第四组氢化可的松黄体酮雌二醇的鉴别和区分

氢化可的松、黄体酮、雌二醇的鉴别和区分氢化可的松结构式分子式与分子量C21H30O5362.47性状本品为白色或类白色的结晶性粉末；无臭，初无味，随后有持续的苦味；遇光渐变质。本品在乙醇或丙酮中略溶，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中几乎不溶，在水中不溶。吸收系数取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含10μg的溶液，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录ⅣA），在242nm的波长处测定吸光度，吸收系数（）为422～448。鉴别取本品约0.1mg，加乙醇1ml溶解后，加临用新制的硫酸苯肼试液8ml，在70℃加热15分钟，即显黄色。取本品约2mg，加硫酸2ml使溶解，放置5分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入10ml水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》283图）一致。黄体酮结构式分子式与分子量C21H30O2314.47性状本品为白色或类白色的结晶性粉末；无臭，无味。本品在三氯甲烷中极易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，在水中不溶。熔点本品的熔点（2010年版药典二部附录ⅥC）为128～131℃。鉴别（1）取本品约5mg，加甲醇0.2ml溶解后，加亚硝基铁氰化钠的细粉约3mg、碳酸钠与醋酸铵各约50mg，摇匀，放置10～30分钟，应显蓝紫色。（2）取本品约0.5mg，加异烟肼约1mg与甲醇1ml溶解后，加稀盐酸1滴，即显黄色。（3）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。（4）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》434图）一致。雌二醇结构式分子式与分子量C18H24O2272.39性状本品为白色或乳白色结晶性粉末；无臭。本品在二氧六环或丙酮中溶解，在乙醇中略溶，在水中不溶。熔点本品的熔点（2010年版药典二部附录ⅥC）为175～180℃。鉴别（1）取本品约2mg[1]，加硫酸2ml溶解，有黄绿色荧光，加三氯化铁试液2滴，呈草绿色，再加水稀释，则变为红色。（2）取含量测定项下的溶液，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录ⅣA）测定，在280nm的波长处有最大吸收。（3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》681图）一致。总结：鉴别方法1、用UV法区分雌二醇和氢化可的松、黄体酮2、用异烟肼比色法区分雌二醇和氢化可的松、黄体酮原理：C3－酮基及某些其他位置上的酮基能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合，形成黄色的异烟棕，在一定波长处具有最大吸收3、区分氢化可的松和黄体酮亚硝基铁氰化钠是黄体酮专属而灵敏的反应3、TLC法主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别方法：对照品法要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。