比TCA沉淀蛋白更好的方法(MCH法)TCA沉淀法被许多人用做酵母表达上清中,但是本人通过实验发现TCA沉淀法可重复性不高,而且蛋白的沉淀效率低,操作复杂等,于是在此为做真核表达的朋友提供另一种蛋白沉淀的方法,效率很高。150ul上清沉淀的蛋白比1200ul上清用TCA沉淀的蛋白还多。具体操作如下:1体积的上清液加4倍体积的甲醇,再加1倍体积的氯仿,再加3倍体积的双蒸水,然后涡旋20s,或者剧烈上下摇动20s,然后四度放置30分钟。11000rpm、4℃、15min,去掉上层相和下层氯仿相,留中间的蛋白沉淀。然后瞬时离心,去除液体,加入1×蛋白buffer,煮10min。11000rpm、4℃、10min,取上清进行SDS-PAGE蛋白电泳即可。