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1．某人在测定自来水中的大肠菌群时，先将5升自来水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，分别涂布到4个培养皿中培养，4次培养后计数的菌落数分别是32、38、35、8。请回答下列问题：(1)根据上述结果计算，被检水样大肠菌群指数为________，水样________(“有”或“没有”)达标。(2)大肠杆菌主要分布在人的肠道内，它们与人体的关系是________；水体中大肠菌群的数量多少，是衡量水体被________污染程度的一个指标。(3)下表是某公司研发的一种测定大肠菌群的配方(g/L)营养物质37.9显色剂0.2琼脂12.0pH6.8±0.2,25℃从成分看，该培养基的类型是固体培养基，其中琼脂的化学成分是________，在培养基中的作用是作为________。(4)利用固体培养基对植物作组织培养时，需要对培养基作________处理，对离体的细胞和组织作________处理。解析：第4个培养皿中的数据偏差太大，删除，由前三个数据得到大肠菌群指数为35，水样不达标。琼脂是从海藻中提取的多糖，是一种很好的凝固剂。进行组织培养时需要对培养基进行灭菌处理，而对培养的离体细胞或组织则进行消毒处理。答案：(1)35没有(2)共生粪便(3)多糖支持物(或凝固剂)(4)灭菌消毒2．纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题：(1)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于________内。A．③B．①②C．②③D．①②③(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。(3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了保证抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________________；若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照？_____________________________________________________________。解析：(1)利用刚果红染色法来筛选纤维素分解菌，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当培养基中的纤维素被纤维素酶分解后。刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(2)牛胃内是无氧环境，故应在无氧环境下分离牛胃中的纤维素分解菌。菌落是同种菌体的集合，相距很近的细菌可以形成一个菌落，故菌落数比实际活菌数少。(3)在提取液和分离液中添加缓冲溶液可保证液体的pH不受干扰。探究某种酶活性的最适温度应设置不同的温度梯度进行相互对照。答案：(1)刚果红A(2)保证无氧环境小(低)(3)缓冲溶液设置不同的温度梯度进行相互对照3．(2014·湖南长沙实验中学联考)请分析回答下列问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有________灭菌、干热灭菌和________灭菌。(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是()①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液③吸取0.1mL溶液进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①②③④B．①③②④C．①②④③D．①④②③(3)酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈________色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是_________________________________________________________________。(4)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌，最常使用的接种方法是________________和________________两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为________________。(5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是________________生物(原核、真核)。(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些()①盐的用量②酒的种类和用量③发酵温度④发酵时间⑤辛香料的用量A．①②③④⑤B．①②③C．①②⑤D．③④解析：(1)常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤包括：土壤取样→制备土壤提取液→溶液梯度稀释→平板涂布→微生物培养→分离和纯化。(3)可以利用重铬酸钾在酸性条件下与酒精反应呈灰绿色的原理来检验酒精的存在。(4)从野生酵母菌群中纯化酵母菌常用平板划线法和稀释涂布平板法。由于酵母菌适合生活在偏酸性环境中，而放线菌适合生活在偏碱性环境中，因此可利用选择培养基将二者分离。(5)在腐乳制作过程中，起主要作用的是毛霉，属于真核生物。(6)腐乳制作过程中多种因素都会影响其风味和品质。答案：(1)灼烧高压蒸汽(2)C(3)灰绿红葡萄皮的色素进入发酵液(4)平板划线法稀释涂布平板法选择培养基(5)真核(6)A4．植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源，以纤维素类物质生产燃料乙醇的研究越来越受重视。纤维素酶糖化法是目前常用的方法，其操作过程如图所示：(1)该方法中，常用的微生物Y是________，若从土壤中获得微生物X，请写出分离的流程图：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。为了鉴别微生物X，培养基的成分为、酵母膏、KH2PO4、琼脂、土豆汁等；在该培养基中，的作用是________________。(2)若经选择，微生物X为木霉，则其内分解纤维素的酶至少包括________________三种组分，这三种酶为协同作用，将纤维素分解为葡萄糖。(3)在操作过程中，过程③需________以保证乙醇的产生。(4)操作发现，糖液浓度过高时，葡萄糖的产生会受到抑制，其原因是________________________________________________________________________。解析：(1)微生物Y能发酵糖液产生乙醇，故常用的微生物Y是酵母菌。鉴别纤维素分解菌的培养基中，能被Cx酶和C1酶分解为纤维二糖，可使被刚果红染色的培养基的红色褪去，便于鉴别，也为微生物的生长提供碳源。(2)纤维素酶是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶三种组分。(3)酵母菌发酵产生酒精是无氧呼吸的过程，在操作过程中应密闭发酵。(4)随着产物(葡萄糖)的增多，反应将会受到抑制，其机理为酶的活性受到反馈抑制。答案：(1)酵母菌土壤取样→选择培养→梯度稀释→将菌液涂布到特定的选择培养基上→挑选产生透明圈的菌落提供碳源(或便于鉴别)(2)C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶(3)密闭发酵(4)产物(葡萄糖)过多，反馈抑制了分解秸秆的酶的活性5．(2014·河南焦作模拟)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________________。下图所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是________。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？______。为什么？________________________________________________________________________。(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手。其中需要消毒的是________，需要灭菌的是________________。(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？______________________________________________________________________________________________________。解析：(1)平板划线法所得菌落集中呈线状，D的菌落分布情况可判断为平板划线法接种。(2)为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要对照。(3)消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。对人的手不能进行灭菌。(4)根据题目意思大肠杆菌能产生气体，对培养基进行接种观察有无气泡产生来判断大肠杆菌的有无。答案：(1)稀释涂布平板法D(2)需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)(3)③①②(4)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样。再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌