白千层精油质量控制标准起草实验研究工作实施方案

白千层精油质量控制标准起草实验研究工作实施方案摘要：白千层又叫玉树，原产澳大利亚的澳洲起源中心植物。别名：脱皮树、千层皮、玉树、白千层、玉蝴蝶，药材部位：为桃金娘科植物白干层的树皮。功能用于安神镇静。白千层提取物的研究发现，真正起主要作用的是白千层精油白千层精质油可以治疗感冒、咽炎、喉炎、支气管炎、气喘等呼吸道感染疾病，吸入蒸汽之后，可以避免引发头痛、喉咙痛、黏膜炎或鼻窦炎。白千层取物中分离出来了白千层精油，并对其进行含量测定，结果很好，对白千层提取物的生产控制有可靠依据。关键词：白千层提取物质量控制实验研究实施方案天然药物来自植物、动物、矿物和微生物。其中以植物来源为主，占了很大的比例。白千层又叫玉树桃金娘科药材部位：为桃金娘科植物白干层的树皮。适用于安神镇静，芳香解表，祛风止痛。用于感冒发热、风湿关节痛、神经痛、肠炎腹泻；外用治过敏性皮炎，湿疹。含有精油即挥发性芳香物质。主要成分为基本为单萜烯，醇类及倍半萜类化合物，主要成分为萜品-4-醇和1，8-桉叶油素。一、概述1.功能药效：①白千层性味：淡，平。安神镇静，治神经衰弱，失眠：白千层干皮二至三钱。水煎服。②白千层精油止痛剂、抗微生物药、抑神经痛剂、抗痉挛剂、防腐杀菌、化痰剂等2.性质：白千层精油：物理性质：性状：一种呈无色至淡黄色透明液体气味：带有胡椒辛辣味的樟脑香气，有些刺鼻。化学性质：化学成分：桉油醇、松油醇、松油萜和其他的醛类挥发性：快3.药用价值：止痛剂、抗微生物药、抑神经痛剂、抗痉挛剂、防腐杀菌、化痰剂等二、情况分析1.植物来源：白千层又叫玉树（Cajeput），原产澳大利亚的澳洲起源中心植物。别名：脱皮树、千层皮、玉树、白千层、玉蝴蝶。主要品种：互叶白千层，白千层树，五脉白千层属名：白千层属科名：桃金娘科Myrtaceae原形态：常绿乔木，高约20米。树皮灰白色，厚而疏松，可薄片状层层剥落。单叶互生，有时对生，狭椭圆形或披针形，长5～10厘米，宽1～1.5厘米，两端渐尖，全缘；有纵脉3～7条。穗状花序顶生，中轴具毛，于花后继续生长成一有叶的新枝；花密集，乳白色，无梗；萼管卵形，裂片5，圆形，外面被毛；花瓣5，阔卵圆形，先端圆，脱落；雄蕊多数，基部合生成5束与花瓣对生；雌蕊1，子房下位，顶端隆起，被毛，3室。蒴果顶部3裂，杯状或半球状，直径约3毫米，顶部截形，成熟时裂开成3果瓣。花期1～2月。生态实习：白千层为阴性树种，喜温暖潮湿环境，要求阳光充足，适应性强，能耐干旱高温及瘠瘦土壤，亦可耐轻霜及短期0℃左右低温。对土壤要求不严。华南有栽培，多作行道树以及防护林树种。生境分布：原产澳大利亚的澳洲起源中心植物，生于较干燥的砂地上，多为栽培。分布福建、台湾、广东、广西等地。药用部位：为桃金娘科植物白干层的树皮采集：全年可采，阴干。成分：树皮含木质素54.2%，另含树脂醇，称为白干层素。叶含挥发油1%-1.5%，主要成分为桉叶素（cineole)，占50%-65%，其次为松油醇（terpineol)，醛类等。2.相关成分：白千层的新鲜枝叶经水蒸汽蒸馏而得的无色至淡黄色轻油状液体俗称“茶树精油”茶树油的化学成分组成基本为单萜烯，醇类及倍半萜类化合物，占总油含量的99%以上，主要成分为萜品-4-醇和1，8-桉叶油素。其中有开发价值的主要有两类:一类以1，8-桉叶油素为主，其含量最高可达76.75%;另一类以萜品-4-醇为主，其含量可达41.51%以上。且白千层挥发性成分的油相部分经鉴定确认了27种成分,占油相部分总量的98.60%,主要成分为松油烯-4-醇(52.15%)、C-松油烯(19.60%)、A-松油烯(51.86%)、A-松油醇(31.93%)、对伞花烃(31.52%)、1,8-桉叶油素(21.67%);水溶性部分经鉴定确认了61种成分,占水溶性部分总量的79.15%,主要成分为松油烯-4-醇(27.42%)、A-松油醇(6.55%)、香芹酚(51.00%)、1,8-桉叶油素(4.10%)。3.产品形式和工艺情况：相关产品：白千层精油精油经过加工处理可用于多个行业，制成多种用途的产品。如：医药化工行业，能制成具有消炎杀菌、止痒防腐、促进伤口恢复、治疗妇科感染等作用的药物。食品行业，用于焙烤食品、软饮料、含乙醇饮料等。美容保健行业，精油、芳香油可做香水。日化行业，女性护理液、化妆品、牙膏等。宠物行业，女性护理液、化妆品、牙膏等。宠物行业，宠物卫生用品、宠物饲料添加剂。造纸行业，高端品牌的湿餐巾、娇妍女性卫生湿巾。保健行业，沐足粉。农药行业，农药。其他行业，空气清新剂、家庭清洁剂、杀菌剂、蚊香。提取工艺特性：包括：原料的准备，白千层精油的提取，白千层精油的分离三步。1、原料的准备（1）原料的采收：取白千层的枝叶要求树皮叶子完整，洁净。（2）保管与储藏：原则上原料采收后应立即蒸馏，防止霉变，如果不能及时加工，可储藏于干燥，阴凉，通风良好的仓库内，必要时可安装空调设备。（3）原料的粉碎：用滚压机压碎，木质部用机械切成薄片或小段或者粉碎成粗粉。2.白千层精油的提取一般采用水蒸气蒸馏法：将枝叶倒入容器中并加水，加热，蒸汽与油气经由顶端的出口进入冷凝器中凝结，因为精油相对密度比水轻，水面上的精油为首次萃取出来的最高品质的精油。3.白千层精油的分离由于用水蒸汽蒸馏法提取的精油是混合物想得到单一或者某几个成分需要进一步分离，一般还需要对原油进行脱色，脱植物蜡质，脱异味或者根据不同要求脱出不必要成分等处理。可采用以下方法分离：（1）分馏法：一般采用分馏柱进行常压或者减压蒸馏分馏，所得的每一分馏可能是混合物，不过含有的组分已较单纯。（2）化学分离法：根据各组成分含有的官能团或者结构的不同用化学方法逐一加以处理，达到分离目的（3）层析法：薄层层析法，柱层析法。4.质量标准及控制项目：三、质量标准的研究1.白千层精油的鉴定：由于白千层精油主要成分是松油醇4型1，8．桉叶油素目前，国际上主要应用互叶白干层精油中的松油醇4成分。DB44／T177—2003互叶白干层(Melaleucaalternefolia(MaidenetBetche)Cheel)精油，松油醇4型(茶树油)》的技术要求。①互叶白千层精油，松油醇4型(茶树油)技术指标②白千层精油的指纹图谱：采用气相色谱(Gc)法建立了互叶白干层挥发油指纹图谱。仪器与试药：无水硫酸钠、乙酸乙酯等试剂均为分析纯；水为蒸馏水。松油烯．4．醇对照。样品共16批色谱条件：日本岛津GC．14B气相色谱仪(氢焰离子化检测器，FID检测器)；BP一10毛细管色谱柱(30mx0．25mmx0．25pxn)；载气：高纯度氮气，柱前压：50kPa；分流比：1／30；进样口温度：250℃；检测器温度：250℃；进样量：1．OI．供试品溶液的制备：将互叶白干层的新鲜枝叶按《中华人民共和国药典》2010年版一部挥发油测定法测定，加无水硫酸钠脱水、过滤，即得。精密度试验：取同一茶树油样品，连续进样6次，记录各共有峰的保留时间和峰面积。结果显示，各共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD％均小于2％，符合指纹图谱技术要求。相似度评价：将对照谱圈和16批样鼎色谱目全谱导^“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)'’，软件即可计算出样品与对照谱圈的相似度数据(见表2)。参考国家药典委员会颁布的“中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行r的相似度划分界限，将相似度在0．90以上的药材，判定为合格药材，相似度低于0.90的药材，判定为伪劣药材。③其他主成分定性鉴别：运用气质联用分析,结合对照品的气相色谱图进行比对,鉴别出1,8O桉叶素型互叶白千层油的主要成分为AO蒎烯、BO蒎烯、月桂烯、AO松油烯、柠檬烯、1,8桉叶素、对伞花烃、CO松油烯、异松油烯、松油醇O4、AO松油醇,含量占总峰面积的95%以上,GC色谱图。薄层色谱鉴别结果显示,不同产地白千层油的色谱带相似,斑点位置基本相同,表明不同来源的白千层油的主要成分相同。经多次试验结果相同,薄层色谱的重现性好,可以作为白千层精油的定性鉴别方法。2.定量控制白千层精油一1,8一桉叶素含量的测定：原理：测量精油与邻一甲酚混合物结晶的温度此温度的高低,依赖于精油中1,8一按叶素含量的多少。试剂：邻一甲酚,经提纯,无水,熔点不低于30.5℃。1,8一按叶素,分析试剂规格按叶素纯度需要验证,例如:在20℃其功于光指数应于1.4550~1460。之间。1,8一按叶素—邻一甲酚复合物的制备：混合等分子量比(按154.24八08.13的比数)的按叶素(4.2)和邻一甲酚(4.1)。用馏程为40~60℃轻质石油醚(分析纯)提纯之。复合物的结晶点,应不低于55·2℃。操作程序初步测定。称取新制备的试样3克(精确至0.001克)于经小心干燥过的试管中,加入2.10克熔化的邻一甲酚。把该试管放入测定装置内,在搅拌器的搅拌下,使其冷却结晶。当结晶发生时,温度会略有上升,注意并记录其最高温度t。测定：用水浴使该混合物重新熔化,水浴温度应不超过t,的5℃。把试管插入侧定装置中,温度保持低于t:的5℃。用普通温度计来测量当结晶开始时,或当该混合物温度下降到比t:低3℃时,用搅拌器连继搅拌。要注意水银球必须始终完全浸没在试样中。用温度计的水银球摩擦试管壁以引发结晶。注意并记录混合物结晶时出现的最高温度t。重复测定：直到所测到的两个最高值t的误差不大于O·2℃。如果出现过度冷却现象,加入少量的1,8一按叶素—邻一甲酚复合物晶体用以引发结晶。如果t:低于27.4℃,须加入5.10克1,8一按叶素—邻一甲酚复合物后重新测定。1,8一按叶素的含量,相当于观察到的最高温度(tZ),见附表