrome.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiu.2016;20(32):4859-4864.0引言Introduction中医认为脾是一个非常重要的器官，其可以促进消化功能，可以促进全身的正常运行，而人体一旦出现脾虚的问题就会给身体造成一系列的影响。脑为“元神之府”，其正常发育以及各项生理功能的发挥，都需要依靠脾胃运化的充养[1]。脾为后天之本，人的一切生命活动所需要的物质能量无一不是依靠脾胃的功能实现的。因此，脑要正常发挥作用，与脾胃有着非常紧密的联系。因此，如果出现脾胃虚弱的情况，便会对大脑产生严重的影响。在病理条件下，若脾失健运，气血津液生化不足，则髓海不充，脑失所养，从而出现记忆力减退、思维迟钝等症，治当益气健脾养血以养脑神。若脾失升清，清阳不升，浊阴不降，则脑气失养，九窍不利而出现健忘、头昏、眼花、耳鸣等症，治当益气升阳。脾虚证指的是机体因脾气不足、失其健运而导致各种外在表现的证候类型，多由饮食不节所致[2-3]。以往的诸多研究也已经证实，脾虚证会对大脑产生重要的影响，导致大脑内神经元以及神经递质等信号转导发生改变，影响脑神经细胞的增殖和分化，从而引起海马等脑组织结构改变[3-5]。针刺疗法是治疗脾虚证的一种重要手段，针刺对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究涉及面较广，从对大鼠神经功能行为缺损的干预、脑组织的病理形态学的改变、脑功能代谢和脑微循环的改善到缺血性神经元凋亡信号转导的影响等方面都有所涉及。电针是针刺疗法中的一种，是电刺激和针刺效应的结合，具有方便快捷、苗玲.电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响ISSN2095-4344CN21-1581/RCOD