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1选修一专题二达标训练·技能过关[限时45分钟满分100分]一、选择题(每小题5分，共25分)1．下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源解析微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，以便能从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源。答案A2．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是A．操作中需要将菌液进行一系列的梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理解析考查微生物培养的基本原理。依据教材中的基本原理，要在培养基的表面形成单个的菌落需将菌液稀释到一定程度，所以C项错。答案C3.如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B．划线操作须在火焰上进行C．在5区域中才可以得到所需菌落D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌解析本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。答案D24．(2013·深圳一模)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是A．利用平板划线法对细菌进行计数B．以石油为唯一碳源的培养基筛选C．采用稀释涂布平板法分离菌种D．称取和稀释土壤时应在火焰旁解析平板划线法能对细菌进行分离纯化，但不能对细菌进行计数，A错误。答案A5．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于A．空白对照B．标准对照C．相互对照D．条件对照解析乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。答案D二、非选择题(共5小题，满分75分)6．(16分)下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：(1)图甲是利用________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3(4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填图甲或图乙)。解析图甲和图乙分别是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布器。由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行。在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。答案(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)火焰附近存在着无菌区域(3)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长(4)图乙7．(12分)(2012·上海)回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。(1)①过程称为________，②过程是为了________。(2)Ⅰ号培养基称为________(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分________。A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．碳酸氢钠(3)一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了________。在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图中的曲线②。4(4)根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是________。A．40℃～50℃B．50℃～60℃C．60℃～70℃D．70℃～80℃(5)据图判断下列叙述错误的是________。A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降解析本题主要考查微生物培养及酶的相关知识。欲培养和分离嗜热菌单个菌落可采用稀释涂布平板法；①为稀释过程，②为筛选过程；Ⅰ号培养基为选择培养基，加入硝酸铵的目的主要是补充氮元素；高温灭菌的目的是杀死包括细菌芽孢等在内的全部生物；据图可知，工业生产中该酶的最佳温度范围为60℃～70℃。答案(1)稀释单个菌落的筛选(或筛选)(2)选择培养基C(3)杀死培养基中包括细菌芽孢在内的所有生物(4)C(5)A8．(14分)生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用________、________方法从油料作物中提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________，培养基灭菌采用的最适方法是________法。(3)测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测____________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。5解析(1)因为植物油不易挥发，不能选用蒸馏法，可以用压榨法、萃取法从油料作物中提取。(2)微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。分析灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等实验室常用灭菌方法的特点可知，培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。(3)测定培养液中微生物的数量，可选用显微镜直接计数法直接计数。提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前，要先检测其活性，以确定其应用价值。固定化酶技术可以实现酶的反复利用，降低了生产成本。(4)在应用PCR技术扩增DNA片段时，DNA合成(延伸)时温度要控制在72℃，需要具有较强的耐热性的DNA聚合酶催化。答案(1)压榨萃取(注：两空顺序无先后)(2)碳源高压蒸汽灭菌(3)显微镜直接计数酶活性(或：酶活力)固定化酶(或：固定化细胞)(4)PCR(或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应)9．(18分)(2012·郑州三模)请回答下列有关微生物的一些问题。(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含________的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和____________进行消毒。在微生物培养中，对培养基常用______________方法进行灭菌。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_______________________________________。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是：_________________________________________________________________________________________________________。(3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：______________________________。在果醋制作时，运用醋酸菌在________和糖源充足时，将糖分解成醋酸。(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是________和________。(5)微生物的计数：根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是________________________________________________________________。(6)微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的______________(选择、鉴别)培养基中加入____________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变____________色。解析(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层，细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)植物组织培养时，对外植体常用酒精和氧化汞消毒，对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构；可通过在适宜的温度下放置灭菌过的培养基看其6是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型生物。(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(5)因一个菌落可由多个连在一起的细菌形成，所以计算得出的细菌数一般低于实际数目。(6)用选择培养基筛选目的菌，加入酚红指示剂检测尿素分解菌，若存在尿素分解菌，指示剂变红色。答案(1)有机质接近中性(2)氯化汞高压蒸汽灭菌损伤DNA的结构将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)C6H12O6――→酶2C2H5OH＋2CO2＋能量有氧(4)平板划线法稀释涂布平板法(5)当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(6)选择酚红红10．(15分)果酒是用水果本身的糖分被酵母菌发酵成为的酒，含有水果的风味与酒精，是人类最早学会酿造的酒。请完成下列相关问题：(1)如图是人工培养获得纯净的酵母菌菌种的基本程序。配制培养基时，原料称量溶解之后，进行分装包扎并灭菌，常用的灭菌方法是________。平板划线是常用的接种方法，划线之前要对接种环进行________灭菌，原因是___________________________________________。(2)研究发现具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，要添加________和调低________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布于平板。步骤4：根据________筛选出突变菌。(3)酿酒过程中，为检测发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是__________________________________________________。如果检测到活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是________。答案(1)高压蒸汽灭菌法灼烧避免接种环上可能存在的微生物污染培养基(2)高浓度