生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案

生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案考试学科生物分离与纯化技术组、命题教师课题组考场考号考生班级系主任考生姓名装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。2．树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。3．两性树脂：同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂4．流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。5．离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。二、单选题（每小题1分，共15分）1．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（B）A.离心分离B过滤C.沉降D.超滤2．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）A：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。3．影响电泳分离的主要因素（B）A光照B待分离生物大分子的性质C湿度D电泳时间4．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C）A、增大B、减小C、先增大，后减小D、先减小，后增大5．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（A）项是正确的叙述。A、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。B、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。C、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。D、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。6．反渗透膜的孔径小于(C)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC2nmD1nm7．凝胶层析中，有时溶质的Kd1，其原因是（B）A、凝胶排斥B、凝胶吸附C、柱床过长D、流速过低8．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A）A、粗且长的B、粗且短的C、细且长的D、细且短的9．在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（C）A.单级萃取B.三级错流萃取C.三级逆流萃取D.二级逆流萃取10．用大孔树脂分离苷类常用的洗脱剂是（B）A、水B、含水醇C、正丁醇D、乙醚E、氯仿11．不能用于糖类提取后的分离纯化的方法是（B）A、活性炭柱色谱法B、酸碱溶剂法C、凝胶色谱法D、分级沉淀法E、大孔树脂色谱法12．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（A）A、分离量大分辨率低的方法B、分离量小分辨率低的方法C、分离量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定13．气相色谱柱主要有（C）。A填充柱B毛细管柱CA或BDA或B及其他14．用活性炭色谱分离糖类化合物时，所选用的洗脱剂顺序为：（D）A、先用乙醇洗脱，然后再用水洗脱B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱C、先用乙醇洗脱，再用其他有机溶剂洗脱D、先用水洗脱，然后再用不同浓度乙醇洗脱15．阴树脂易受有机物污染，污染后，可用（B）处理A柠檬酸B10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液C氨基三乙酸DEDTA三、判断题（每小题1分，共10分）1．蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。（×）2．同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂（√）3．细胞破碎技术是生物分离操作中必需的步骤。（×）4．活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。（√）5．液一液萃取时，常发生乳化作用，使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。（×）6．凝胶层析会使得大分子物质后流出，小分子物质先流出。（×）7．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取。（×）8．珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。（×）9．凝聚与絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的状态不同。（×）10．水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离的方法。（√）题目得分评卷人一题目得分评卷人二题目得分评卷人三装订线四、填空题（每小题1分，共15分）1．阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强酸型），（弱酸型）和（中等强度）；其典型的活性基团分别有（磺酸基团），（羧基），（磷酸基）。2．等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pI））的不同；3．根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的（浓度的比值）一定；4．蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法），（多糖基离子交换色谱法），（高效液相色谱法）和（亲和色谱法）。5．离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种；6．为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。五、简答题（每小题7分，共35分）1．简述蛋白质类药物的分离纯化方法？①沉淀法②按分子大小分离的方法③按分子所带电荷进行分离的方法④亲和层析法2．以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理。答：1、加碱：主要是调节蛋白质到达等电点，是蛋白质带电量减少，吸附力下降从而被洗脱下来。2、加酸：主要是抑制羧酸的电离，使活性基团带电量下降，吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3、加盐：依照质量作用定律，把蛋白质洗脱下来。3．简述软水和无盐水的制备方法。答：①软水的制备：利用钠型磺酸树脂除去水中的钙离子和镁离子等碱金属后即可制得软水。②无盐水的制备：将原水通过氢型强酸性阳离子交换树脂和羟型强碱或弱碱性阴离子交换树脂的组合，经过离子交换反应，将水中所有的阴、阳离子除去，从而制得纯度很高的无盐纯水。4．简述凝胶色谱的分离原理。答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。这样，分子量不同的溶质分子得以分离。5．何谓免疫亲和层析，简述亲和免疫层析介质的制备过程?答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱分离集成产生的一种高效色谱分离技术，其分离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用，从而实现高效的分离。层析介质的制备过程包括：抗体的制备、抗体提取、载体活化，手臂链的连接、抗体的连接等步骤。六、案例分析题（共10分）简述制备胱氨酸的工艺路线？[水解][中和]10N盐酸30%NaOH①猪毛水解液胱氨酸粗品（Ⅰ）117℃，6.5—7小时PH4.8[粗制]②2N盐酸，8%活性炭30%NaOH滤液胱氨酸粗品（Ⅱ）85℃，0.5小时PH4.8[粗制]③1N盐酸，3—5%活性炭12%氨水滤液胱氨酸85℃，0.5小时PH3.5—4.0题目得分评卷人四题目得分评卷人五题目得分评卷人六