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1二轮实验复习3-6页一、实验试剂1.用到酒精的实验（1）叶绿素的提取：无水酒精用于提取光合色素（2）物质鉴定实验：50%酒精用于洗去浮色（苏丹III和IV）（3）DNA粗提取：95%冷酒精用于析出DNA（4）观察有丝分裂：95%酒精与15%盐酸1:1混合（解离液）用于使组织细胞分散开（5）微生物培养、植物组培、动物细胞培养等中的无菌操作：75%酒精用于消毒（6）土壤中小动物类群丰富度的研究：70%酒精用于保存土壤中的小动物（7）萨克斯的叶片遮光实验：用95%酒精煮叶片达到脱色2.用到盐酸的实验（1）观察有丝分裂：95%酒精与15%盐酸1:1混合（解离液）用于使组织细胞分散开（2）观察细胞中DNA与RNA的分布：8%盐酸用于①增大细胞膜对甲基绿、吡罗红的通透性；②让DNA更好地与甲基绿结合（3）探究影响酶活性的调节：5%盐酸用于调节反应体系的pH（4）植物组织培养技术：盐酸用于调节培养基的pH（5）微生物的纯化与培养：盐酸用于调节培养基的pH（6）生物维持pH稳定的机制：0.1mol/L盐酸用于改变溶液体系的pH（7）促胰液素的发现：斯他林和贝利斯用盐酸刺激使小肠粘膜产生促胰液素3.用到NaOH的实验（1）探究影响酶活性的调节：5%的NaOH用于调节反应体系的pH（2）植物组织培养技术：NaOH用于调节培养基的pH（3）微生物的纯化与培养：NaOH用于调节培养基的pH（4）生物维持pH稳定的机制：0.1mol/L的NaOH用于改变溶液体系的pH（5）物质鉴定实验：0.1g/mL的NaOH用于配置斐林试剂和双缩脲试剂（6）探究酵母菌的呼吸方式：10%的NaOH用于吸收CO2（7）细胞大小与物质运输的关系：将含有酚酞的琼脂块浸入NaOH溶液中4.用到蒸馏水（清水）、无菌水的实验（1）使用高倍显微镜观察细胞：蒸馏水用于制作植物细胞的临时装片，也用于洗去某些多余的染液（2）制备细胞膜：蒸馏水用于涨破红细胞（3）DNA的粗提取：①蒸馏水用于涨破动物细胞以获取含DNA的混合溶液；②蒸馏水用于稀释2mol/L的NaCl溶液。（3）观察植物细胞质壁分离及复原：清水用于制作临时装片和使细胞发生质壁分离复原（4）微生物的纯化与培养：无菌水用于稀释菌液（5）蒸馏水、清水经常作为植物为材料的探究实验中的空白对照（6）观察细胞的有丝分裂、减数分裂：漂洗细胞，防止过度解离以及影响染色5.用到特定酶的实验（1）植物体细胞杂交：果胶酶和纤维素酶用于水解细胞壁（2）动物细胞培养技术：胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）用于分散动物细胞（3）基因工程：限制酶用于剪切DNA，DNA连接酶用于目的基因与载体的连接（4）PCR技术：耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）用于催化DNA的延伸2（5）比较过氧化氢的分解：肝脏研磨液中的过氧化氢酶用于催化过氧化氢的分解（6）探究影响酶活性的条件：淀粉酶、过氧化氢酶分别用于探究温度、pH对酶活性的影响（7）DNA的粗提取：嫩肉粉中的木瓜蛋白酶可以水解蛋白质（8）艾弗里的肺炎双球菌转化实验：DNA酶用于水解DNA，验证DNA是转化因子二、实验器材1.用到显微镜的实验（1）使用高倍显微镜观察细胞（2）物质鉴定实验：检测脂肪时用于观察细胞中被染色的脂肪粒（3）观察DNA与RNA在细胞中的分布（4）制备细胞膜：用于观察涨破前后的血红细胞（5）观察线粒体和叶绿体、观察细胞质环流（6）观察植物细胞质壁分离及复原（7）生物膜结构的探索：罗伯特森用电子显微镜观察细胞膜，光学显微镜观察人鼠融合细胞（8）观察细胞的有丝分裂、减数分裂（9）低温诱导植物染色体数目的变化（10）培养液中酵母菌种群数量的变化2．用离心机的实验（1）分离细胞器：差速离心用于分离不同重量的细胞器（2）制备细胞膜：将涨破的细胞膜离心至沉淀中（3）赫尔希、蔡斯的噬菌体侵染实验：将细菌离心至沉淀中，观察放射性的分布（4）探究DNA的复制方式：密度梯度离心用于观察子代DNA的重量差异（5）PCR技术：离心用于反应体系的混合（6）植物体细胞杂交、动物细胞融合：离心可以诱导原生质体或动物细胞融合三、实验材料1.对实验材料有特殊要求的实验（1）物质鉴定实验：实验材料本身无色或颜色浅（2）制备细胞膜：哺乳动物红细胞（3）DNA的粗提取：DNA含量较高且较易提取（不能是哺乳动物的血细胞）（4）观察细胞的有丝分裂、低温诱导染色体加倍：植物根尖分生区细胞（5）观察细胞的减数分裂：植物的花药、动物的雄性生殖器官（精巢或睾丸）（6）观察植物细胞质壁分离及复原：成熟的、液泡中有颜色的植物细胞（7）调查人群中的遗传病：调查发病率需要对人群进行随机抽样，调查遗传方式需要找患者家系（8）植物组织培养：分化程度低，全能性高的植物外植体（9）动物细胞培养：胚胎或幼龄动物的组织、器官（分裂能力强）2.需要保持实验材料活性的实验（活体实验）3.实验操作导致实验材料死亡的实验四、实验条件需要控制温度条件的实验（1）物质鉴定实验：鉴定还原糖和DNA需要水浴加热3（2）探究影响酶活性的条件：温度对酶活性的影响（水浴）（3）传统发酵技术：果酒要求18~25℃，果醋要求30~35℃，腐乳要求15~18℃，泡菜要求室温（4）探究环境对光合作用的影响：温度条件相同且适宜（5）低温诱导染色体加倍：4℃诱导36h（6）微生物的纯化与培养：高压蒸汽灭菌一般121℃维持15~30min，保存菌种一般在4℃以下，倒平板需要让固体培养基凝固（50℃以下），巴氏消毒法（60～82℃长时间）（7）PCR技术：90℃左右变性，55℃左右退火（复性），70℃左右延伸（8）动物细胞培养：培养细胞所对应的动物体体温，哺乳动物一般是36.5±0.5℃（9）植物组织培养：一般是18~22℃（10）萨克斯叶片遮光实验：在用95%酒精中煮浴叶片脱色五、实验操作需要进行筛选的实验（1）微生物的分离与纯化：筛选土壤中的尿素分解菌和纤维素分解菌（2）低温诱导染色体加倍：筛选染色体加倍的细胞（3）植物体细胞杂交和动物细胞融合：筛选融合的杂种细胞（4）单克隆抗体的制备：两次筛选①筛选出杂交瘤细胞②筛选出特定的（能产生单一抗体的单克隆的）杂交瘤细胞（5）基因工程技术：筛选出转化了表达载体的受体细胞，筛选出能产生目的蛋白质的转基因生物（6）单倍体育种：筛选出所需性状的纯合体六、实验方法1.利用同位素标记法的实验（1）探究分泌蛋白的合成与运输路径：用3H-亮氨酸标记氨基酸（2）探究光合作用的科学发现史：鲁宾和卡门用18O分别标记H2O和CO2，卡尔文用14C标记CO2（3）赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染实验：用32P标记DNA，用35S标记蛋白质（4）探究DNA的复制方式：用15N、14N分别培养大肠杆菌（无放射性）（5）核酸分子杂交技术：标记基因探针，检测目的基因是否导入受体细胞和目的基因是否转录（6）蛋白质分子杂交技术：标记抗体，检测目的基因是否导入表达，杂交瘤细胞的筛选、单抗诊盒和生物导弹2.利用分子杂交技术的实验七、实验思想用假说-演绎法思想进行的实验（1）孟德尔的豌豆杂交实验（2）摩尔根的果蝇杂交实验（3）DNA是遗传物质（艾弗里、赫尔希）（4）DNA的复制方式（5）遗传密码的破译（选学）（6）促胰液素的发现