白带常规与BV检测检验科-曹均阴道分泌物检查•阴道分泌物俗称“白带”,是由女性生殖系统-阴道、子宫内膜、卵巢等分泌的液体,其中主要是由阴道分泌的液体。一、清洁度取阴道分泌物,用生理盐水涂片,高倍镜检查,根据所含白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、杆菌、球菌的多少,分成I-IV度,判定结果见下表:•清洁度杆菌球菌上皮细胞脓细胞或白细胞个数•I多-满视野0-5个/高倍视野•Ⅱ中少1/2视野5-15个/高倍视野•Ⅲ少多少15-30个/高倍视野•IV-大量->30个/高倍视野临床意义清洁度在I-II度内视为正常,Ⅲ、IV度为异常,多数为阴道炎,可发现阴道霉菌、阴道滴虫等病原体。单纯不清洁度增高而不见滴虫、霉菌者,可见于细菌性阴道炎。二、滴虫检查阴道滴虫呈梨形,比白细胞大2倍,顶端有鞭毛4根,在25-42℃温度下可活动。因此,在寒冷天,标本要采取保温措施。滴虫活动的最适pH为5.5-6.0。三、霉菌检查•在湿片高倍镜下见卵圆形于孢子,革兰染色油镜下可见革兰阳性孢子或假菌丝与出芽细胞相连接,成链状及分枝状。找到阴道霉菌是霉菌性阴道炎的诊断项目。四、线索细胞•为阴道鳞状上皮细胞黏附大量加德纳菌及其他短小杆菌后形成。生理盐水涂片高倍镜下可见该细胞边缘呈锯齿状,细胞已有溶解,核模糊不清,其上覆盖有大量加德纳菌及厌氧菌,使其表面毛糙,出现斑点和大量的细小颗粒。涂片革兰染色后,显示黏附于脱落上皮细胞内的细菌为革兰阴性或染色不定的球杆菌,其中,柯氏动弯杆菌(M.curtisii)是一短小的(平均约1.5μm)革兰染色不定菌,羞怯动弯杆菌(M.mulieris)是一长的(平均约3.0μm)革兰染色阴性菌,阴道加德纳菌(Gardnerellavaginalis)是一种微需氧的、多形性的革兰染色不定杆菌。线索细胞是诊断细菌性阴道病的重要指标。五、淋菌性阴道炎•可在涂片中找到G—双球菌。此方法为诊断淋病性阴道炎的手段之一,淋球菌呈肾形成对排列、凹面相对,革兰染色呈阴性,图片中可见大量细菌被白细胞吞噬(图4-10)六、纤毛菌及细菌•有时在阴道分泌物涂片中可见到肠杆菌、链球菌、纤毛菌等,其中很多都是细菌性阴道炎的病原体。其诊断主要依靠细菌培养,涂片直接查菌,主要用于筛查时参考(图4-11~图4-14)。BV检测(唾液酸法)•细菌性阴道病(BV)是已婚妇女最常见的下生殖道感染之一,是指一类在细菌学上表现为生殖道下常菌群(产H2O2的乳酸杆菌)减少,代之以一组厌氧菌群(类杆菌属族,加德纳菌、莫比伦氏菌属、人型支原体菌属和消化链球菌属等)数量增加所致的临床症候群。唾液BV产品技术要求及要点标本:•1、尽量多取•2、不能用生理盐水浸泡操作:•1、提取液加量不能太多,以棉签充分润湿为准•2、注意搅拌;•3、不能将生理盐水加入反应管;•4、保留棉签反应温度:37-40度反应时间:15分钟结果观察:以棉头的颜色变化为准,棉签头变为蓝色或淡蓝色为阳性,不变色为阴性。唾液BV相关问题•一、阳性率低?1、标本取样部位不正确(宫颈口/阴道壁)2、取样量少(尽可能多取)3、标本用生理盐水浸泡取干标本,先用于镜检(滴生理盐水于玻片上,标本涂片镜检后用于BV检测)4、生理盐水加入反应管:(不可取)5、洗涤标本,丢弃棉签:(不可取)6、没有搅拌:(唾液BV底物包被在反应管底部,需搅拌3-5次)7、反应温度太低:(需调节温度,39-40度)8、反应时间太短:(反应时间应在15-20min)•二.标本含血,怎么报结果?•1、建议尽量避免•2、不报结果或若见明显蓝色为阳性,否则报阴性•3、建议结合临床症状及镜检结果做出综合判断•三.反应出现阶段性的阳性率高或低?•1、排除是否为操作或标本问题•2、与病人来源有关系•四.检测结果与镜检结果不一致?•1、镜下看到线索细胞,我们的试剂检测结果为阴性•①标本取样不一致导致;•②线索细胞虽然有一定的特异性,但碎片及退化的细胞有时被误认为是线索细胞。识别更有赖于标本的采集和操作者对线索细胞的识别、计数能力的共同影响。③作,取样时是否粘生理盐水;④病人用药、性交、阴道冲洗、经期等。⑤根据文献报道由于各种因素差异存在镜检结果与试剂盒检测结果的符合率一般在80%以上。2、镜下看不到线索细胞,我们的试剂检测结果为阳性?•①标本取样不一致导致;②线索细胞与唾液酸酶活性并不是一一对应的关系,尤其是一些属于初期感染的患者,BV致病菌进居但未大量繁殖时,初期感染的很多在镜下都看不到线索细胞。此种情况建议报阳性。③操作;④病人用药、性交、阴道冲洗、经期等。•五.结果观察及判断•注意观察的是棉签头的颜色,反应后棉签只要有变蓝色(包括浅蓝)都判为阳性。颜色的深浅与唾液酸酶的活性及量成正比,颜色越深表示活性越强。唾液酸酶法:操作最简单,但由于BV是多细菌混合感染,因而测定某一种细菌的特异性酶的方法漏诊率较高。研究表明普雷沃菌、部分加德纳菌有此酶活性,但动弯杆菌、消化球菌导致的BV容易漏检。注:具体操作与注意事项待试剂购买到位后再统一讲解!