激光共聚焦显微镜FV1000中文说明书

11激光共聚焦显微镜FV1000-光谱扫描型-(倒置显微镜IX81)简易使用说明书22内容内容启动系统3显微镜镜下观察微分干涉差观察4荧光观察5取图的操作界面6如何取图XY平面单标7XY平面双标同步扫描方式10序列扫描方式13XY平面单标+微分干涉差16XYZ扫描双标19XYL光谱扫描212D操作界面24图像分析打开文件243D图像的叠加25比例尺的使用263D图像的重建273D图像的旋转29Unmixing31保存图像35保存到CD-R36关闭系统37附录3833开启系统开启系统1.打开计算机.2.打开激光器.(打开钥匙开关.)2-1.多线氩离子(458nm,488nm,514nm)ON2-2.氦氖绿(543nm)ON2-3.氦氖红(633nm)ON3.打开汞灯电源开关.4.登陆WindowsXP系统.5.双击快捷方式：打开FV10-ASW应用软件.*系统软件的启动需要等待一定时间.5231UserID:AdministratorPassword:fluoviewUserID:AdministratorPassword:Administrator44显微镜镜下观察显微镜镜下观察„„微分干涉差观察„„1.使用手控面板选择物镜.(参照„Memo„.)2.插入起偏镜.3.插入微分干涉滑块.4.点击FV10-ASW软件中的图标.5.标本聚焦.„Memo„按照7-1的操作转换物镜的倍率之后，对：　　　　●物镜　　　　●各物镜对应的DIC元件*进行操作.*DIC元件1324Note1.使用TD滑块控制卤素灯的光强.Note2.检查滤色片转盘的位置是否为“6.DICT”.如果不是,用手柄按下DICT图标.Note1手控面板用此旋钮进行微分干涉法对比度的调节.55„„荧光观察„„123显微镜镜下观察显微镜镜下观察Handswitch1.使用手控面板选择物镜.2.点击FV10-ASW软件中的图标.3.使用手控面板选择荧光滤色片.(参照„Memo„.)4.标本聚焦.Note2Notes1&3Note1.选择第3步后,显微镜进入荧光观察状态.注意此时汞灯的机械快门要打开.(建议通常机械快门要放在关闭的位置(z).)Note2.检查DIC滑块是否拉出.„Memo„关于荧光滤色片NIBA：蓝色激发/绿色荧光（例：FITC、EGFP等）WIG：绿色激发/红色荧光（例：Rhodamine、DsRed等）Note3.观察之前，检查汞灯的机械快门要放在开启的位置({).66取图的操作界面取图的操作界面扫描模式扫描速度像素数缩放和平移激光输出的调节明场观察(显微镜镜下观察)荧光观察(显微镜镜下观察)扫描的按钮选择XYZ,XYT或XYL每个通道的调节共聚焦的孔径大小卤素灯的光强调节Kalman方式染料选择光路图取图条件的保存调出取图条件TwinScanner设定图像的拇指索引图像显示窗口内存中所显示的文件Lambda扫描的设定物镜聚焦时间间隔和时间计数(用于XYT或XT扫描)λ扫描带宽选择77如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标))„„获取单张图像（XY平面）（荧光图像）„„例：绿色荧光染色（FITC）1.点击FV10-ASW软件中的按钮关闭汞灯快门.同时,点击按钮关闭卤素灯快门.2.点击染料选择按钮.在染料列表中,双击用于观察的荧光染料.*取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双击已指定的荧光染料，并重复步骤2.3.点击Apply按钮.(关闭染料选择面板可以用Close按钮.)123染料选择后的显示界面88„Memo„扫描控制面板:连续扫描:停止扫描:快速扫描(隔行扫描)456如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标))4.点击XYRepeat按钮开始扫描.5.调节绿色(FITC)图像.(图像调节的略述如下.更多的信息,参照附录1.)6.点击Stop按钮停止扫描.(参照„Memo„.)[1]探测器的灵敏度调节(HV)[2]共聚焦的孔径大小调节(C.A.)[3]激光输出的调节(Laser)[1][2][3]调节方法(例:HV调节):点击滑块,HV直接提高(或降低)到指定的位置.点击此按钮或者使用鼠标转轮进行微调.图像调节略述99如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标))7.选择AutoHV,并选择扫描速度.*随着扫描速度变慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就会消除.(也可以使用Kalmanaccumulation方式.更多的信息，参照附录2.)8.点击XY按钮取得一幅图像.9.点击SeriesDone按钮,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出现.10.保存该幅图像:右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像.(保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.)78910„Memo„FV10-ASW专用的图形格式OIF格式:创建“一个含(16-bitTIFF)的图像”和“一个附属文件,”不能单独分割.OIB格式:创建单个的OIF格式的文件,方便进行移动和进行其它的操作.1010如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标))„„获取单张图像（XY平面）（荧光图像）„„例：绿色荧光（Alexa488）＋红色荧光（Alexa546）二重染色同步扫描1231.点击FV10-ASW软件中的按钮关闭汞灯快门.同时,点击按钮关闭卤素灯快门.2.点击染料选择按钮.在染料列表中,双击用于观察的荧光染料.*取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双击已指定的荧光染料，并重复步骤2.3.点击Apply按钮.(关闭染料选择面板可以用Close按钮.)染料选择后的显示界面1111如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标))44.点击XYRepeat按钮开始扫描.5.调节绿色(AlexaFluor488)图像和红色(AlexaFluor546)图像.(图像调节的略述如下.更多的信息,参照附录1.)6.点击Stop按钮停止扫描.(参照„Memo„.)56„Memo„扫描控制面板:连续扫描:停止扫描:快速扫描(隔行扫描)[1]探测器的灵敏度调节(HV)[2]共聚焦的孔径大小调节(C.A.)[3]激光输出的调节(Laser)[1][2][3]调节方法(例:HV调节):点击滑块,HV直接提高(或降低)到指定的位置.点击此按钮或者使用鼠标转轮进行微调.图像调节略述1212如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标))7.选择AutoHV,并选择扫描速度.*随着扫描速度变慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就会消除.(也可以使用Kalmanaccumulation方式.更多的信息，参照附录2.)8.点击XY按钮取得一幅图像.9.点击SeriesDone按钮,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出现.10.保存该幅图像:右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像.(保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.)78910„Memo„FV10-ASW专用的图形格式OIF格式:创建“一个含(16-bitTIFF)的图像”和“一个附属文件,”不能单独分割.OIB格式:创建单个的OIF格式的文件,方便进行移动和进行其它的操作.1313如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标))„„获取单张图像（XY平面）（荧光图像）„„例：绿色荧光（Alexa488）＋红色荧光（Alexa546）二重染色序列扫描(这里介绍线序列扫描.)1231.点击FV10-ASW软件中的按钮关闭汞灯快门.同时,点击按钮关闭卤素灯快门.2.点击染料选择按钮.在染料列表中,双击用于观察的荧光染料.*取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双击已指定的荧光染料，并重复步骤2.3.点击Apply按钮.(关闭染料选择面板可以用Close按钮.)染料选择后的显示界面1414如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标)4567)4.点击序列扫描,并选择线序列方式.5.点击XYRepeat按钮开始扫描.6.调节绿色(AlexaFluor488)图像和红色(AlexaFluor546)图像.(图像调节的略述如下.更多的信息,参照附录1.)7.点击Stop按钮停止扫描.(参照„Memo„.)[1]探测器的灵敏度调节(HV)[2]共聚焦的孔径大小调节(C.A.)[3]激光输出的调节(Laser)[1][2][3]调节方法(例:HV调节):点击滑块,HV直接提高(或降低)到指定的位置.点击此按钮或者使用鼠标转轮进行微调.图像调节略述1515如何取图如何取图((XYXY平面平面--双标双标))8.选择AutoHV,并选择扫描速度.*随着扫描速度变慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就会消除.(也可以使用Kalmanaccumulation方式.更多的信息，参照附录2.)9.点击XY按钮取得一幅图像.10.点击SeriesDone按钮,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出现.11.保存该幅图像:右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像.(保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.)891011„Memo„FV10-ASW专用的图形格式OIF格式:创建“一个含(16-bitTIFF)的图像”和“一个附属文件,”不能单独分割.OIB格式:创建单个的OIF格式的文件,方便进行移动和进行其它的操作.1616如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标++微分干涉差微分干涉差))1234„„获取单张图像（XY平面）　（荧光图像＋微分干涉）„„例：绿色荧光（FITC）+DIC图像1.点击FV10-ASW软件中的按钮关闭汞灯快门.同时,点击按钮关闭卤素灯快门.2.点击染料选择按钮.在染料列表中,双击用于观察的荧光染料.*取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双击已指定的荧光染料，并重复步骤2.3.点击Apply按钮.(关闭染料选择面板可以用Close按钮.)4.选择TD1.染料选择后的显示界面1717如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标++微分干涉差微分干涉差))55.点击XYRepeat按钮开始扫描.6.调节绿色(FITC)图像和微分干涉差的图像.(图像调节的略述如下.更多的信息,参照附录1.)7.点击Stop按钮停止扫描.(参照„Memo„.)67„Memo„扫描控制面板:连续扫描:停止扫描:快速扫描(隔行扫描)[1]探测器的灵敏度调节(HV)[2]共聚焦的孔径大小调节(C.A.)[3]激光输出的调节(Laser)[1][2][3]调节方法(例:HV调节):点击滑块,HV直接提高(或降低)到指定的位置.点击此按钮或者使用鼠标转轮进行微调.图像调节略述1818如何取图如何取图((XYXY平面平面--单标单标++微分干涉差微分干涉差))8.选择AutoHV,并选择扫描速度.*随着扫描速度变慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就会消除.(也可以使用Kalmanaccumulation方式.更多的信息，参照附录2.)9.点击XY按钮取得一幅图像.10.点击SeriesDone按钮,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出现.11.保存该幅图像:右击图像管理器中显示的图像图标，选择另存为保存该幅图像.(保存为“xml”类型是FV10-ASW软件专用的图像格式.)891011„Memo„FV10-ASW专用的图形格式OIF格式:创建“一个含(16-bitTIFF)的图像”和“一个附属文件,”不能单独分割.OIB格式:创建单个的OIF格式的文件,方便进行移动和进行其它的操作.1919如何取图如何取图((XYZXYZ扫描扫描--双标双标))„„获取3D图像(XYZ)(荧光图像)„„例:绿色荧光(FITC)和红色荧光(Rhodamine)双标这里介绍线序列扫描取图的过程.1451.采用13和14页步骤1到7.2.输入StepSize大小(点击OP按钮可以使用推荐的值),并选择.3.点击XYRepeat按钮开始扫描.4.点击和按钮上移焦点位置.(参照„Memo„.