氨苄西林钠检验SOP

GMP管理文件题目氨苄西林钠检验标准操作规程制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门颁发数量生效日期分发部门文件编码共4页第1页一、目的：建立氨苄西林钠检验的标准操作规程，保证正确操作。二、依据：《中国兽药典》二00五版一部。三、适用范围：适用于氨苄西林钠的检验。四、责任者：QC检验员五、正文：1．质量标准：（见氨苄西林钠质量标准）。2．试剂：2.012mol/L醋酸溶液2.02丙酮2.03醋酸氧铀锌试液2.0412%醋酸溶液2.050.2mol/L磷酸二氢钾溶液2.06乙腈2.07二氯甲烷2.08二氯甲烷的水溶液（2mg/ml）2.09无菌氯化钠3．仪器与用具3.01酸度计3.02自动水分测定仪3.03电子天平3.04高效液相色谱仪3.05气相色谱仪4．操作步骤：4.1性状本品为白色或类白色的粉末或结晶；无臭或微臭，味微苦；有引湿性。本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在乙醚中不溶。则判定该项合格。4.2鉴别：（1）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与对照品溶液的主峰保留时间一致。则判定该项合格。（2）取本品0.25g，加水5ml溶解，加2mol/L醋酸溶液0.5ml，摇匀后，于冰浴静置10分钟，用垂熔漏斗滤取析出物，用丙酮－水(9:1)混合溶液2～3ml洗涤，置60℃干燥30分钟，照红外分光光度法测定。本品的红外光吸收图谱应与氨苄西林三水物的对照图谱一致。（委托检验）（3）取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。应呈正反应，则判定该项合格。4.3检查4.3.1酸度取本品，加水制成每1ml中含0.1g的溶液，依法测定（详见pH值测定法标准操作规程），pH值应为8.0～10.0。则判定该项合格。4.3.2溶液的澄清度取本品5份，各0.6g，分别加水5ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（详见溶液澄清度检查法标准操作规程）比较，均不得更浓；如显色，与黄绿色5号标准比色液（详见溶液澄清度检查法标准操作规程）比较，均不得更深。则判定该项合格。4.3.3有关物质取本品约30mg，精密称定，加流动相A溶解并制成每1ml中约含3mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照氨苄西林项下的方法测定；另取本品约0.2g，加水1.0ml使溶解，于60℃水浴中加热1小时，量取0.5，置50ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，取20µl注入液相色谱仪，记录色谱图，氨苄西林主峰保留时间为8～10分钟，氨苄西林主峰保留时间约2.8倍处的较大杂质峰为氨苄西林二聚物峰。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，氨苄西林二聚物峰面积不得大于对照溶液主峰面积的4.5倍（4.5%），其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%)，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍（5.0%）。（供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计）。则判定该项合格。4.3.4二氯甲烷取本品约1.0g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液（二氯乙烷的水溶液2mg/ml）1ml，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取二氯甲烷1.0g，加水溶解并稀释至500ml，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，精密加入上述内标溶液1ml，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；照气相色谱法（详见气相色谱法标准操作规程），以聚乙二醇1000为固定相；涂布浓度为10%；柱温60℃；检测器为氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度为150℃；进样口温度为100℃；载气为氮气。精密量取供试品溶液与对照品溶液各2µl，分别题目氨苄西林钠检验标准操作规程共4页第2页注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，含二氯甲烷不得过0.2%。则判定该项合格。4.3.5水分取本品，照水分测定法（详见水分测定第一法标准操作规程）测定，含水分不得过2.0％。则判定该项合格。计算公式如下:水分%=(A－B)F/W×100%式中：W供试品的重量mg；A为供试品所消耗费休氏试液的容积ml；B为供试品所消耗费休氏试液的空白容积ml；F为每1ml费休氏液相当于水的重量mg。4.3.6热原取本品，加灭菌注射用水制成每1ml中含25mg的溶液，依法检查（详见热源检查法标准操作规程），剂量按家兔体重每1kg注射1ml，应符合规定。则判定该项合格。4.3.7取本品，用适宜溶剂溶解后，转移至不少于500ml的0.9％无菌氯化钠溶液中，用薄膜过滤法处理后，依法检查（详见无菌检查法标准操作规程），应符合规定。则判定该项合格。4.4含量测定4.4.1方法照高效液相色谱法（详见高效液相色谱法标准操作规程）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A〔12%醋酸溶液-0.2mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-水（0.5：50：50：900）〕-流动相B〔12%醋酸溶液-0.2mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-水（0.5：50：400：550）〕（85：15）为流动相；检测波长254nm。取氨苄西林对照品和头孢拉定对照品各适量，加流动相A溶解并制成每1ml中约含氨苄西林0.3mg和头孢拉定0.02mg的混合溶液，取20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。氨苄西林峰与头孢拉定峰的分离度应大于3.0。取本品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取氨苄西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中C16H19N3O4S的含量。4.4.2计算公式供试品含量（%）=A样×M对×对照品的含量×样品的稀释倍数×100%A对×M样×标示量×对照品的稀释倍数×（1-水分）题目氨苄西林钠检验标准操作规程共4页第3页相对偏差=％＋－100BABA4.4.3结果判定：按无水物计算，含氨苄西林（C16H19N3O4S）不得少于85.0％，相对偏差不超过2.0％，则判定该项合格。题目氨苄西林钠检验标准操作规程共4页第4页