NankingAgricucturalUniversity——陈飞病毒定义:一类超显微的非细胞生物,每种病毒只有一种核酸;它们只能在活细胞内营专性寄生,靠其宿主代谢系统协助来复制核酸,合成蛋白质等组分,然后再进行装配而得以繁殖。在离体条件下,它们能以无生命的化学大分子状态长期存在并保持其侵染活性。1病毒的结构组成及其功能病毒的群体形态:包涵体inclusion、噬菌斑plaque、空斑plaque和病斑、枯斑lesion2病毒粒子的对称方式:螺旋对称、二十面体对称、双对称。具有双对称结构的典型例子是有尾噬菌体吸附期潜伏期裂解期(时间)(噬菌斑数)NankingAgricucturalUniversity——陈飞(tailedphage),其壳体由头部和尾部组成。包装有病毒核酸的头部常呈二十面体对称,尾部呈螺旋对称。3病毒的一步生长曲线及其作用;4病毒增殖的一般过程,不同种类病毒增殖过程特点;①吸附adsorption/attachment②侵入penetration/injection③脱壳uncoating④病毒大分子的合成病毒基因组的复制与表达⑤装配assembly⑥成熟maturation⑦释放release全保留复制模式:多数dsRNA病毒5病毒的基因组类型及复制表达途径;ⅠdsDNA——》+mRNAⅡ+DNA——》dsDNA——》+mRNAⅢdsRNA——》+mRNAⅣ+RNA——》+mRNAⅤ-RNA——》+mRNAⅥ+RNA——》-ssDNA——》dsDNA——》+mRNAⅦdsDNA——》+RNA——》dsDNA——》+mRNA6病毒的非增殖性感染类型、特点及有关概念。非增殖性感染:感染由于病毒、或是细胞的原因,致使病毒的复制在病毒进入敏感细胞后的某一阶段受阻,结果导致病毒感染的不完全循环。在此过程中,由于病毒与细胞的相互作用,虽然亦可能导致细胞发生某些变化,甚至产生细胞病变,但在受染细胞内,不产生有感染性的病毒子代。包括:1、流产感染(abortiveinfection)2、限制性感染(restrictiveinfection)3、潜伏感染(latentinfection)限制性感染(restrictiveinfection)因细胞的瞬时允许性产生,导致:(1)病毒持续存在于受染细胞内不能复制,直到细胞成为允许性细胞,病毒才能繁殖;(2)一个细胞群体中仅有少数细胞产生病毒子代。NankingAgricucturalUniversity——陈飞潜伏感染(latentinfection)在受染细胞内有病毒基因组持续存在,但并无感染性病毒颗粒产生,受染细胞也不会被破坏。潜伏感染的另一个极端情况是由于病毒基因的功能表达导致宿主基因表达的改变——恶性细胞。7了解病毒分类的现状8病毒分类与其它微生物分类的区别9病毒分类的主要依据10了解病毒突变体的类型11病毒之间的遗传互作与非遗传互作12亚病毒的类型,各有何特点?13朊病毒的研究进展,常见的朊病毒病。14研究亚病毒的意义15昆虫病毒的特点及其应用16植物病毒的症状特点17植物病毒传播18病害防治原理与方法19植物病毒抗病基因工程20提纯、纯化原理与方法21检测原理与方法22病毒学研究的主要技术与原理23噬菌体的一般形态24噬菌体的危害与应用25噬菌体展示技术名词解释:1衣壳(capsid):包围着病毒核酸的蛋白质外壳,由蛋白质亚基(capsomer)对称的、有规律地排列而成,是病毒毒粒的基本结构。2包膜(envelope):有些病毒具包裹核衣壳的一层脂蛋白膜,它是病毒以出芽方式成熟时,由细胞膜衍生而来的。有维系毒粒结构,保护病毒核衣壳。特别是病毒的包膜糖蛋白,具有多种生物学活性,是启动病毒感染所必需的。3包涵体:包涵体是病毒侵入宿主细胞后,在宿主细胞中形成的病毒及相关蛋白的结晶体,一般在光学显微镜下可见。包含体的特性:a在许多有机溶剂中不溶解,但它们溶解于碳酸钠、氢氧化钠、氨的水溶液中。b对蛋白酶抗性强,c在自然条件下比较稳定,落到土壤中的包含体病毒能保持活性多年d对高温敏感4非结构蛋白:病毒基因组编码的,在病毒复制过程中产生并具有一定功能,但并不结合于毒粒中的蛋白质。5结构蛋白:构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质,包括壳体蛋白、包膜蛋白、存在于毒粒中的酶6潜伏期:从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期7裂解量:每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。其值等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。8增殖性感染:感染发生在病毒能在其内完成复制循环的允许细胞内,并以有感染性病毒子代产生为特征。9非增殖性感染:感染由于病毒、或是细胞的原因,致使病毒的复制在病毒进入敏感细胞后的某一阶段受阻,结果导致病毒感染的不完全循环。由于病毒与细胞的相互作用,虽然亦可能导致细胞发生某些变化,甚至病变,但受染细胞内不产生有感染性的病毒子代。10溶源性:感染宿主细胞后不能完成复制循环,噬菌体基因组整合于细菌染色体或以质粒形成存在宿主细胞内,没有成熟噬菌体产生。NankingAgricucturalUniversity——陈飞λ噬菌体:dsDNA,DNA分子的两端各有一条粘性末端,溶源性噬菌体11原噬菌体(prophage):整合于细菌染色体或以质粒形成存在的温和噬菌体基因组。12原噬菌体引起的溶源性细菌除免疫性外的其他表形改变,包括溶源菌细胞表面性质的改变和致病性转变被称为溶源转变(lysogenicconversion)13国际病毒分类委员会(ICTV,1973改名)InternationalCommitteeonTaxonomyofVirus14病毒密码程式cryptogram:核酸类型/核酸链类型:核酸分子量/核酸含量:病毒粒子外形/核衣壳外形:寄主种类/(传播方式/传播介体)15Avirusspeciesisdefinedas“apolytheticclassofvirusesthatconstitutesareplicatinglineageandoccupiesaparticularecologicalniche(位置)”16株系strain:同一病毒的不同系或分离物“型”type:同一病毒的不同血清型变种:与原始野生型株系不同的病毒17DI颗粒:缺陷性干扰(病毒)颗粒,在某些条件下,如细胞培养中接种大剂量病毒并连续传代,易感细胞被感染后只产生少量有感染性的病毒粒子,而大量病毒粒子的基因组不完全,成为DI颗粒。18m.o.i(multiplicityofinfection):每一敏感细胞所能吸附的相应病毒的数量。19交叉复活crossreactivation:一株活性病毒与另一株相关但具有遗传标记的灭活病毒复合感染细胞,由于重组产生具有灭活病毒某些遗传标记的活性病毒重组体,又称标记拯救markerrescue。20复感染复活multiplicityreactivation:现象:以同一株的灭活病毒大量感染敏感细胞时,有时会产生活的感染性病毒。原因:在灭活过程中,遭受破坏的病毒基因组部位不同,发生致死性变异,虽然单独地说,这些病毒都已灭活,但在用它感染大量敏感细胞时,由于取长补短,恢复了原毒株灭活前的所有基因结构而发生复活。21表型混合phenotypicmixing在某些具有共同特点(如衣壳类型或出芽方式)的2种病毒混合侵染中,子代的表型具有双方亲代的特征,而基因型无变化。22类病毒是一个裸露的闭合环状RNA分子,它能感染寄主细胞并在其中进行自我复制使寄主产生病症。类病毒的分子量小,仅为最小RNA病毒的十分之一,如PSTV。所有的类病毒RNA没有mRNA活性。23拷贝选择重组(copy-choicerecombination)在部分具单一分子基因组RNA病毒中,RNA聚合酶选择性地连接到静止模板链上进行RNA子代链的合成。仍属于分子内重组,但不涉及核酸分子的共价断裂。24朊病毒蛋白(PrP)是由一种分子量为33-35kD的正常细胞蛋白prpc发生构型转变形成的,由于它类似于羊搔痒因子,故又称为prpsc。25杆状病毒:有包膜的超大双链闭合环状DNA病毒。昆虫杆状病毒表达载体系统BEVS。26非介体传播:植物病毒从寄主体上,由于伤残或分泌而达到体外,与另一寄主体通过微伤口接触而传染,或通过寄主细胞间的有机结合而传染。介体传播:病毒依附在其它生物体上,借其它生物体的活动而进行传播、感染。27酶联免疫吸附试验(ELISA):将酶标记的抗原或抗体吸附到适当的载体上进行抗原—抗体反应及酶催化反应。28Prpc是一种细胞膜结合的糖蛋白,通过膜内陷可进入细胞内,通常位于细胞内的prpc是可溶性蛋白。参与淋巴细胞的信号转导等,是细胞内正常蛋白。Prpsc:朊病毒蛋白,少量PrPSc与细胞PrPc结合后,以PrPSc为模板,使PrPc发生明显的构象改变而转变为PrPSc,具有传染扩增能力。两者来源于同一个单拷贝基因,宿主20号染色体短臂基因编码。一级结构相同,二级结构不同。prpc变成Prpsc后α螺旋减少,β折叠增加。29干扰素:干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的糖蛋白,是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。可将其分为:IFN-α、IFN-β、IFN-γ。NankingAgricucturalUniversity——陈飞30hypersensitivereaction(HR):过敏反应是指已免疫的机体在再次接受相同物质的刺激时所发生的反应.反应的特点是发作迅速、反应强烈、消退较快;一般不会破坏组织细胞,也不会引起组织损伤,有明显的遗传倾向和个体差异。31如果大量噬菌体在短时间内吸附于同一细胞上,使细胞壁产生许多小孔,也可引起细胞立即裂解,但噬菌体并未增殖,这种现象称为自外裂解(lysisfromwithout)。32内基氏小体:狂犬病毒在脑内形成的包涵体。33组织印迹法:ELISA的基础上发展起来的植物病毒检测技术,灵敏度好特异性强,操作简便,耐保存,能直接显示结果,适合植物病毒大规模普查。基本原理:样品印记采集在载体上,加家兔特异性抗体与病毒反应,加碱式磷酸酶第二抗体反应,用碱式磷酸酶的反应底物进行显色反应,根据颜色变化确定感染情况。34复制酶(RP)是指由病毒编码的,能特异合成病毒+RNA、-RNA的RNA聚合酶,其核心功能是合成全长的病毒基因组RNA。35反义基因是与目的核酸序列(正链或负链)互补的反义序列,它可以抑制或封闭目的基因的复制、剪接和表达。36卫星病毒:单独没有侵染性,必需依赖辅助病毒才能侵染和复制,基因组有缺陷,有外壳蛋白Helpervirus:卫星病毒RNA与辅助病毒基因组RNA核苷酸序列无同源性卫星RNA:病毒中的无侵染性的RNA。卫星RNA是不是Helpervirus??37亚病毒:包括类病毒、朊病毒、卫星病毒、卫星RNA38.稀释限点(dilutionendpoint,DEP):抽提液稀释到最后一个尚有侵染力的稀释度39.钝化温度(thermalinactivationpoint,TIP)病毒在未加处理的抽提液中,在某一温度时暴露10min而达到完全钝化40.体外存活期(L):病毒在抽提液中放在20~22℃条件下,能保持多少时间的侵染力。41密度梯度离心:部分或完全根据颗粒在一个无对流介质中的密度而获得分离42单价噬菌体:只能在一个“变种”的细菌细胞上寄生,甚至只能在一定的菌株上寄生43核蛋白分子:一些简单的病毒仅由核酸和蛋白质外壳(coat)构成。44生物导弹:利用柞蚕卵来培养赤眼蜂,赤眼蜂再携带特定的病毒并以害虫卵为寄主,从而定向对付害虫。45核型多角体病毒(NPV)寄生在寄主细胞核内,包含体内含有多个杆状病毒粒子