第11章++生物碱类药物的分析

第十一章生物碱类药物的分析第一节概述一、生物碱（Alkaloids）生物碱是生物体内含氮有机化合物的总称典型药物的结构小檗碱OH-+NOOCH3OCH3OpKb=2.5麻黄碱CCCH3OHNHCH3HHpKb=4.42阿托品NCH3OCOCHCH2OHpKb=4.35奎宁NCHCH2HNCH3OCOHHpKb2=9.7pKb1=5.07士的宁NONOpKb2=11.7pKb1=6.0NCH3OCH3OCH2OCH3OCH3罂粟碱pKb=7.87咖啡因NNNNCH3CH3CH3OOpKb=14.15吗啡OHOOHHNCH3pKa=9.85pKb=6.13NNNNCH3CH3OO茶碱H二、生物碱类药物的通性1.碱性季铵碱＞脂肪胺、脂环胺＞芳胺、N—芳杂环＞酰胺小檗碱＞麻黄碱、阿托品＞罂粟碱＞咖啡因吗啡具酸碱两性2.溶解性游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂3.旋光性一般多为左旋体有效。第二节鉴别试验一、特征鉴别反应1、双缩脲反应侧链具有氨基醇结构水层兰色醚层紫红色乙醚紫堇色OH-CuSO4+盐酸麻黄碱盐酸伪麻黄碱2、Vitali反应托烷生物碱硫酸阿托品+发烟HNO3·黄色醇制KOH深紫色氢溴酸山莨菪碱3、绿奎宁反应硫酸奎宁、硫酸奎尼丁紫堇色盐酸吗啡+甲醛硫酸4、Marquis反应吗啡生物碱棕绿色兰色紫色盐酸吗啡+钼硫酸5、Frohde反应吗啡生物碱6、官能团反应吲哚生物碱1）利血平+新制香草醛→玫瑰红色红色绿色二甲氨基苯甲醛对利血平冰醋酸冰醋酸、硫酸2）7、紫脲酸胺反应黄嘌啉类生物碱KClO3+HCl紫色消失KOH氨气蒸干紫色+咖啡因茶碱8、还原反应吗啡与磷酸可待因的区分反应普鲁士兰Fe3+K2[Fe(CN)6]吗啡+K3[Fe(CN)6]二、一般鉴别反应1、沉淀反应↓H+生物碱+生物碱沉淀试剂常用的生物碱沉淀试剂为：（1）重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞等；（2）大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。2、熔点测定3、显色反应常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸等原料药1原理水溶液中滴定突跃不明显，在非水介质中，碱性增强，使滴定顺利进行第三节含量测定一、非水溶液滴定法（非水碱量法）(1)溶剂--酸性溶剂：冰醋酸、冰醋酸+醋酐、醋酐有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类：8＜pKb＜10冰醋酸作溶剂10＜pKb＜12冰醋酸+醋酐pKb＞12醋酐(2)滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液或高氯酸的二氧六环溶液(3)指示终点的方法电位法：玻璃—甘汞电极系统指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等取本品约0.15g，精密称定，加醋酐—冰醋酸（5∶1）的混合液25ml，微热使溶解，放冷，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mo1/L）滴定，至溶液显黄色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于19.42mg的C8H10N4O2。如：咖啡因ChP(2000)二、提取中和法生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质中和法测定有机层（B）水层有机溶剂OH-sol过滤sol(BH+)稀酸或H2O游离生物碱或生物碱盐类1.碱化（氨水）2.有机溶剂提取3.中和法测定（1）直接滴定法--用于碱性较强的生物碱终点酸滴定液滴定）（中性乙醇）残渣（，蒸干）有机层（BsolBB（2）剩余滴定法用于碱性较弱的生物碱终点碱滴定液滴定）（定量过量的酸标准溶液）残渣（，蒸干）有机层（HBHsolBB（3）酸滴定液返提后剩余滴定法用于对热不稳定的生物碱终点碱滴定液滴定水层）水层（有机层（弃去）定量过量的酸滴定液）有机层（HBHB有机层（B）水层有机溶剂OH-sol过滤sol(BH+)稀酸或H2O游离生物碱或生物碱盐类BmmmmBmB1221)(）量（容器，干燥至恒重，称）残渣（）中器（置已知重量且恒重的容有机溶剂提取液三、提取重量法在适当的pH介质中有机相·(BH+In-)水相·(BH+In-)+HInH+In-+BH+BH+四、酸性染料萃取比色法制剂1.水相中与酸性染料溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝（BTB）等反应水相的最适pH值：如果水相pH值过小，酸性染料几乎仍以分子状态存在；如果水相pH值过大，则生物碱几乎全部以游离碱的形式存在。离子对BH+·In-被有机溶剂提取，使有机相呈色。剩余的酸性染料留于水相2.有机溶剂提取（CHCl3、CH2Cl2）3.比色法测定（1）定量分离出有机提取液，脱水后，测定A，求出有机碱含量（2）定量分离出有机提取液，脱水后，碱化，则水相呈色，测定水相中In-的吸收度，间接求出有机碱的含量BH+In-+OH-→B+H2O+In-（3）定量分离出有机提取液，脱水后，酸化，则水相呈色，测定水相中HIn的吸收度，间接求出有机碱的含量BH+In-+H+→BH++HIn如：硫酸阿托品注射液ChP（2000）对照法比色测定1、高效液相色谱法反相HPLC分析生物碱类和有机含氮药物五、色谱法图1反相HPLC法测定胃肠宁颗粒剂盐酸小檗碱的色谱图见:中药新药与临床药理,2005,16(5):361~363不论是游离碱还是其盐类，均是以游离碱出峰衍生物生物碱游离生物碱生物碱盐衍生化碱化、有机溶剂提取2、气相色谱法本章重点内容1如何鉴别生物碱？2生物碱类药物有哪些类别？3如何定量测定生物碱含量？97：83．咖啡因和茶碱的特征鉴别反应是A.双缩脲反应B.Vitali反应C.Marquis反应D.紫脲酸铵反应E.绿奎宁反应试题98：139．盐酸吗啡中应检查的特殊杂质为A.吗啡B.阿朴吗啡C.罂粟碱D.莨菪碱E.其它生物碱96：136．用非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，应使用的试剂是A.5％醋酸汞冰醋酸液B.盐酸C.冰醋酸D.二甲基甲酰胺E.高氯酸97：130．非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反应条件为A．冰醋酸一醋酐为溶剂B.高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定C．1mol的高氯酸与⅓mol的硫酸奎宁反应D.仅用电位法指示终点E．溴酚蓝为指示剂99：78.非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料的含量时，可以用高氯酸直接滴定冰醋酸介质中的供试品，1摩尔硫酸奎宁需要消耗高氯酸的摩尔数为A.1B.2C.3D.4E.599x：[116—120]滴定反应中A.被测物与HClO4的摩尔比为1∶1B.被测物与HClO4的摩尔比为1∶3C.两者均是D.两者均不是99x：116．硫酸奎宁片经氯仿提取后用HClO4滴定（D）99x：117．硫酸阿托品在冰醋酸中用HClO4滴定99x：118.硫酸奎宁原料药用HClO4滴定99x：119.磷酸可待因用HClO4滴定99x：120.硝酸士的宁用HClO4滴定（A）（B）（A）(A)96：129.生物碱类药物制剂的测定方法A.直接用有机溶剂提取后，用H2SO4标准液滴定B.碱化后用有机溶剂提取，再用NaOH水溶液滴定C.碱化后用有机溶剂提取，蒸去有机溶剂后用中性醇溶液，再用H2SO4标准液滴定D.碱化后用有机溶剂提取，蒸去有机溶剂，再加入定量的H2SO4，再用NaOH标准液回滴E.酸化后，用有机溶剂提取，采用适宜方法滴定96：77.酸件染料比色法中，水相的pH值过小，则A.能形成离子对B.有机溶剂提取能完全C.酸性染料以阴离子状态存在D.生物碱几乎全部以分子状态存在E.酸性染料以分子状态存在95：[111—115]可选择的药物：A.阿托品B.吗啡C.两者均可D.两者均不可95：111.具有酯结构95：112.为两性化合物95：113.显较强碱性95：114.用提取容量法测定95：115.用碱性染料比色法（A）（B）（A）（C）（D）例[1～5]A.双缩脲反应B.Marquis反应C.两者皆是D.两者皆不是1.盐酸麻黄碱2.某些生物碱类药物3.盐酸吗啡4.咖啡因5.硫酸奎尼丁（A）（C）（B）（D）（D）例6.生物碱类药物的一般鉴别试验包括A.熔点测定B.显色反应C.沉淀反应D.光谱法（紫外、红外）E.薄层色谱法例7.能够发生Vitali反应的药物是A.盐酸吗啡B.硫酸奎宁C.磷酸可待因D.盐酸麻黄碱E.硫酸阿托品例9.检查硫酸阿托品中莨菪碱时，应采用A.色谱法B.红外分光法C.旋光度法D.显色法E.直接检查法例8.用非水溶液滴定法测定二盐酸奎宁时，二盐酸奎宁和HClO4的摩尔比是A.1∶1B.1∶2C.1∶3D.1∶4E.1∶1.5例10.酸性染料比色法测定生物碱类药物，有机溶剂萃取测定的有色物是A.离子对和指示剂的混合物B.生物碱盐C.指示剂D.离子对E.游离生物碱