离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响

离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响[摘要]目的学习灌流蟾蜍离体心脏方法，观察高钾、高钙、低钙、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的的影响。方法制备蟾蜍离体心脏标本,分别灌流CaCl2、KCl、肾上腺素+普奈洛尔及乙酰胆碱,用张力换能器与PCLab生物信号采集处理系统描记心搏曲线并记录心搏变化。结果将插管内的任氏液全部更换为无钙任氏液后，心脏的舒张期张力无明显改变，收缩期张力减小，心率增加；滴加30g/LCaCl2溶液1～2滴后，收缩期、舒张期张力增加，心率显著减小（p0.05）；在任氏液中滴加10g/LKCl溶液1～2滴后，心脏的收缩期张力显著减小（p0.05），舒张期张力增加，心率非常显著减小（p0.01）；在任氏液中滴加0.1g/L肾上腺素溶液1～2滴后，心脏的收缩期张力增加，舒张期张力、心率基本不变；在任氏液中滴加0.1g/L肾上腺素溶液1～2滴后，心脏的舒张期张力基本不变，收缩期张力显著增加，心率轻度增加；待心搏曲线稳定后，向灌流液中加10g/L普奈洛尔溶液1～2滴，可见心脏的舒张期张力基本不变，收缩期张力略有减小，心率基本不变。待心搏曲线稳定后，再向灌流液中加0.1g/L肾上腺素溶液1～2滴，心搏曲线无明显变化；在任氏液中加10-2g/L乙酰胆碱溶液1～2滴后，心脏的舒张期张力增加，收缩期张力显著减小（p0.05），心率则有非常显著减小（p0.01）。结论心肌细胞外高Ca2+时心肌收缩性增强；高钾使心肌收缩性减弱；肾上腺素使心输出量增加,心肌收缩性增强，而普奈洛尔可不可逆转性的抑制肾上腺素的作用；乙酰胆碱可使心肌收缩性降低。[关键字]蟾蜍离体心脏灌流肾上腺素乙酰胆碱[Abstract]Objectivestudyfillsflowsthetoadtothebodyheartmethod,observesK,factorandsoonCa,lowcalcium,adrenalin,acetylcholintothecardiacactivityinfluence.Methodspreparationtoadleavesthebodyheartspecimen,FillsseparatelyflowsCaCl2,KCl,theadrenalin+propranololandtheacetylcholin,WrestlesthecurveandtherecordheartwiththetensitytransducerandthePCLabbiologysignalgatheringprocessingsystemdescriptionheartwrestlesthechange.Resultsitwillinsertatubenomatterwhatthefluidreplacescompletelyafterdoesnothavethecalciumnomatterwhatthefluid,theheartdiastoletimetensitydoesnothavetheobviouschange,thecontractiontimetensityreduces,heartrateincrease;Addsbydrops30g/AfterLtheCaCl2solution1~2drops,thecontractiontime,thediastoletimetensityincreases,theheartrateremarkablyreduces(p0.05);Innomatterwhatthefluidaddsbydrops10g/AfterLtheKClsolution1~2drops,theheartcontractiontimetensityremarkablyreduces(p0.05),thediastoletimetensityincreases,theheartrateextremelyremarkablyreduces(p0.01);Innomatterwhatthefluidaddsbydrops0.1g/AftertheLadrenalinsolution1~2drops,theheartcontractiontimetensityincreases,thediastoletimetensity,theheartratebasicareinvariable;Innomatterwhatthefluidaddsbydrops0.1g/AftertheLadrenalinsolution1~2drops,theheartdiastoletimetensitybasicisinvariable,contractiontimetensityremarkableincrease,heartratemildincrease;Afterwaitsthehearttowrestlethecurvetobestable,tofillsflowsinthefluidtoadd10g/Lpropranololsolution1~2drops,obviouslyheartdiastoletimetensitybasicinvariable,thecontractiontimetensityhasslightlyreduces,theheartratebasicisinvariable.Afterwaitsthehearttowrestlethecurvetobestable,againtofillsflowsinthefluidtoadd0.1g/TheLadrenalinsolution1~2drops,theheartwrestlesthecurvenottohavetheobviouschange;Innomatterwhatthefluidadds10-2g/AftertheLacetylcholinsolution1~2drops,theheartdiastoletimetensityincreases,thecontractiontimetensityremarkablyreduces(p0.05),theheartratethenhasextremelyremarkablyreduces(p0.01).ConclusioncardicmuscleextracellularhighCa2+cardicmusclecontractionenhancement;GaoJiashithecardicmusclecontractionweakens;Theadrenalincausesthecardiacoutputincrease,Cardicmusclecontractionenhancement,butthepropranololreversiblethetransferringsuppressionadrenalinthefunction;Theacetylcholinmaycausethecardicmusclecontractiontoreduce.1.材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物：蟾蜍1.1.2实验仪器：微机生物信号采集处理系统，张力换能器1.1.3实验药品：任氏液，30g/LCaCl2溶液，10g/LKCl溶液，0.1g/L肾上腺素溶液，10-2g/L乙酰胆碱溶液，10g/L普萘洛尔溶液1.2仪器连接和参数设置1.2.1RM6240系统选择“蛙心灌流”项目，进入实验信号记录状态。（参数由实验室设定）1.2.2PcLab系统选择“蛙心收缩”项目，进入实验信号记录状态。（参数由实验室设定）1.3离体蛙心制备1.3.1暴露蛙心破坏蟾蜍脑和脊髓后，剪开胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主动脉。靠头端结扎左主动脉，在主动脉干下方穿线系一松结备用。1.3.2蛙心插管用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，将盛有少许任氏液的蛙心插管由此插入动脉圆锥，在心室收缩期时将插管插入心室，吸去插管内血液，更换新鲜任氏液，用线固定。1.3.3蛙心离体剪断主动脉左、右分支，抬高心脏，自静脉窦以下结扎其余血管，分离周围组织。1.3.4将蛙心插管固定在铁支架上，用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，调节张力至1g。2.观察项目2.1正常的蛙搏曲线稳定5min后，记录正常蛙搏曲线，记录心搏频率、心室收缩和舒张程度。2.2低钙任氏液灌流将插管内的任氏液换为低钙任氏液，观察心搏变化，记录心搏频率、心室收缩和舒张程度，换正常任氏液冲洗至心搏曲线恢复正常。2.3高钙任氏液灌流稳定3min后，滴加30g/LCaCl2溶液2滴，观察心搏变化。心搏曲线明显变化时，用正常任氏液反复冲洗至心搏曲线恢复正常。2.4高钾任氏液灌流稳定3min后，在任氏液中加10g/LKCl溶液2滴，观察心搏变化。心搏曲线明显变化时，用正常任氏液反复冲洗至心搏曲线恢复正常。2.5肾上腺素作用稳定3min后，在任氏液中加0.1g/L肾上腺素溶液2滴，观察心搏变化。心搏曲线明显变化时，用正常任氏液反复冲洗至心搏曲线恢复正常。2.6普萘洛尔加肾上腺素作用稳定3min后，在任氏液中加10g/L普萘洛尔溶液1滴，约1min后再加入0.1g/L肾上腺素溶液2滴，观察心搏变化。心搏曲线明显变化时，用正常任氏液反复冲洗至心搏曲线恢复正常。2.7乙酰胆碱作用稳定3min后，在任氏液中加10-2g/L乙酰胆碱溶液2滴，观察心搏变化。心搏曲线明显变化时，用正常任氏液反复冲洗至心搏曲线恢复正常。3.结果3.1在各种药物作用下蟾蜍离体心脏的原始心搏曲线，见图1。3.2低钙溶液处理前舒张末期张力为0.75±0.53（g），处理后为0.97±0.32；处理前发展张力为3.62±0.96（g），处理后为2.02±1.56（g）较处理前显著减小；处理前的心率为48±7(bpm)，与处理后的50±9(bpm)无显著性差异。见表1。表1：低钙溶液处理分组舒张末期张力(g)发展张力(g)心率(bpm）加药前加药后加药前加药后加药前加药后第一组0.460.843.110.964648第二组0.850.871.961.774442第三组0.871.394.692.314851第四组0.911.34.050.616166第五组0.90.864.121.695052第六组0.530.533.782.024141x±s0.75±0.530.97±0.323.62±0.962.02±1.56*48±750±9*P0.05，与加药前发展张力相比，有显著性差异。3.33%CaCl2处理前舒张末期张力为0.72±0.20（g），处理后为3.26±1.70（g）较处理前显著增大；处理前发展张力为3.29±0.74（g），处理后为4.86±2.75（g）；处理前心率为49±6(bpm)，处理后为35±20(bpm)。见表2。表2：3%CaCl2处理分组舒张末期张力(g)发展张力(g)心率(次/分）加药前加药后加药前加药后加药前加药后第1组0.483.282.524.754334第2组0.842.062.393.654345第3组0.942.753.868.765343第4组0.651.383.690.495560第5组0.96.274.26.27530第6组0.523.823.075.224527x±s0.72±0.203.26±1.70*3.29±0.744.86±2.7549±635±20*P0.05，与加药前舒张末期张力相比，有显著性差异。3.41%KCl处理前舒张末期张力为0.50±0.18（g），显著小于处理后的0.75±0.29（g）；处理前发展张力为3.00±0.88（g），高度显著大于处理后的1.13±0.35（g）；处理前的心率为45±5(bpm)，与处理后的46±8(bpm)无显著性差异。见表3。表3：1%KCl处理分组舒张末期张力(g)发展张力(g)心率(bpm）加药前加药后加药前加药后加药前加药后第一组0.270.432.080.523943第二组0.