生物安全实验室建立与使用.

生物安全实验室的建立与使用2015年12月14日汇报内容一、什么是生物安全实验室二、生物安全实验室与洁净实验室的区别三、生物安全实验室的建立四、生物安全实验室的管理与使用五、培养基的验收、使用、保存注意事项什么是生物安全实验室？•是通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用（硬件）、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）：确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害；确保周围环境不受其污染；确保实验因子保持原有本性所采取综合措施的实验室。生物安全防护的基本原则(三要素)•安全设备、个体防护装置和措施。•实验室的特殊设计和建设要求。•严格的管理制度和标准化的操作程序和规程目标确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染的目的。洁净实验室与生物安全实验室的区别•洁净实验室只针对实验环境提出洁净要求，不提供对人员或环境的生物安全保护。(超净工作台不能替代生物安全柜)。•普通的微生物实验(不进行病原微生物分离与鉴定)只要求在洁净实验室进行。•进行病原微生物分离与鉴定必须在生物安全实验室中进行。洁净实验室与生物安全实验室的区别空气洁净等级含尘浓度含菌浓度尘粒粒径(μm)尘粒数（个／m3）沉降菌(Φcm碟0.5h）浮游菌(个／m3)100级≥0.5≤3,500≤1≤5≥5010000级≥0.5≤350,000≤3≤100≥5≤2,000100000级≥0.5≤3,500,000≤10≤500≥5≤20,000大于100000(相当于300000级)≥0.5≤10000000≥5≤61800生物安全实验室的主要技术指标级别洁净度级别最小换气次数(次/h)与室外方向上相邻相通房间的最小负压差(Pa)温度℃相对湿度%噪声dB(A)最低照度lx一级_可开窗_18~28≤70≤60200二级_可开窗_18~2730~70≤60300三级7或815或12-1015~2530~60≤60350四级7或815或12-1018~2430~60≤60350注：BSL-3主要实验室相对于大气的最小负压不应小于-30Pa，BSL-4主要实验室相对于大气的最小负压不应小于-40Pa。本表中的噪声不包括生物安全柜、动物隔离器的噪声，如包括上述设备的噪声，则最大不应超过68dB(A)。1、符合BSL-2实验室建设要求。2、实验室门口带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗。3、有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域处还有供长期使用的存储空间。4、在实验室的工作区域处应有存放个人衣物的条件。6、在实验室所有的建筑内配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。7、在实验室内配备生物安全柜。8、设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。9、考虑机械通风，如使用窗户自然通风，有防虫纱窗。10、有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。11、实验室出口有在黑暗是可明确辨认的标识。生物安全二级实验室•一级生物安全防护实验室，简称BSL1或P1•二级生物安全防护实验室，简称BSL2或P2•三级生物安全防护实验室，简称BSL3或P3•四级生物安全防护实验室，简称BSL4或P4实验室生物安全防护分级：BSL：Biosafetylevel；P：Protect.a)生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物；b)生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物；c)生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物；d)生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。BSL-1对健康成年人无已知治病作用的，如大肠杆菌等BSL-2低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、致病性大肠杆菌、沙门氏菌等；BSL-3猪瘟病毒、狂犬病病毒、炭疽杆菌、艾滋病毒等BSL-4炭疽杆菌、霍乱弧菌、埃博拉病毒、天花病毒等。塞拉利昂首都弗里敦中塞友好医院的中国移动实验室我国首个生物安全防护等级最高的实验室——中国科学院武汉国家生物安全实验室（即武汉P4实验室）•BSL1实验室：无须特殊选址，普通建筑物即可•BSL2实验室：在建筑物内考虑设置通风系统•BSL3实验室：在建筑物内自成隔离区•BSL4实验室：远离城区，独立建筑物，或在建筑物中的独立隔离区生物安全实验室选址要求5实验室设计原则及基本要求5.1实验室选址、设计和建造应符合国家和地方环境保护和建设主管部门等的规定和要求。5.2实验室的防火和安全通道设置应符合国家的消防规定和要求，同时应考虑生物安全的特殊要求；必要时，应事先征询消防主管部门的建议。5.3实验室的安全保卫应符合国家相关部门对该类设施的安全管理规定和要求。5.4实验室的建筑材料和设备等应符合国家相关部门对该类产品生产、销售和使用的规定和要求。5.5实验室的设计应保证对生物、化学、辐射和物理等危险源的防护水平控制在经过评估的可接受程度，为关联的办公区和邻近的公共空间提供安全的工作环境，及防止危害环境。5.6实验室的走廊和通道应不妨碍人员和物品通过。5.7应设计紧急撤离路线，紧急出口应有明显的标识。5.8房间的门根据需要安装门锁，门锁应便于内部快速打开。5.9需要时（如：正当操作危险材料时），房间的入口处应有警示和进入限制。5.10应评估生物材料、样本、药品、化学品和机密资料等被误用、被偷盗和被不正当使用的风险，并采取相应的物理防范措施。5.11应有专门设计以确保存储、转运、收集、处理和处置危险物料的安全。5.12实验室内温度、湿度、照度、噪声和洁净度等室内环境参数应符合工作要求和卫生等相关要求。5.13实验室设计还应考虑节能、环保及舒适性要求，应符合职业卫生要求和人机工效学要求。5.14实验室应有防止节肢动物和啮齿动物进入的措施。5.15动物实验室的生物安全防护设施还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验（如：染毒、医学检查、取样、解剖、检验等）、动物饲养、动物尸体及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危险的防护。5.16应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具有适当防护水平的、适用于动物的饲养设施、实验设施、消毒灭菌设施和清洗设施等。5.17不得循环使用动物实验室排出的空气。5.18动物实验室的设计，如：空间、进出通道、解剖室、笼具等应考虑动物实验及动物福利的要求。5.19适用时，动物实验室还应符合国家实验动物饲养设施标准的要求。整体布局微生物实验室自成一区，与其他实验室分开，门口设有门禁，只有相关人员通过许可后才能进入。实验室应明确区分辅助工作区和防护区，实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。防护区中直接从事高风险操作的工作间为核心工作间，人员应通过缓冲间进入核心工作间。实验室辅助工作区应至少包括监控室和清洁衣物更换间；防护区应至少包括缓冲间（可兼作脱防护服间）及核心工作间。。实验室功能区域模块化设计非实验室区域实验室区域办公室信息室档案资料室样品室卫生与清洁室实验室实验辅助室洗涤、高压、制水室实验准备室试剂配制室实验材料储备室培养观察室淋浴、更衣室药物、紧急冲淋装置温度控制室菌种保管室微生物实验室平面布局流向非实验室区域实验准备区域洁净实验室工作区域污染物处理区域病原菌实验室工作区域实验室受控区域原则：洁污流线分明、流程简捷、层次清析去污有效，能有效地切断感染途径，降低感染率。围护结构、装潢装饰围护结构（包括墙体）应符合国家对该类建筑的抗震要求和防火要求。天花板、地板、墙间的交角应易清洁和消毒灭菌。实验室防护区内围护结构的所有缝隙和贯穿处的接缝都应可靠密封。实验室防护区内围护结构的内表面应光滑、耐腐蚀、防水，以易于清洁和消毒灭菌。实验室防护区内的地面应防渗漏、完整、光洁、防滑、耐腐蚀、不起尘。实验室及设备间的高度应满足设备的安装要求，应有维修和清洁空间。在通风空调系统正常运行状态下，采用烟雾测试等目视方法检查实验室防护区内围护结构的严密性时，所有缝隙应无可见泄漏实验室主题框架为彩钢板玻璃隔断，颜色为哑白色。隔断普通玻璃厚度为8MM,为防止沉积灰尘，窗料使用R25MM铝合金圆弧压线；所有二维连接处的内侧均使用R50MM铝合金内圆角，暴露在外的二维连接线的外侧则用R100MM铝合金外角连接；彩钢板的三维连接处使用三维接点过度，而彩钢板与墙角地面则用铝合金槽连接。吊顶材料亦为彩钢板。微生物检测室地面为环氧树脂材料，具有无缝隙、耐腐蚀、平整、容易清洗的特征。地面地脚线用阴角铝材装饰，美观且严密性好。空调、通风和净化为满足BLS-2实验室温湿度要求，宜配备机械空调通风系统，有特殊要求的可增设设计要求，如增设净化要求并按净化要求进行送回（排）风系统设计等。这方面，应重点处理好以下几个问题：1、可以采用带循环风的空调系统。如果涉及化学溶媒，感染性材料和动物实验，则应采用全排风系统。2、实验室内各种设备的位置应有利于气流由“清洁”空间向“污染”空间流动，最大限度减少室内回流与漏流（生物安全柜一般应置于室内气流最下游，即最远离送风口处）。*生物安全柜的排风不能代替室内排风。洁净室原理新风新风机送风机洁净室（++）更2（+）更1走廊送风回风+高效过滤器一级过滤器二级过滤器+排风机1、洁净度：无要求2、最小换气次数：可开窗通风3、与室外方向相邻相通房间的压差：无要求4、温度℃：18~275、相对湿度％：30~706、噪声dB(A)：≤607、最低照度lx：300*上诉指标是建立BLS-2实验室的最低要求，建设者可根据实际需要适当提高相应指标，如洁净度、压差等。BSL-2实验室对环境的要求洁净实验室技术参数1、新风量：要满足洁净室最小新风量、满足洁净室正压要求的最小新风量、满足每个人所需最小新风量之和。保证供给洁净室内每人每小时的新鲜空气量不小于40m3。2、压差：洁净区与非洁净区之间的压差，应不小于5Pa，洁净区与室外的压差，应不小10Pa。洁净实验室技术参数3、配电：有自备电源或不间断电源供电，持续保证洁净实验室正常供电。4、空气净化级别表等级静态空气洁净度浮游菌落菌量自净换气数级别≥0.5μm的微粒数/m3（菌落数/m3）(菌落数/φ0.05μ,30min)Ⅰ100≤3500≤5≤1Ⅱ1000≤35000≤75≤2Ⅲ10000≤350000≤150≤321-26排水含菌污水应经高温高压消毒或化学消毒后排放至市政污水排放公用系统。电气设置1、应设专用配电箱。2、电源宜设置漏电检测报警装置。3、应有可靠的接电系统，其接地电阻不宜大于1Ω。4、实验室入口应有实验室工作状态的文字式灯光讯号显示。5、应设紧急发光疏散指示标志。消防建筑物耐火等级不低于二级。排水、电气和消防特殊要求及安全设备1、在生物安全实验室的入口，应明确标示出操作所接触的病原体的名称、危害等级、预防措施负责人姓名、紧急联络方式等，同时应标示出国际通用生物危险符号，生物危险符号的颜色应为黑色，背景色为黄色。2、实验室门口带锁并可自动关闭，并应有可视窗。3、送、排风管道应隐蔽安装，管道咬口缝均应用胶密封，并应有安全的现场更换条件。4、实验室应有防止节肢动物和啮齿动物进入的措施。实验室安全设施设备实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生实验室安全设施设备实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室安全设施设备实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯实验室安全设施设备实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验室安全设施设备实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗实验室安全设施设备应在操作病原微生物样本的实验间内配备生物安全柜定义【隔离】:生物安全柜防止操作过程中含有危害性或未知生物气溶胶散逸的空气净化安全装置。生物安全柜是最