[随堂基础巩固]1.下列叙述正确的是()A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌解析:培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。培养基的种类根据划分依据的不同而不同,如根据化学成分可分为天然培养基和合成培养基。固体培养基是液体培养基添加凝固剂形成的,其他成分均相同。单个的微生物形体微小,肉眼无法看到,必须借助仪器才能看到,在固体培养基上用肉眼观察到的是一个菌落。答案:A2.下列操作错误的是()A.用酒精擦拭双手B.用氯气消毒水源C.实验室用紫外线进行消毒D.玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的解析:玻璃器皿、金属用具等耐高温、需要保持干燥的物品,应采用干热灭菌法进行灭菌,而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的。答案:D3.关于牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备,叙述错误的是()A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.等平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时,其操作顺序为计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板;由于牛肉膏比较黏稠,称量时可连同称量纸一同放入烧杯;待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板;平板冷凝后,应将平板倒过来放置,以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。答案:A4.有关稀释涂布平板法,叙述错误的是()A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析:稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。用不同稀释度的菌液接种,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,才能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可出现单个菌落。答案:D[课时跟踪训练](满分:50分时间:25分钟)一、选择题(每小题3分,共24分)1.下列关于平菇培养的操作程序,正确的是()A.配制牛肉膏蛋白胨培养基,接种,高压蒸汽灭菌,培养B.配制牛肉膏蛋白胨培养基,高压蒸汽灭菌,接种,培养C.配制棉子壳培养基,接种,高压蒸汽灭菌,培养D.配制棉子壳培养基,高压蒸汽灭菌,接种,培养解析:培养平菇常用的培养基有棉子壳、花生饼、玉米芯等,具体的操作程序是:配制培养基,高压蒸汽灭菌,接种,培养。答案:D2.某混合样品中微生物R含量极少,要得到大量的R,比较理想的方法是采用()A.天然培养基B.稀释涂布平板法C.利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D.用显微镜直接观察、寻找,再培养解析:在培养过程中可以通过选择该微生物能生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基,使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖。答案:C3.下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不.正确的是()A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一答案:B4.无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中错误的是()A.对培养操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B.对培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触解析:灭菌是采用强烈的理化因素对用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基进行处理,使物体内外一切微生物,包括芽孢和孢子都要被杀死;实验操作者的衣着和手以及操作空间只能进行消毒。答案:A5.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A.①②B.③④C.①③D.②④解析:平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故①正确;平板划线法采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故②错误;纯化时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故③正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故④错误。答案:C6.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是()A.对比观察培养基有没有被微生物利用B.对比分析培养基是否被杂菌污染C.没必要放入未接种的培养基D.为了下次接种时再使用解析:放入未接种的培养基,起到对照作用,可确定培养基是否被杂菌污染。答案:B7.为了保存菌种的纯净需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不.正确的是()A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C.临时保藏菌种容易被污染或发生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4℃保藏的方法解析:对于需要长期保存的菌种,可采用甘油管藏法,即在3mL甘油瓶中加入1mL的甘油后灭菌,将1mL的菌液转移到甘油瓶中,放在-20℃的冷冻箱中保存。答案:D8.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是()A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作要在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析:操作前要将接种环放在酒精灯的外焰灼烧进行灭菌;整个操作过程要在酒精灯旁进行;1、2、3、4、5这五个区域都可能有所需菌落;在每次划线前对接种环灼烧是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,划线结束后对接种环灭菌是为了杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。答案:D二、非选择题(共26分)9.(12分)下表是某微生物培养基成分,请据此回答:编号成分含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100mL(1)上表培养基可培养的微生物类型是________________________________________。(2)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养________________________________________________________________________。(3)表中营养成分共有________类。(4)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是________。(5)上表中各成分重量确定的原则是_______________________________________________________。(6)若上表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是________________________________________________________________________。解析:题表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类,缺乏碳源和特殊营养物质。对于特殊营养物质,有的微生物是不需要的,但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源,说明培养的微生物是从空气中获得碳源的,即可培养的微生物是自养微生物。该培养基中若加入(CH2O),培养基中就有了碳源,但除去成分②,却使培养基中没有了氮源,这时就只能用于培养固氮微生物了。对于菌种鉴定,用的是固体培养基,而表中没有凝固剂,需要加入常见的凝固剂——琼脂。答案:(1)自养微生物(2)固氮微生物(3)3(4)调整pH(5)依微生物的生长需要确定(6)琼脂(或凝固剂)10.(14分)(2010·重庆高考)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如图所示:①对配制的液体培养基等需采取________方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。②挑选可疑菌落制片后,用____________观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。③接种可疑菌后,35℃培养24h,液体培养基变浑浊,原因是________________。对照组试管中应加入________,与实验组同时培养6h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有____________________________________。解析:①培养基应用高压蒸汽方法进行灭菌。炭疽杆菌同化类型为异养型,应选有机碳作为其碳源。②微生物个体小,肉眼观察不到,必须借助显微镜才能观察到菌体特征。③在液体培养基中,细菌大量繁殖会导致培养液变浑浊;该实验中实验变量为是否加入噬菌体,所以对照组除不加噬菌体外,其他处理都应该和实验组保持一致(即应加入不含噬菌体的生理盐水)。噬菌体可破坏细菌细胞,从而使培养液变清。④在特异性免疫的感应阶段,吞噬细胞参与了对抗原的摄取、处理和呈递,效应B(浆)细胞是直接产生抗体的细胞。答案:(2)①高压蒸汽(98kPa蒸汽)有机碳②显微镜③细菌大量繁殖等量生理盐水低④吞噬细胞、效应B(浆)细胞