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福建省近五年高考真题训练之（三）----选修三2009福建32.（10分）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶，对进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的。w.w.w.k.s.5.u.c.o.m2010福建32．〔生物一现代生物科技专题」（10分）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO)，其简要生产流程如右图请回答：(1）图中①所指的是________技术。(2）图中②所指的物质是__________，③所指的物质是_____________。(3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换__________________。(4）检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_______细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。2011年福建32.[生物----现代生物科技专题]必答题（10分）一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如右图。请回答：（1）过程①是指在体外进行的处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程②称为。（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③进行PCR扩增。然后用Ⅱ对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。据此判断，Ⅱ是一种酶。（3）不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④，据此判断胎儿为（正常/患者/携带者）。32.2012高考福建卷[生物-现代生物科技专题]必答题（10分）肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。请回答：（1）进行过程①时，需用______酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为______。（2）进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。（3）研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可以从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。【答案】（1）限制性核酸内切（或限制）启动子（2）胰蛋白（3）RNARAS蛋白2013年福建33．(10分)克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞淍亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答：(1)图中重组细胞的细胞核来自____细胞，早期胚胎移入受体子宫继续发育，经桑椹胚、囊胚和____胚最终发育为克隆猪。(2)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数，从而反映出Bcl-2基因的转录水平。①图中X表示____过程。②从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成____用于PCR扩增，PCR过程第一轮循环的模板是____。2014福建33、Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。（2）步骤②中，重组胚胎培养到期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有酶的酶切位点。（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。Ks5u解析：（1）动物细胞核移植时，应用显微镜操作去除卵母细胞的细胞核。（2）内细胞团位于囊胚内。Ks5u（3）引物是以目的基因的一段已知核苷酸序列合成的，Rag2基因为目的基因；同一种限制酶切割形成的黏性末端才能直接相连接。（4）从“用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验”可知，应提取治疗后小鼠骨髓细胞的Rag2蛋白进行抗原－抗体检测。答案：（1）细胞核（2）囊胚（3）核苷酸序列HindⅢ和PstⅠ（4）蛋白质Ks5u