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第2单元蛋白质（一）名词解释1．兼性离子（zwitterion）；2.等电点（isoelectricpoint,pI）；3.构象(conformation）；4.别构效应(allostericeffect）；5.超二级结构(super-secondarystructure）；6.结构域（structuraldomain,domain）；7.蛋白质的三级结构（tertiarystractureofprotein）；8.Edman降解法（Edmandegradation）；9.蛋白质的变性作用(denaturationofprotein)；10.Bohr效应（Bohreffect）；11.多克隆抗体（polyclonalantibody）和单克隆抗体（monochonalantibody）；12.分子伴侣（molecularchaperone）；13.盐溶与盐析(saltinginandsaltingout）。（二）填充题1.氨基酸在等电点时，主要以__________离子形式存在，在pH＞pI的溶液中，大部分以________离子形式存在，在pH＜pI的溶液中，大部分以________离子形式存在。2.组氨酸的pK1(α-COOH)值是1.82，pK2(咪唑基)值是6.00，pK3(α-NH3+)值是9.17，它的等电点是__________。3.Asp的pK1=2.09，pK2=3.86，pK3=9，82，其pI等于________。4.在近紫外区能吸收紫外光的氨基酸有________、________和_________。其中_______的摩尔吸光系数最大。5.蛋白质分子中氮的平均含量为_______，故样品中的蛋白质含量常以所测氮量乘以_______即是。6.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱(NaOH)来滴定_________上放出的__________。7.除半胱氨酸和胱氨酸外，含硫的氨基酸还有_________，除苏氨酸和酪氨酸外，含羟基的氨基酸还有__________，在蛋白质中常见的20种氨基酸中，__________是一种亚氨基酸，___________不含不对称碳原子。8.蛋白质的氨基酸残基是由_________键连接成链状结构的，其氨基酸残基的______称蛋白质的一级结构。9.β-折叠片结构的维持主要依靠两条肽键之间的肽键形成________来维持。10.在螺旋中C=O和N—H之间形成的氢键与_______基本平行，每圈螺旋包含_____个氨基酸残基，高度为_______，每个氨基酸残基使螺旋轴上升______，并沿轴旋转______度。11.蛋白质颗粒在电场中移动的速率主要取决于_______的大小和_______量的多少。12.用凝胶过滤法分离蛋白质，相对分子质量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较_______，因此最先流出凝胶柱的蛋白质，其相对分子质量最_______。13.血红蛋白的辅基是________，当其中的1个亚基与氧结合后，其余亚基与氧的亲合力______，这种现象称________，当CO2或H+浓度增高时，血红蛋白与氧的亲合力_______，这种现象称_________。14蛋白质变性时空间结构________，而一级结构_________，变性后，蛋白质的溶解度一般会_________，生物学功能________。15.稳定蛋白质胶体溶液的因素是________和________。16.凝集素是一类能与_________相互作用的蛋白质。17.免疫球蛋白G（IgG）含有________条重链，_______条轻链，通过________键联接成Y形结构，每一分子含有_______个抗原结合部位。18.球状蛋白质形成空间结构时，肽链的熵_________，而环境中水的熵_________。19.一般说来，球状蛋白质在其分子内部含有________性氨基酸残基，而在分子外表面含________性氨基酸残基。20.胰蛋白酶专一性地切断________和________的羧基端肽键。（三）选择题（在备选答案中选出1个或多个正确答案）1.下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？A.色氨酸的吲哚环B.酪氨酸的酚环C.苯丙氨酸的苯环D.半胱氨酸的硫原子E.肽键2.关于氨基酸的叙述哪一项是错误的？A.酪氨酸和丝氨酸含羟基B.酪氨酸和苯丙氨酸含苯环C.亮氨酸和缬氨酸是支链氨基酸D.赖氨酸和精氨酸是碱性氨基酸E.谷氨酸和天冬氨酸含两个氨基3.在pH7时，其R基带有电荷的氨基酸是A.缬氨酸B.甘氨酸C.半胱氨酸D.酪氨酸E.赖氨酸4.每个蛋白质分子必定具有的结构是什么A.α-螺旋B.β-折叠C.三级结构D.四级结构5.下列哪一种氨基酸侧链基团的pKa值最接近于生理pH值？A.半胱氨酸B.谷氨酸C.谷氨酰胺D.组氨酸E.赖氨酸6.Arg的pK1ˊ=2.17，pK2ˊ=9.04，pK3ˊ=12.48其pIˊ等于A.5.613B.7.332C.7.903D.10.767.关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键，下列哪些叙述是正确的A.具有部分双键的性质B.比通常的C-N单键短C.通常有一个反式构型D.能自由旋转8.典型的螺旋是A.2.610B.310C.3.613D.4.015E.4.4169.维持蛋白质分子中的α螺旋主要靠A.盐键B.范德华键C.共价键D.氢键10.维系蛋白质三级结构稳定的最重要的键或作用力是A盐键B二硫键C氢键D疏水作用力E范德华力11.血红蛋白质的氧合曲线是A.双曲线B.抛物线C.S形曲线D.直线E.钟罩形12.维持蛋白质二级结构的主要化学键是A.肽键B.二硫键C.氢键D.疏水键13.存在于蛋白质分子中的下列作用力，哪项不是次级键A.氢键B.肽键C.盐键D.疏水键E.二硫键14.关于蛋白质三级结构的描述错误的是A.有三级结构的蛋白质均有酶活性B.球蛋白均有三级结构C.三级结构的稳定性由多种次级键维系D.亲水基团多分布在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列15.某蛋白质的等电点为7.5，在pH6.0的条件下进行电泳，它的泳动方向是A.在原点不动B.向正极移动C.向负极移动D.无法预测.16.用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时，下列哪项是正确的A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来B.分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来C.不带电荷的蛋白质最先洗脱来来D.带电荷的蛋白质最先洗脱来来E.没有被吸附的蛋白质最先洗脱下来17.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是A.Val（pI为5.96）B.Lys（pI为9.74）C.Asp（pI为2.77）D.Arg（pI为10.76）18.为获得不变性的蛋白质，常用的方法有A.用三氯醋酸沉淀B.用苦味酸沉淀C.用重金属盐沉淀D.低温盐析E.常温醇沉淀19.用6mol/LHCl水解某种蛋白质时能检出的氨基酸种类是A.20种B.19种C.18种D.17种或更少20.SDS凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质A.pI的差异B.分子大小的差异C.分子极性的差异D.溶解度的差异E.以上说法都不对21.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于A.O2分压降低B.CO2分压降低C.CO2分压增高D.N2分压增高E.pH值降低22.如果要测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中你认为最合适使用哪一个A.茚三酮B.CNBrC.胰蛋白酶D.苯异硫氰酸酯23.下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的？A.四个血红素基各自独立地与氧结合，彼此之间并无联系B.以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图，曲线呈S形C.氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳弱D.氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化24.关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的？A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂B.是由于非共价键破裂引起的C.用透析法除去尿素有时可以使变性蛋白质复性D.变性的蛋白质一定会沉淀25.一个生物样品的含氮量为5%，它的蛋白质含量为A.12.50%B.16.00%C.38.00%D.31.25%（四）判断题1.氨基酸为氨基取代的羧酸，可直接用酸碱滴定法进行定量测定。2.当溶液的pH等于某一可解离基团的pKa时，该基团一半被解离。3.在pH很高或很低的溶液中，氨基酸主要以非离子化形式出现。4.肽链的主链有1/3化学键不能旋转。5.溴化氰可以断裂甲硫氨酸的氨基参与形成的肽链。6.体内合成肽链的方向是从N端向C端，而在体外用固相化学合成法合成多肽时，通常是从C端向N端合成。7.核磁共振研究蛋白质三维结构的主要优势是可以研究溶液中的蛋白质三维结构，并能提供有关的动态信息。8.在水溶液中，蛋白质折叠形成疏水核心，会使水的熵增加。9.原子之间的距离越小，范德华引力越强。10.在α-螺旋中，每3.6个氨基酸绕一圈，并形成1个氢键。11.胶原蛋白的原胶原分子是3股右手螺旋扭曲成的左手螺旋。12.球蛋白的三维折叠多采取亲水侧基在外，疏水侧基藏于分子内部的结构模式。13.胎儿血红蛋白与2，3-二磷酸甘油（2,3—DPG）的结合力较弱。14.血红蛋白与氧的结合能力随pH降低而增高。15.由于一级结构可以决定空间结构，基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构象。16.测定别构酶的相对分子质量可以用SDS-PAGE。17.当溶液的pH小于某蛋白质的pI时，该蛋白质在电场中向阳极移动。18.用凝胶过滤分离蛋白质，小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢，可用增加NaCI浓度或降低pH的方法将其从层析柱洗脱出来。20.糖蛋白的N-糖肽键是指与天冬酰胺的γ-酰胺N原子与寡糖链形成糖苷链。23.糖蛋白的O-糖肽键是指氨基酸残基的羧基O原子与寡糖链形成的糖苷键。（五）分析和计算题1.判断氨基酸所带的净电荷，用pI-pH比pH-pI更好，为什么？2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点。3.在下面指出的pH条件下，下列蛋白质在电场中向哪个方向移动？A表示向阳极，B表示向阴极，C表示不移动。人血清蛋白：pH5.5，pH3.5；血红蛋白：pH7.07，pH9.0；胸腺组蛋白：pH5.0，pH8.0，pH11.5；已知：人血清蛋白的pI=4.64血红蛋白的pI=7.07胸腺组蛋白的pI=10.8。4.简述蛋白质溶液的稳定因素，和实验室沉淀蛋白质的常用方法。5.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。6.在体外，用下列方法处理，对血红蛋白与氧的亲和力有何影响？（1）pH值从7.0增加到7.4；(2)CO2分压从1000Pa增加到4000Pa；(3)O2分压从6000Pa下降到2000Pa；(4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从8×10-4mol/L下降到2×10-4ol/L；（5）α2β2解聚成单个亚基。7.胎儿血红蛋白（HbF）在相当于成年人血红蛋白（HbA）链143残基位置含有Ser，而成年人链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向亚基之间的中央空隙。（1）为什么2，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脱氧HbA的结合比同脱氧HbF更牢固？（2）HbF对2，3-BPG低亲和力如何影响到HbF对氧的亲和力？这种差别对于氧从母体血液向胎儿血液的运输有何意义。8.试述蛋白质二级结构的三种基本类型。9.蛋白质变性后，其性质有哪些变化？10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。（1）在低pH值时沉淀。（2）当离子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。（3）在一定的离子强度下，达到等电点pH值时，表现出最小的溶解度。（4）加热时沉淀。（5）加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数，导致溶解度的减小。（6）如果加入一种非极性强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。11.凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%（按质量