猪伪狂犬病净化技术的研究

猪伪狂犬病净化技术的研究张锦余1汤海林1孙杰龙1徐治政2[1湖南省益阳市农业科学研究所，湖南，益阳4130462亚卫新技术（广州）有限公司广州市邮编510650]摘要：在某600头母猪的伪狂犬病阳性猪场，应用猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗对全场所有猪只严格按免疫程序进行强化免疫，然后对本场种猪群猪伪狂犬病开展流行病学调查，当抽样检测gE抗体，阳性率低于5%时，对全群种猪进行检测并淘汰gE阳性猪只，对免疫后的后备母猪进行逐头检测，gE阴性猪只并入生产群。通过反复的检测、淘汰，三年后，该场猪伪狂犬病野毒阳性率由2008年的11.7%下降为0，达到净化标准。关键词：猪伪狂犬病；净化技术伪狂犬病是当前我国猪场最常见的传染病之一，由伪狂犬病毒(PRV)感染引起的疾病给养猪业造成严重的经济损失。伪狂犬病感染后引起种猪的繁殖障碍，新生仔猪神经症状以及高死亡率，生长育肥猪感染伪狂犬病后，主要表现为呼吸系统症状，尤其是与常见病原如蓝耳病病毒、圆环病毒2型以及肺炎支原体等混合感染，产生呼吸系统疾病综合征(PRDC)，严重影响猪群的生产性能，显著降低猪场利润。由于猪群的无序流动以及疫苗质量参差不齐等方面的原因，当前我国伪狂犬病野毒感染场的比例和猪群的伪狂犬病野毒感染率都比较高。在欧美等西方国家，通过使用基因缺失疫苗和相应的鉴别诊断方法，已很好的控制或净化了该病。目前已经净化伪狂犬病的国家有美国、英国、法国、丹麦、芬兰、瑞典、挪威、澳大利亚、新西兰等。我国也有集约化猪场成功净化伪狂犬病的案例。基因缺失疫苗注射给动物后，不会产生针对缺失基因编码蛋白(gE)的抗体，如果通过血清学的方法检测到这些缺失蛋白的抗体，则表明动物感染了PRV野毒，通过缺失疫苗与配套的诊断试剂盒，很容易区分免疫动物和感染动物，从而为伪狂犬病的净化提供了强有力的工具。从2008年开始，我们参照国外应用基因缺失苗净化猪伪狂犬病的成功经验，在一个猪伪狂犬病阳性猪场，应用某进口伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗及其配套技术，实施了猪伪狂犬病净化计划，经过近三年的工作，已取得成功，现将我们的工作汇报如下：作者简介：张锦余（1965-），男，大学本科研高级兽医师。主要从事动物饲养管理与疾病诊疗一、材料和方法1、疫苗免疫采用国外某品牌猪伪狂犬病gE缺失疫苗进行免疫。2、IDEXX公司生产的猪伪狂犬病gE抗体试剂盒。3、gE-ELISA操作方法猪伪狂犬病病毒gB抗体（PRV-gB)检测结果判定：Ｓ/Ｎ值小于或等于0.60为阳性；Ｓ/Ｎ大于0.70为阴性；其他的为可疑；猪伪狂犬病病毒gE抗体（PRV-gE)检测结果判定：Ｓ/Ｎ值小于或等于0.60为阳性；Ｓ/Ｎ大于0.70为阴性；其他的为可疑。4、伪狂犬病阳性种猪场：生产母猪600头。在实施净化计划前，这个场按常规免疫方法免疫，但生产水平未完全正常。5、伪狂犬病净化措施：A、开始净化前，猪场根据猪群种类按5%-8%比例随机采血，用IDEXX公司生产的PRV-gEELISA试剂盒检测，确定其感染情况（见表一）。调查结果与国内其它猪场统计结果阳性率11.7%[1]相近。表一、2008年各类猪群PR野毒感染状况统计表经产母猪后备母猪种公猪哺乳仔猪保育猪生长猪合计抽样数481220125130220543阳性数7121383364阳性率14.6%8.3%1010.4%6.15%15%11.78%B、免疫程序：用某进口gE基因缺失弱毒苗对种群猪完成基础免疫（两次接种，间隔4周）后，以后每隔4个月接种一次，而对后代仔猪在，0~2日龄滴鼻、7周和14周龄分别接种一次。每次接种均为1头份。C、猪群的管理按生产流程，以周为生产单位，实行全进全出单向流动。D、定期灭鼠，严格进出人员和车辆的消毒。E、对新引进种猪，用伪狂犬gE基因缺失弱毒苗免疫后，隔离饲养30天，经检测PRV-gE抗体阴性后并入生产群。F、在实施上述措施8个月后，对种猪群检测PRV-gE抗体，对PRV-gE抗体阳性猪强制淘汰，并对淘汰猪进行无害化处理。以后每4个月检测1次。G、在连续3次检测不出PRV-gE抗体阳性种猪后，随机抽检5%的3月龄仔猪，检测PRV-gE抗体，并对阳性仔猪进行淘汰或隔离饲养。如果种猪PRV-gE抗体阳性率大于1%则重新进行检测全群种猪，并剔除全部阳性猪只，并按上述方法重新进行。H、PRV的净化后，为了防止外源性的感染需要长期坚持定期的监测。监测包括两个方面，首先是外引种猪和本场后备猪要随时监测，保证PRV野毒阴性才能进入种猪群，第二是应用(gB-ELISA)抗体检测法对免疫抗体进行监测，随时监测疫苗的免疫应答反应，确保猪群有足够免疫力[2]。二、结果1、在实施免疫计划后8个月，在开始淘汰措施前，PRV-gE抗体阳性率降为4.2%。说明仅靠免疫接种的方法，虽然能降低猪场中伪狂犬病野毒阳性率，但不能把伪狂犬病从猪场中清除出去。（见表二）表二、未实施淘汰措施前PRV-gE抗体的阳性率经产母猪后备母猪种公猪哺乳仔猪保育猪生长猪合计抽样数501520110150260605阳性数311641328阳性率6%6.7%55.5%2.7%5%4.6%2、在连续3年实施PRV-gE抗体阳性种猪淘汰后，对全群猪按8%比率抽检，结果PRV-gE抗体为阴性，说明对阳性猪实施强制淘汰后，结合猪群管理的全进全出、单向流动和严格的消毒，灭鼠工作，达到了净化的目的（见表三）。表三、实施淘汰措施后PRV-gE抗体结果（2010年）经产母猪后备母猪种公猪哺乳仔猪保育猪生长猪合计抽样数621420115152228543阳性数0000000阳性率0%0%00%0%0%0%3、在实行伪狂犬病强制化净化取得成功后，各项生产指标得到了较大改善：窝产活仔数由10.16提高到10.45，繁殖障碍比例由15.6%下降到12.6%，产房、保育舍、育肥舍成活率分别由91.5%、90.1%、97.6%上升到93.4%、94.8%、98.5%（见表四）。四、实施伪狂犬病净化措施前生产情况统计表三、小结和讨论1、控制或净化猪伪狂犬病关键在于预防或减少猪伪狂犬病野毒的潜伏感染，但是单纯的疫苗接种并不能预防或减少猪伪狂犬病野毒的潜伏感染，因此伪狂犬病的净化包括监测-免疫-淘汰-再监测的过程。2、在实施伪狂犬病净化计划时，除了应用基因缺失苗外，猪群生产管理中的全进全出单向流动和严格的消毒隔离、灭鼠工作是两个必不可少的环节，通过这两个环节可有效地阻止病原在不同生产阶段的猪群间传播，结合淘汰阳性猪的措施，才能达到净化的目的。3、我们仅在单一的猪场中获得了净化成功，但因为周围其它猪场仍为阳性场，对于已经清除伪狂犬野毒的猪场，仍然需要持续加强免疫，并进行定期的监测，确保不受外源性感染，并保证猪群的持续免疫力。参考文献[1]周绪斌雷健良周克钢等.2008年中国11省市规模化猪场伪狂犬病野毒血清流行病学系统监测与分析《养猪》，2009，4[2]李宗华吴斌罗勇等.《规模化猪场种猪群猪瘟和猪伪狂犬病净化技术研究总结报告》《中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)》2010时间生产指标2008年2009年2010年窝产活仔(头)10.1610.3010.45繁殖障碍比例(%)15.613.412.6产房成活(%)91.59293.4保育舍成活(%)90.192.594.8育肥舍成活(%)97.697.898.5