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5.2DNA基本操作技术蒋耀文1、琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为（）A300~6000bpB25~1000bpC200~50000bpD300~20000bp2、细菌转化中的电击法转化与温度有关，下列哪个温度最适（）A-15~-10℃B0~4℃C20~25℃D90~100℃3、细菌转化时常需要对受体细菌进行处理，使之成为感受态细胞以增强他们获取DNA的能力。_________是制备大肠杆菌感受态最常用的化学方法。4．简述什么是细菌转化。答案：CBCaCl2法细菌转化是指一种细菌菌株由于捕获了外源DNA而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。金熙1.PCR技术中文全称为：2.PCR技术一个循环包括：、、、三个步骤。3.基因组文库必须具有一定的性和性4.用荧光检测对整个PCR过程中扩增DNA的累积速率可以进行动态监视的技术为技术。答案：1、（聚合酶链式反应or聚合酶链反应）2、（高温变性or高温解旋），（低温退火），（中温延伸）3、（代表性）、（随机性）4、（实时定量PCR）5.3RNA基本操作技术张恩民康文艳1．下列关于cDNA文库的说法正确的是（）A．一个高质量的cDNA文库代表了生物体某一或者组织mRNA中所给的全部或绝大部分信息B．第二链cDNA合成的引物为oligodTC．在cDNA合成的过程中，应选用活性适宜的反转录酶及甲基化dCTPD．在cDNA合成过程中，cDNA两端需加上相同内切酶所识别的接头序列2．cNDA的长度一般为（）A．0~8kbB.0.5~8kbC.0.5~10kbD.8~10kb3.下列选项中不属于基因文库筛选方法的是（）A．核酸杂交法B．PCR筛选法C．免疫筛选法D．SAMROC筛选法4．简述cDNA的合成过程5．细胞中RNA可分为、、以及一些。6．mRNA纯化的常用方法为7.判断RNA凝胶电泳在变性条件下进行（）8．判断目前实验室总RNA抽提常用方法是异硫氰酸胍-苯酚抽提法（）答案1．A2．B3．D4．以mRNA为模板，以oligodT为引物，用反转录酶催化合成第一链cDNA；第二链以第一链为模板，常以RNaseH切割mRNA-cDNA杂合链中的mRNA序列所产生的小片段为引物，由DNA聚合酶催化合成5．mRNA、rRNA、tRNA、小RNA（sRNA）6．寡聚（dT）-纤维素柱色谱法7．对8．对5.4SNP的理论与应用周悦媛1、解释SNP的含义2、根据SNP在基因中的位置可分为哪三类？3、基因分型主要包括哪几种方法？4、导致生物性状改变的直接原因答案1.答：单核苷酸多态性，指基因组DNA序列中由于单个核苷酸的突变而引起的多态性。2.答：基因编码区SNP(cSNP)、基因调控区SNP（pSNP）、基因间随机非编码区SNP（rSNP）3.答：基因芯片技术、Taqman探针技术、分子信标技术、焦磷酸测序法。4.答：非同义SNP。5.5基因克隆技术陈玲单洁玲1．名词解释RACE技术：2.填空（1）cdna差示分析法充分发挥了PCR能以扩增双链DNA模板，而仅以形式扩增单链模板的特性。（2）Gateway克隆技术主要包括和（3）基因的图位克隆法的目的：3.单选从分子生物学的角度，克隆是（D）A具有相同基因型的同一物种的俩个或数个个体组成的群体B同一受精卵分裂而来的单卵双生子C同一祖细胞分裂而来的一群带有完全相同遗传物质的子细胞D将外源DNA插入具有复制能力的载体DNA，使之得到永久保存和复制4.多选Cdna序列有哪些来源（）A序列表达标签B减法cdna库C差式显示D基因文库筛选5.判断Gateway基因大规模克隆法利用λ菌体进行位点特异性DNA片段重组。（）6.简答举出有关基因克隆的具体技术，并简单描述（1）RACE技术：（2）RDA：（3）Gateway大规模克隆技术：（4）基因的图位克隆法：答案：1.利用PCR技术在已知部分CDNA序列的基础上特异性克隆5‘端或3‘端缺失序列的方法。2.1）指数形式线性2）TOPO反应LR反应3）分离未知性状的目的基因3.D4.ABCD5.对6.1）在已知部分CDNA序列的基础上特异性克隆5‘端或3‘端缺失序列的方法。2）特异性扩增目的基因片段3）利用λ菌体进行位点特异性DNA片段重组，实现不需要传统酶切连接过程的基因快速克隆和载体间平行转移，为大规模克隆基因组注释的可译框架提供了保障。4）分离未知性状的基因的一种好办法。5.6蛋白质组与蛋白质组学技术周哲典马永豪1.Westernblot中二抗的作用是A稳定一抗的结构B放大信号C排除非特异性的结合2.以下哪项不是二级抗体的常见分类A放射性标记的抗体B与酶偶联的抗体C本身能发光的抗体D与生物素相偶联的抗体3.双向电泳技术根据蛋白质哪两个特性被分离A颜色B亲水性C等电点D手性碳的个数E相对分子质量F热稳定性4.MALDI-TOP与ESI-MS的研究操作对象是ADNA片段BRNA片段C氨基酸D肽段答案B、C、C和E、D、6.1基因表达研究技术刘文斌（马领的题目还没有）1’原位杂交通常分为和两大类。2’下列哪些技术属于PCR介导的定点突变技术（）A．盒式诱变B.大引物诱变法C.重叠延伸技术D.FISH技术3’PCR介导的定点突变方法与经典定点突变方法相比，具有以下哪些特点（）？A．可在同一试管中完成所有反应B、快速简便C、突变体回收率高D、不能用双链DNA作为模版答案：1.RNA原位杂交、染色体原位杂交2.BC3.ABC6.2基因敲出技术赵聪还没有出题6.3蛋白质及RNA相互作用技术吕政1.酵母单杂交系统是20世纪90年代中期发展起来的新技术，常用于研究和之间的相互作用。酵母双杂交体系巧妙地利用真核生物转录调控因子的组件式特征，因为这些蛋白质往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成，其中结构域和结构域是转录激活因子发挥功能所必需的。答案：1.DNA和蛋白质2.DNA结合转录激活6.4基因芯片及数据分析曹浩文1.简易基因芯片一般可以用手工制作或者2.为了保证基因芯片数据的可靠性，芯片中还需要加入多个。3.简述基因芯片技术的原理4．为什么基因芯片中加入持家基因作为内对照可以保证基因芯片的数据可靠性：参考答案：1.机械手点样2.持家基因3.将大量已知或未知序列的DNA片段固定化，将芯片与待研究的CDNA或其他样品杂交，观察处理分析其表达调控状况。4.持家基因是一类维持细胞正常生长发育的必须基因，其表达水平在细胞内不变，因而可以作为确定其他基因表达信号的相对值李佳1.基因芯片(GENECHIP)又称(DNAmicroarray)2.基因芯片分析分为五个基本步骤：生物学问题，样品制备，生物化学反应，检测以及。3.简述微珠芯片与其他的芯片技术相比较的优势（写出两个即可）：4.简述生物化学代谢途径分析提出的意义：参考答案：1.DNA微阵列2.数据模型分析3.密度高，测试重复性好，定制方便4.操作性强，而且可以将各基因定位到不同代谢途径中并进行统计分析，更简便更有效的处理基因芯片得到的数据信息6.5利用酵母鉴定靶基因功能吴临远1.判断：酵母菌有三种交配型，分别是MATa，MATα，MATa/α，他们都能分别与另两种交配型交配。2.判断：酵母在有氧和无氧条件下都可以生存。3.选择题：利用Yip对酵母基因组进行基因置换，如果该基因是生存必须，那么四分体孢子分离后可以存活与死亡的比例为A、1：3B、2:2C、1:3D、0答案1.错2.对3.B王洁1.酵母细胞的交配型（A、B、C）A.MATaB.MATαC.MATa\α2.酵母单倍体和二倍体细胞的差异（A、B、C）A.二倍体细胞直径大约是单倍体的1.3倍。B.二倍体细胞呈长形或卵圆形，单倍体细胞通常接近圆形。C.二倍体细胞按极性方向出芽，单倍体细胞按轴线方向出芽，即出芽方式不同。判断3.二倍体酵母细胞在低氮、无发酵性碳源的条件下能通过减数分裂形成单倍体孢子。4.基因置换一般在单倍体中进行。答案1ABC2ABC3对4错6.6其他分子生物技术严天宇1.在噬菌体基因组中，目前发现的基因有60多个，其中一半左右参与了噬菌体生命周期的调控，这类基因称为，另外一部分基因称为2.噬菌体展示可用来研究（）A蛋白质-蛋白质相互作用B蛋白质-核酸相互作用C核酸-核酸相互作用D噬菌体外壳蛋白性质答案1.必须基因非必须基因2.A第二章习题2.有关DNATm值的叙述，不正确的是？DA.与碱基含量有关B.无种属特异性C.与G-C含量成正比D.与A-T含量成正比3.DNA解键温度指的是：BA.DNA开始解链时所需的温度B.A260nm达到最大值50%时的温度C.DNA完全解键时所需要的温度D.A260nm达到最大值时的温度4.下列有关DNA变性与复性的叙述，正确的是（）DA.复性后的DNA不可能再变性B.热变形DNA的迅速降温过程称为退火C.热变性DNA迅速冷却到4℃可复性D.热变性DNA经缓慢冷却可复性5.以下哪一项不是维持DNA双螺旋结构稳定性的力是（）CA.碱基对之间的氢键B.双螺旋内的疏水作用C.二硫键D.碱基堆积力6.维持DNA双螺旋结构稳定的力不包括（）AA.碱基分子内能B.氢键C.碱基堆积力D.vanderwaal力7.根据中心法则，遗传信息的传递方式是（）BA.RNA-DNA-蛋白质B.DNA-RNA-蛋白质C.RNA-RNA-DNAD.蛋白质-RNA-DNA8.以下没有参与DNA复制的酶是：DA.解螺旋酶B.连接酶C.引发酶D.限制性内切酶9.关于DNA复制的叙述，错误的是？CA.是半保留复制B.需要DNA指导的DNA聚合酶参加C.能从头合成DNA链D.10.有关DNA复制的叙述，错误的是？DA.新链的方向与模板链方向相同B.新链的延伸方向是5'-3'C.需要DNA聚合酶参加D.合成的新链与模板链完全相同1.某双链DNA分子中，A的含量为15%,则C的含量为（35%）2.DNA复制过程中，滞后链的引发是由（引发体）来完成的3.所以细胞中都带有不同类型、能识别受损核苷酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸位点上的N-B-糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称（AP）位点。1.高等真核生物的大部分DNA不是编码蛋白质T2.所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成亲自链DNA的模板，这样新产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成T3.真核细胞DNA聚合酶和原核细胞的DNA聚合酶一样，都具有核酸外切酶活性F4.原核生物DNA复制过程中，冈崎片段合成的方向与复制叉移动的方向相同FCDBDCABDCD第三章习题1.含有较多稀有碱基的核酸是：BA.rRNAB.tRNAC.mRNAD.线粒体DNA2.关于真核生物mRNA的叙述，正确的是：BA.在细胞质内合成和发挥功能B.前体是hnRNAC.没有帽子结构D.半衰期比其他RNA长3.mRNA合成的原料是：BA.ATP,CTP,GTP,TTP,B.ATP,CTP,GTP,UTPC.dATP,dCTP,dGTP,dTTPD.dATP,dCTPd,GTP,dUTP4.以下有关DNA复制和转录的叙述，正确的是：BA.DNA复制过程新链的合成方向是5'-3'而转录过程新链的合成方向是3'-5'B.复制的产物通常大于转录的产物C.两过程均需要RNA引物D.在生物体内只有一条DNA链转录5.DNA分子中，被转录的链也称：AA.模板链B.编码链C.互补链D.随从链6.原核生物RNA聚合酶中专门负责识别启动子的是：AA.o因子B.a亚基C.w亚基D.B'亚基7.以下有关转录的叙述，正确的是：CA.DNA复制中合成RNA引物不是转录B.逆转录也需要RNA聚合酶C.转录就是一种酶促的核苷酸聚合过程D.转录就是合成mRNA的过程8.有关不对称转录的叙述，正确的是：BA.转录时RNA链可以从5'-3'延长或3'-5'延长B.不同基因的模板链不一定在同一条DNA链上C.分子中有一条DNA链不含任何结构基因D.同一条RNA分别自两条DNA链转录9.真核生物中催化生成tRNA和5SrRNA的酶是：DA.RNA聚合酶IB.RNA聚合酶IIC.D.RNA聚合酶III10.外显