名词解释1、等电点:在某一pH环境中氨基酸解离成阳性离子及阴性离子的趋势相等,所带净电荷为零,在电场中不泳动。此时,氨基酸所处环境的pH值称为该氨基酸的等电点2、蛋白质的三级结构:指蛋白质在二级的基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的构象3、B-折叠:蛋白质中常见的二级结构,是由伸展的多肽键组成的,折叠片的构象是通过一个肽键的羧基氧和位于同一个肽键的另一个酰胺氧之间形成的氢键维持的,氢键几乎都垂直伸展的肽键,这些肽键可以是平行排列或者是反平行排列4、蛋白质的复性:指在一定条件下,变性的蛋白质分子恢复其原有的天然构象并恢复生物活性的现象5、透析:通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。6、离子交换层析:使用带有固定的带电基团的聚合树脂或凝胶层析柱7、别构效应:某些不直接涉及蛋白质活性的物质,结合于蛋白质活性部位以外的其他部位,引起蛋白质分子的构象变化而导致蛋白质活性改变的现象8、米氏常数:是酶反应速度达到最大反应速度一半时底物的浓度。米氏常数是酶的特性常数,只与酶的性质有关,不受底物浓度和酶浓度的影响9、辅基:酶的辅因子或结合蛋白质的非蛋白部分,通过共价键与酶或蛋白质结合的非常紧密,用透析法不能除去10、同工酶:是指有机体内能够催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构组成和理化性质却有所不同的一组酶11、酶活力单位:一个酶活力单位是指在特定条件下,在1min内能转化1umol底物的酶量,或是转化底物中1umol有关基团的酶量12、拓扑异构酶:通过切断DNA的一条或两条链中的磷酸二酯键,然后重新缠绕和封口来改变DNA连环数的酶13、增色效应:当双螺旋DNA熔解时,260nm处紫外吸收增加的现象14、氧化磷酸化:电子从一个底物传递给分子氧的氧化与酶催化由ADP和Pi生成ATP与磷酸化相偶联的过程15、呼吸电子传递链:由一系列可作为电子载体的酶复合体和辅助因子构成,可将来自还原型辅酶或底物的电子传递给有氧代谢的最终的电子受体分子氧16、解偶联剂:一种使电子传递与ADP磷酸化之间的紧密偶联关系解除的化合物17、柠檬酸循环:是用于乙酰CoA中的乙酰基氧化成CO2的酶促反应的循环系统,该循环的第一步是由乙酰CoA经草酰乙酸缩合形成柠檬酸18、脂肪酸的B-氧化:是脂肪酸在一系列酶的作用下,在a碳原子和B碳原子之间断裂,B碳原子氧化成羧基,生成含2个碳原子的乙酰辅酶A和比原来少两个碳原子的脂肪酸19、乙醛酸循环:是某些植物,细菌和酵母菌中柠檬酸循环的修改形式,通过该循环可以收乙醛酸CoA经草酰乙酸净生成葡萄糖,乙醛酸循环绕过了柠檬酸循环中生成两个CO2的步骤20、分子杂交:具有互补序列的不同来源的核酸单链间,经退火处理即可形成双链,形成新的杂交双螺旋简答题1、蛋白质纯化的原理依据和基本程序是什么?答:原理依据:依据蛋白质的各种理化性质,包括分子的大小和形状、和酸碱性质、溶解度、吸附性质和对配体的特异性等。一般程序:前处理、粗分级分离、细分级分离、结晶。2、何谓蛋白质的变性?其本质是什么?答:蛋白质的变性:某些物理的和化学的因素使蛋白质的空间构象发生改变或破坏,导致其生物活性的丧失和一些理化性质的改变,这种现象称为蛋白质的变性作用。变性的本质:稳定蛋白质空间构象的次级键破坏,导致分子的空间构象发生改变,一级结构不变。3、简述三羧酸循环的生理意义是什么?答:生理意义:供能为生物合成提供了中间物三羧酸循环不仅是糖代谢的重要途径,也是脂类化合物和蛋白质最终氧化成CO2和H2O的重要途径。三羧酸循环是CO2的重要来源之一。为呼吸链提供H+和e4、简述尿素循环的原料,基本过程及发生部位答:A、部位肝脏是尿素合成的主要器官,肾脏是尿素排泄的主要器官。B、原料尿素的生物合成需要NH3、CO2(或H2CO3)、鸟氨酸、天冬氨酸、ATP、Mg2+和相关酶的参加。C、过程全部反应过程可分为3个阶段:Ⅰ、CO2、NH3与鸟氨酸作用合成瓜氨酸。(线粒体)Ⅱ、瓜氨酸与天冬氨酸作用产生精氨酸。(细胞液)Ⅲ、精氨酸被精氨酸水解酶水解后放出尿素,并形成鸟氨酸。(细胞液)5、简述DNA和RNA分子的立体结构,它们各有哪些特点?稳定DNA结构的力有哪些?答:DNA双螺旋结构模型特点:两条反平行的多核苷酸链形成右手双螺旋;糖和磷酸在外侧形成螺旋轨迹,碱基伸向内部,并且碱基平面与中心轴垂直,双螺旋结构上有大沟和小沟;双螺旋结构直径2nm,螺距3.4nm,每个螺旋包含10个碱基对;A和T配对,G和C配对,A、T之间形成两个氢键,G、C之间形成三个氢键。DNA三级结构为线状、环状和超螺旋结构。稳定DNA结构的作用力有:氢键,碱基堆积力,反离子作用。RNA中立体结构最清楚的是tRNA,tRNA的二级结构为三叶草型,tRNA的三级结构为倒“L”型。维持RNA立体结构的作用力主要是氢键。6、为什么说三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同通路?哪些化合物可以被认为是联系糖、脂、蛋白质和核酸代谢的重要环节?为什么?答:①三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同氧化分解途径;三羧酸循环为糖、脂、蛋白质三大物质合成代谢提供原料。②列举出糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化的一些化合物,糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化相互转化途径。7、简述蛋白质的酸、碱、酶水解方法的优缺点答:酸水解的优点是不引起消旋,得到L-氨基酸。缺点是色氨酸完全破坏,羟基氨基酸有一小部分被分解,同时天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解碱水解的优点是使蛋白质全部水解,缺点是水解过程中多数氨基酸遭到不同程度破坏,产生消旋,精氨酸脱氢酶水解的优点是不产生消旋,也不破坏氨基酸,缺点是一种酶水解不完全,所需时间长8、糖酵解中不可逆反应是什么?糖异生时如何跨越此障碍。答:不可逆反应:葡萄糖---[葡萄糖-6-磷酸果糖-6-磷酸---1,6-二磷酸果糖磷酸烯醇式丙酮酸---丙酮酸跨越途径:丙酮酸+CO2+ATP---草酰乙酸(丙酮酸羧化酶)草酰乙酸+GTP----磷酸烯醇丙酮酸+CO2(磷酸烯醇丙酮酸羧激酶)1,6-二磷酸果糖----6-磷酸果糖(果糖二磷酸酯酶)6-磷酸葡萄糖---葡萄糖(6-磷酸葡萄糖酯酶)9、简述糖酵解中丙酮酸的去路答:1)在大多数情况下丙酮酸可以通过氧化脱羧变成乙酰CoA,然后进入柠檬酸循环,2)在某些微生物中丙酮酸可以转化为乙醇,这一过程称为酒精发酵。3)在某些环境中(如缺氧)还原为乳酸。10、为什么说砷酸盐是EMP途径的毒物?答:EMP途径的第二个阶段反应中,甘油醛-3-磷酸结合Pi形成1,3-二磷酸甘油酸,该产物经过底物水平磷酸化形成1个ATP。砷酸盐与Pi相似,可代替Pi进攻甘油醛-3-磷酸中间产物的高能键,使无法产生ATP.11、请解释有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活答:底物与别构酶的结合,可以促进随后的底物分子与酶的结合,同样竞争性抑制剂与酶的底物结合位点结合,也可以促进底物分子与酶的其它亚基的进一步结合,因此低浓度的抑制剂可以激活某些别构酶。12、为什么说葡萄糖-6-磷酸是各个糖代谢的交叉点?答:葡萄糖经过激酶的催化变成葡萄糖-6-磷酸,可进入糖酵解途径氧化,也可以进入磷酸戊糖途径代谢,产生核糖-5-磷酸、等重要中间体和生物合成所需的还原性辅酶II;在糖的合成方面,非糖物质经过一系列的转变生成葡萄糖-6-磷酸,葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸酶作用下可生成葡萄糖,葡萄糖-6-磷酸还可在磷酸葡萄糖变位酶作用下生成葡萄糖-1-磷酸,进而生成糖原。由于葡萄糖-6-磷酸是糖代谢途径的共同中间体,由于它沟通了糖代谢分解的众多途径,因此葡萄糖-6-磷酸是各糖代谢途径的交叉点。13、试述三种主要的RNA的生物功能(与蛋白质生物合成的关系)。答:mRNA是信使RNA,它将DNA上的遗传信息转录下来,携带到核糖体上,在那里以密码的方式控制蛋白质分子中氨基酸的排列顺序,作为蛋白质合成的直接模板;rRNA是核糖体RNA,与蛋白质共同形成核糖体,核糖体不仅是蛋白质合成的场所,还协助或参与了蛋白质合成的起始;tRNA是转运RNA,与合成蛋白质所需要的单体-氨基酸形成复合物,将氨基酸转运到核糖体中mRNA的特定位置上。14、乙酰辅酶A可进入哪些代谢途径?请列出答:①乙酰辅酶A进入TCR循环氧化分解为CO2和H2O,产生大量能量;②以乙酰辅酶A为原料合成脂肪酸,进一步合成脂肪和磷脂等;③以乙酰辅酶A为原料合成酮体作为肝输出能源的方式;④以乙酰辅酶A为原料合成胆固醇。15、为什么说转氨基反应在氨基酸合成和降解过程中都起重要作用?答:在氨基酸合成过程中,转氨基反应式氨基酸合成的主要方式,许多氨基酸的合成可以通过转氨酶的催化作用,接受来自谷氨酸的氨基而形成。在氨基酸的分解过程中,谷氨酸也可以先经转氨酶作用把氨基酸上的氨基转移到a-酮戊二酸上形成谷氨酸,谷氨酸在谷氨酸脱氢酶的作用下脱去氨基。计算题1、称取25mg蛋白酶配成25ml溶液,取2ml溶液测得含蛋白氮0.2mg,另取0.1ml溶液测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500ug酪氨酸,假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1ug酪氨酸的酶量,请计算:(1)酶溶液的蛋白浓度及比活(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力答:蛋白浓度:0.2*6.25mg/2ml=0.625mg/ml比活力:(1500/60*1ml/0.1ml)/0.625mg/ml=400u/mg总蛋白:0.625mg/ml*1000ml=625mg总活力:625mg*400u/mg=250000u2、已知牛血清蛋白含色氨酸0.58%,色氨酸相对分子质量为204(1)计算牛血清蛋白的最低相对分子质量(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白的相对分子质量大约为7万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基?答:设最低相对分子质量为X,根据题意可得出:100/0.58=X/204即X=35172用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大约为SDS-PAGE的两倍,说明该蛋白含有2个色氨酸残基,若色氨酸百分含量的测定值准确,则牛血清蛋白准确的相对分子质量为35172*2=703443、(1)假设一个70kg的成年人,体重的15%是甘油三酯,计算从甘油三酯可获得的总能量为多少千焦?(2)假如一个人所需的基础能量是8370J/d,仅仅利用氧化甘油三酯中的脂肪酸为唯一能源,此人能活多久?(3)在饥饿情况下,此人每天失去多少千克体重?答:70kg成年人含甘油三酯大的量为:70*1000*15%=10500g因为人体内氧化1g脂肪可获得约37.66KJ的热量,所以从甘油三酯可获得的总能量为37.66*10500=395430=400000(2)400000/8370=48(d)(3)8370/37660=0.22(kg/d)4、(1)计算一个含有78个氨基酸的α螺旋的轴长。(2)此多肽的α螺旋完全伸展时多长?解:(1)α螺旋中每个残基绕轴旋转100°,沿轴上升0.15nm,故该α螺旋的轴长为:78×0.15nm=11.7nm(2)α螺旋每圈螺旋占3.6个氨基酸残基,故该α螺旋圈数为:78÷3.6圈;α螺旋的直径约为0.5nm,故每圈轴长为0.5πnm。完全伸展的α螺旋长度约为:0.5π×(78÷3.6)≌34.01n5、某原核生物的一个基因组是单链环状的DNA,其碱基含量摩尔百分比为:腺嘌呤24.3,鸟嘌呤24.5,胞嘧啶18.2,胸腺嘧啶32.3。请分别计算其复制型单链DNA和双链DNA中碱基的摩尔百分比?由A=T,C=G,A+G=C+T,得单链时A24.3G24.5C18.2T32.3双链时A=T=28.3,G=C=21.4