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《高级生物化学》课程考试试卷1四川农业大学硕士研究生课程考试试题课程名称：高级生物化学(总分100)适用专业年级：2006级各专业主考教师：杨婉身陈惠考试时间：2007.1.4考生姓名：专业学号考生注意：第一、二题答案填写在答题卡内，其余答案写在答题纸上一、单选题（,每题分，共20分，在答题卡上将选择的答案用铅笔涂黑）1．下列各三肽混合物，用阳离子交换树脂，pH梯度洗脱，哪一个最先被洗下来？A．Met-Asp-Gln；B．Glu-Asp-Val；C．Glu-Val-Asp；D．Met-Glu-Asp2．有一个环肽的组成是Ala，Asp，Gly，Leu2，Val，Met，下列方法中你首先选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？A．胰蛋白酶水解B．羧肽酶水解C．溴化氰裂解D．氨肽酶水解3．下面关于生物大分子沉降系数的叙述哪一个是错误的?A．其大小与分子量有关B．其大小与分子形状有关C．与其光吸收值的大小有关D．与其扩散系数有关４．下列关于cAMP的论述哪一个是错误的?A．是由腺苷酸环化酶催化ATP产生的B．是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的C．可被磷酸二酯酶水解为5'-AMPD．是细胞第二信息物质5．下列关于某一酶的几个同工酶的叙述哪一项是正确的？A．由不同的多聚复合体组成B．对同一底物具有不同的专一性C．对同一底物具有相同的Km值D．电泳迁移率往往相同6．SDS-PAGE把混合的蛋白质分开，是根据各种蛋白质的什么性质？A．蛋白质分子带电性的不同B．分子大小不同C．分子极性的不同D．溶解度的不同7．下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂：A．有机磷化合物B．有机汞化合物《高级生物化学》课程考试试卷2C．氰化物D．磺胺类药物8．当要把Cys、Ser、Gly和His四种氨基酸吸附于阳离子交换树脂柱上时，应调到什么pH值？A．pH4.0B．pH6.0C．pH8.0D．pH10.09．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A．凯氏定氮法B．双缩脲反应C．紫外吸收法D．茚三酮法10．镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。β-链变异是由下列哪种突变造成的：A．交换B．插入C．缺失D．点突变11．预测下面哪一种基因组在紫外线照射下最容易发生突变A．双链DNA病毒B．单链DNA病毒C．线粒体基因组D．细胞核基因组12．酶的活性中心多为一凹穴，其作用是为酶促反应营造一个疏水环境，这种结构特征是蛋白质分子在哪个结构层次上形成的？A．二级结构B．三级结构C．结构域D．超二级结构13．在酶催化机理中，侧链基团既是一个很强的亲核基团，又是一个很有效的广义酸碱基团的氨基酸是A．AspB．HisC．GluD．Lys14．DNA分子中拓扑连环数（L）、螺旋总数（T）、超螺旋数（W）三个参数之间的关系为A．L=T+WB．L=T-WC．T=L+WD．W=T+L15．线粒体蛋白的跨膜运送是一种A．类似细胞膜的吞噬作用B．蛋白质解折叠后的传送C．膜内外同类蛋白质交换传送D．通过对各个蛋白质专一的载体传送《高级生物化学》课程考试试卷316．下面关于多聚酶链式反应（PCR）的叙述哪一个是不正确的？A．是Mullis在1984年发明的一种体外扩增DNA的技术B．根据DNA复制的基本原则，反应体系中需要加入RNA聚合酶以合成引物C．在PCR反应体系中，需要特定引物、四种脱氧核苷酸三磷酸、镁离子等D．需要模板DNA，即待测的DNA片段17．别构酶与不同浓度底物发生作用常呈S型曲线，这说明A．别构酶结合一个底物后，与下一个底物的结合能力增强B．别构酶催化几个独立反应并最后得到终产物C．与单条链的酶相比，别构酶催化反应的速度较慢D．产物的量在不断增加18．下列关于酶的磷酸化叙述错误的是A．磷酸化和去磷酸化都是酶促反应B．磷酸化或去磷酸化可伴有亚基的聚合和解聚C．磷酸化只能使酶变为有活性形式D．磷酸化反应消耗ATP19．下列关于凝胶层析的叙述哪一项是正确的？A．在凝胶层析中分子量小的分子最先流出B．凝胶层析可用于蛋白质分子量的测定C．凝胶层析主要基于蛋白质带电荷多少而达到分离的目的D．凝胶层析不能用于分子量的测定20．下列关于变构酶的叙述哪一项是错误的？A．含有多个亚基B．在变构酶激活的情况下，v-S曲线为S形C．变构酶的活性中心与调节中心往往位于同一亚基上D．调节物可以是底物或其它代谢物二、是非题（每题分，共20分，在答题卡上将选择的答案用铅笔涂黑）1．Ｚ型DNA与Ｂ型DNA可以互相转化。2．蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。《高级生物化学》课程考试试卷43．因为丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸都是蛋白质磷酸化的位点，因此所有蛋白质激酶均能使蛋白质中这三种氨基酸残基磷酸化。4．蛋白质亚基与结构域是同义词。5．两个核酸样品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，那么A的纯度大于B的纯度。6．由1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂，那么酶的比活较原来提高了100倍。7．限制性内切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。8．在完整的红细胞悬浮液中，即使加ATP、Na+和K+，也测不出Na+，K+-ATP酶活力。9．呼吸作用和光合作用均能导致线粒体或叶绿体基质值pH升高。10．朊病毒是一类高度保守的糖蛋白和核酸的复合物。11．反竞争性抑制剂存在时Vm减少，Km增大。12．能改变DNA分子的拓扑连环数的酶叫做DNA拓扑异构酶。13．与本质为蛋白质的酶不同的是，ribozyme的活性不需要有特定的三维结构。14．IP3引起胞内Ca2+的动员是其传递信号的方式。15．DNA局部构象常是DNA—结合蛋白之间结合的标志。16．酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。17．蛋白质可逆磷酸化在介导信号物质生理效应中起到中心枢纽的作用。18．生物膜中胆固醇的作用是降低膜的流动性。19．产生限制性内切酶的细菌通过甲基化来保护自身的DNA不被降解。20．密码子不重叠，但基因有可能重叠。三、名词解释（任选作6题，多选不计分，5×6=30）1．noncodingRNA2．核糖体循环3．信号肽假说4．mulecularchaperone5．酶联免疫分析6．蛋白质组学7．亲和标记法8．Kcat型抑制剂亲和标记法：根据酶与底物特异结合的性质，设计或合成一种含有反应基团的底物类似物作为活性部位基团的标记试剂。这种试剂象底物一样进入活性部位，接近结合位点，《高级生物化学》课程考试试卷5并以其活泼的化学基团与活性部位的某一基团共价结合，而指示出酶活性部位的特征。四、问答题（任选作三题，多选不计分，10×3=30）1．阐述生物信息学的介入对核酸、蛋白质结构与功能研究的影响。2．何谓guanylatebindingprotein?请写出其亚基组成、主要类型及各类型主要功能，并用箭头图示guanylatebindingprotein偶联的受体信号传递途径。3．阐述DNA指纹法(fingerprintting)为什么可用于不同个体基因组的比较？4．一种分子量为150,000d的酶，其活性部位含有一个半胱氨酸残基。已知使5ml含有1.2mg/ml的酶溶液完全失活需要3.0*10-2mg的碘乙酰胺（ICH2CONH2，分子量185d）.问该酶是由几个亚基组成的？5．从一种植物中叶中得到了粗酶提取液，每mL含蛋白质32mg。在提取条件下，10uL提取液的催化反应速度为0.14μmol/min，取50ml提取液用硫酸胺盐析分离。将饱和度0.3-0.6的沉淀物溶于10mL水中，此溶液的蛋白浓度为50mg/mL，从中取出10uL，测定其反应速度为0.65umol/min。计算：1）提取过程中酶的回收百分率；2）酶的提纯倍数。（10分）6．有一个七肽，经分析它的氨基酸组成是：Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr,Ser。此肽未经胰凝乳蛋白酶处理时，与FDNP反应不产生DNP-氨基酸。经胰凝乳蛋白酶处理后，此肽断裂成两个肽段，其氨基酸组成分别为Ala，Tyr，Ser和Gly，Phe，Lys，Arg。这两个肽段分别与FDNP反应，可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽与胰蛋白酶反应，同样能生成两个肽段，它们的氨基酸组成分别是Arg,Gly和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。试问此七肽的一级结构是怎样的？给出分析过程。，并阐述理由。非编码RNA非编码RNA，指的是不被翻译成蛋白质的RNA，如tRNA,rRNA等，这些RNA不被翻译成蛋白质，但是参与蛋白质翻译过程。此外还有snRNA,snoRNA等参与RNA剪接和RNA修饰，miRNA也是非编码RNA，是小的RNA分子与转录基因互补，介导基因沉默。gRNA又称引导RNA，真核生物中参与RNA编辑的具有与mRNA互补序列的RNA；eRNA，从内元（introns）或非编码DNA转录的RNA分子，精细调控基因的转录和翻译效率；信号识别颗粒RNA，细胞质中与含信号肽mRNA识别，决定分泌的RNA功能分子；pRNA，噬菌体RNA，fi29噬菌体中用6个同样的小RNA分子利用ATP参与DNA的包装；《高级生物化学》课程考试试卷6tmRNA，具有tRNA样和mRNA样复合的RNA，广泛存在细菌中，识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问题的核糖体的崩解；最后就是mRNA中的非翻译区，含有核糖体识别元件如5'-UTR,3'-UTR等。内元（introns）也可看作非编码RNA核糖体循环ribosomalcycleribosome-pol-ysomecycle指在细胞内构成核糖体的大小两种亚单位（沉淀系数为50S或60S的大亚单位和30S或40S的小亚单位）与蛋白活体合成开始会合（70S或80S粒子形成），合成后又分离的这一反复循环而言（参见核糖体）。核糖体在不合成蛋白时，分离成亚单位，这是由于多肽链起始因子之一与小亚单位结合，而抑制了与大亚单位的结合。这种状态的小亚单位，如果与其它起始因子、起始tRNA、mRNA结合，则形成多肽链起始复合体。随着与大亚单位结合，在多肽链延长因子存在下进行多肽链延长反应。多数的核糖体在一分子mRNA顺次移动（参见多核糖体）。当终止信号出现时，由于多肽链终止因子的作用，多肽链合成终止，核糖体从mRNA脱离，重新分离成大小二个亚单位。这些反应都要利用鸟苷三磷酸（GTP）水解所产生的能量。（参见蛋白质活体合成、多肽链起始因子。）高级生物化学客观题答题纸一、选择题(1×20=20)1ABCD2ABCD3ABCD4ABCD5ABCD6ABCD7ABCD8ABCD9ABCD10ABCD11ABCD12ABCD13ABCD14ABCD15ABCD16ABCD17ABCD18ABCD《高级生物化学》课程考试试卷719ABCD20ABCD一、是非题(1×20=20)1是非2是非3是非4是非5是非6是非7是非8是非9是非10是非11是非12是非13是非14是非15是非16是非17是非18是非19是非20是非2．何谓guanylatebindingprotein?请写出其亚基组成、主要类型及各类型主要功能，并用箭头图示guanylatebindingprotein偶联的受体信号传递途径。G蛋白:一般是指一类与膜受体偶联的异三聚体结合蛋白，其具有和GTP结合并催化GTP水解成GDP的能力，由α、β、γ三个亚基组成，可充当细胞膜上受体和靶酶之间的信号传递体。Gs：能活化腺苷酸环化酶(ACase)Gi、Go、Gt系列：Gi：抑制ACase、电位门控通道和磷脂酰肌醇专一的PLCGo：抑制神经元Ca2+通道Gt：活化cGMP专一的PDEGQ系列：活化磷脂酰肌醇专一的PLCG12系列：可能和Na+/K+交换系统早基因转录有关5．从一种植物中叶中得到了粗酶提取液，每mL含蛋白质32mg。在提取条件下，10uL提取液的催化反应速度为0.14μmol/min，取50ml提取液用硫酸胺盐析分离。将饱和度0.3-0.6的沉淀物溶于10mL水中，此溶液的蛋白浓度为50mg/mL，从中《高