离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响厉旭云浙江大学医学院实验目的(Objectives):1.学习Straub法灌流蟾蜍离体心脏的方法。2.掌握K+、Ca2+离子浓度变化以及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对蟾蜍离体心脏的影响。1.材料与方法(materialsandmethods):1.1实验动物蟾蜍1.2药品与试剂任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、0.1%阿托品、3%心得安。任氏液:用于维持离体蛙心长时间搏动的生理盐溶液,由氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、磷酸二氢钠和蒸馏水配置而成,其电解质、晶体渗透压、PH值与蛙的组织液相近。用于蛙类离体组织、器官的营养和湿润。1.3仪器和装置1.3.1器材张力换能器RM6240C微机生物信号处理系统1.3仪器和装置1.3.1仪器连接1.4离体蟾蜍心脏标本制备1)蟾蜍毁脑毁脊髓2)仰卧位固定蟾蜍四肢3)打开蟾蜍胸腔,暴露心脏。4)插管:在主动脉根部剪一斜口,将插管插入动脉圆锥,在心室收缩时将插管插入心室,结扎固定。1.4离体蟾蜍心脏标本制备蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋。因此,只要将离体失去神经支配的蛙心保持在适宜的环境中,在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。蛙心脏没有营养性血管,斯氏蛙心灌流法,插管直接插入心室,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透获得的。2.观察项目2.1观察正常蛙心搏动曲线,记录心率、心室收缩的幅度2.2更换任氏液为0.65%NaCl溶液,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.3滴加2%CaCl2溶液1~2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.4滴加1%KCl溶液1~2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.5滴加1:10000肾上腺素溶液1~2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.6滴加心得安溶液1~2滴,观察心跳变化。滴加1:10000肾上腺素溶液1~2滴记录心率和收缩幅度。冲洗。2.7滴加1:10000乙酰胆碱溶液1~2滴,记录心率和收缩幅度,冲洗。2.8滴加阿托品溶液1~2滴,观察心跳变化。滴加1:10000乙酰胆碱溶液1~2滴,记录心率和收缩幅度。冲洗。2.观察项目数据测量:舒张期张力、收缩期张力、心率收缩期张力舒张期张力3.结果(Result):3.1正常离体蛙心的舒张期张力为1.1g、收缩期张力为2.5g,心率为34bpm。3.2用0.65%NaCl溶液后灌流,蛙心舒张期张力为1.1g,收缩期张力为1.5g,心率为35bpm.3.2滴加2%CaCl2溶液1~2滴前蛙心蛙舒张期张力为1.1g,心收缩期张力为2.5g,心率为34bpm,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为3.5g,心率为0bpm。3.3滴加1%KCl溶液1~2滴前心静止张力为1.1g,心发展张力为1.5g,心率为34bpm,滴加后蛙心舒张期张力和收缩期张力均为1.0g,心率为0bpm。3.4……表1离子与药物对蟾蜍离体心脏活动的影响实验项目舒张期张力(g)收缩期张力(g)心率(bpm)处理前处理后处理前处理后处理前处理后0.65%NaCl2%CaCl21%KCl肾上腺素心得安+肾上腺素乙酰胆碱阿托品+乙酰胆碱