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启东市汇龙中学2014届高三生物一轮复习1第37讲基因工程主备人：朱凯燕【复习目标】1.基因工程的诞生(A)2.基因工程的原理及技术(A)。3.基因工程的应用(B)。4.蛋白质工(A)。【基础知识回顾】梳理书本知识15分钟【学习过程】考点一：聚焦基因工程的概念及基本工具【问题思考】1．分析基因工程的概念(1)供体？(2)操作环境？(3)操作水平？(4)原理？(5)受体？(6)本质？(7)优点？2．基因工程的基本工具(判一判)(1)限制酶只能用于切割目的基因()(2)限制酶切割DNA分子具有特异性()(3)限制酶切割DNA分子后可产生黏性末端和平末端两种类型()(4)DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来()(5)E·coliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端()(6)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体()(7)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达()【典例剖析】1．如图所示为部分双链DNA片段，下列有关基因工程中工具酶功能的叙述正确的是(多选)()A．切断a处的酶为限制酶B．连接a处的酶为DNA连接酶C．切断b处的酶为DNA解旋酶D．连接b处的酶为RNA聚合酶2．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为限制酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是()考点二：基因工程的操作步骤【问题思考】(1)获取目的基因的方法？基因工程操作过程中没有涉及碱基互补配对的？核心步骤？(2)基因表达载体的构建—组成？(3)将目的基因导入受体细胞—方法？(4)目的基因的检测与鉴定？启东市汇龙中学2014届高三生物一轮复习2【典例剖析】3、浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题：(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有____________________________________。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指______________________________；步骤②用到的酶有___________________________________________。(2)图中导入重组质粒的方法是____________，在导入之前应用一定浓度的__________________处理受体细菌。(3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用____________________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入________________可将含有目的基因的细胞筛选出来。考点三关注基因工程的应用和蛋白质工程【问题思考】1．基因工程的应用？2．蛋白质工程（1）概念理解①基础？②操作？③结果？④目的？(2)操作过程？（3）实质？3.基因工程的应用(判一判)(1)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中()(2)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用()(3)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体(4)基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的()【典例剖析】4、科学家利用基因工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。请回答有关问题：(1)将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子、终止子和______________等重组在一起，就可构建基因表达载体，再通过____________技术即可导入受精卵中。(2)制备乳腺生物反应器的过程中，目的基因的受体细胞为_____，性染色体组成为________。(3)为确定受体细胞中染色体的DNA上是否插入了目的基因，可利用____________技术进行检测，一般是用放射性同位素标记________________________________作探针。(4)转化成功的受精卵发育成胚胎需要进行体外培养，在培养液中要加入____________等天然成分。