流式细胞仪操作规程

Acquisition获取数据；1.打开获取模板（ACQ文件）；制作新模板：；?选择点图或直方图工具，在窗口拖出大小合适的方框；Acquisition获取；XParameter横轴参数：如FSC；YParameter纵轴参数：如SSC；Gate设门：如NoGate或G1=R1；?图形设置完毕，选择SAVEAS，保存为ACQ文；2.联机Acquire-ConnAcquisition获取数据1.打开获取模板（ACQ文件）制作新模板：?选择点图或直方图工具，在窗口拖出大小合适的方框，点击图形边缘?Windows-ShowInspector，Inspector窗口选择：Acquisition获取XParameter横轴参数：如FSCYParameter纵轴参数：如SSCGate设门：如NoGate或G1=R1?图形设置完毕，选择SAVEAS，保存为ACQ文件2.联机Acquire-Connecttocytometer，出现AcquisitionControl窗口3.打开获取条件窗口，调出实验获取条件（InstrumentSetting）?Cytometer-Detectors/Voltage，Threshold，Compensation?Cytometer-InstrumentSetting-Open打开实验获取条件-Set-Done实验获取条件的调整：AcquisitionControl-?Setup-上样-Acquire-进行实验获取条件的调整1)FSC、SSC电压。2)FSC阈值（Threshold）：减少碎片。3)设门：FSC/SSC点图设门（R1）；荧光（FL）点图（如FL1/FL2）或直方图（如FL1）取门G1=R1（点击图形边缘-Inspector-Gate：G1=R1）。4)阴性对照管，调整荧光电压（FL1、FL2、FL3、FL4Voltage），阴性群体在左下角，确定十字位置。5)多色实验的补偿管（单阳性），调整荧光间补偿（Compensation）?Cytometer-InstrumentSetting-Save保存实验获取条件（InstrSet）-Done；File--Save保存模板ACQ文件（新作模板）。4.数据获取前的设定?Acquire-Acquisition&Storage-设定获取细胞数（10000-All）-OK?Windows-Browser对话框选择：—Directory设定存储数据文件的文件夹；—File设定数据文件的名字：文件前缀（Prefix）-自定义；文件后缀（Surfix）-管号；—检测或设置panel，确定试验组合；?Acquire—Counter打开计数器。5.顺序上样，获取数据文件：AcquisitionControl-?Setup-上样-Acquire-仪器获取足够细胞后，自动保存数据文件（datafile）一、Analysis数据分析（新作模板ANA文件）1.做FSC/SSC点图，圈细胞R1?选择点图工具，在窗口拖出大小合适的方框，点击图形边缘?Windows-ShowInspector，Inspector窗口选择：Analysis分析SelectFile选择第一管数据文件XParameter横轴参数-FSCYParameter纵轴参数-SSC