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1检验标本采集手册一、病人准备1．病人状态一般需在安静状态下采集标本，因运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少；丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高30％～50％。2．饮食多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。(1)餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹达24h以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。(2)高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。(3)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。(4)高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(5)含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。(6)食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。2(7)饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8％，而不吸烟者含量在1％以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。3．药物药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。4．体位体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。5．时间病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关；胆固醇则在经前期最高，排卵时最低；纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入3睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本要素，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本的采集要点分述如下：(一)血液标本采血管分普通管、抗凝管和促凝管三类。常用抗凝剂有草酸钾、草酸钠、枸橼酸钠、EDTA-K2或EDTA-Na2、肝素、氟化物等。根据不同的检验项目，选用合适的抗凝剂十分重要。1．选择抗凝剂注意事项：(1)含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。(2)EDTA、氟化物、草酸盐等不能用于测定Ca2+的标本，因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。(3)草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本，因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用，如草酸盐可抑制AMY、ACP、LDH的活性，氟化物则有激活尿素酶、AMY的作用。(4)草酸钾：钙离子螯合剂，常用量为1～2mg/ml血液。草酸钾虽仍可应用，但使红细胞缩小，水分从红细胞渗入血浆，使血浆成分浓度相应偏低。(5)草酸钾氟化钠混合抗凝剂：专供葡萄糖测定用，氟化钠1g，草酸钾3g混合，混合剂4mg抗凝1ml血。4(6)肝素：是一种粘多糖体，可抑制凝血酶原转化为凝血酶，使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影响红细胞体积，可用于生化及血液学检验标本，但不可用于筛选DIC的3P和TT试验，因肝素与鱼精蛋白作用，发生沉淀，使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现产生干扰。(7)EDTA：与钙离子络合而抗凝，通常血液学常规检验应用其钾盐EDTA-K2或EDTA-K3。EDTA-Li2亦可作为抗凝剂，且可用于大多数生化检验。(8)使用抗凝剂要注意血与抗凝剂的比，如血沉取106mmol/L的枸橼酸钠0.4ml，抽1.6ml血；凝血机制取0.2ml，抽1.8ml血；血常规用EDTA抗凝管抽1.5ml血；血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。2．标本采集注意事项：(1)末梢采血时，务必清洁消毒，待干燥后穿刺，用1次性采血器。婴儿可取自脚后跟两侧处，一般不取手指，采血中不可用力挤压，以免组织液混入血液，使血液易于凝固和稀释，出现误差。(2)采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5％，胆固醇增加5％，铁增加6％，胆红素增加8％，乳酸则不能使用止血带。(3)血清标本应避免溶血，并及时分离血清，如需隔日检验，应封口后冰箱储存。(4)采血用针头过细会使血K+升高。(5)要特别注意采血不能在输液的同侧进行，更应杜绝在输液管内5采血，因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高，如输K+、Glu时，可使所测K+、Glu明显增高)，或使血液稀释结果偏低。(6)血气和pH值测定的血液以动脉血为原则，且不可漏气。细胞培养的样品要采用无菌技术，防止污染。(7)标本采集后，必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。尿液标本根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。(1)晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常规检验。(2)随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。(3)餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。(4)计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。(5)24h尿多用于化学组分的测定，亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。(6)尿液原则上以不用防腐剂为好，如需12h或24h尿，首选以冷藏为妥，根据不同的检验目的加用合适的防腐剂，例如加40％甲醛1滴于尿液30ml中，适用于细胞及管型等有形成分的检查；激素检验常以盐酸10ml作为24h尿的防腐剂或硼酸1g加于尿液100ml，麝6香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸杆菌浓集检查。(三)粪便标本采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度，且立即送检，立即检查，如检查蛲虫则不必送检粪样，而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表，一般以无滤漏容器留取5～10g即可。(四)脑脊液、浆膜腔液、关节液均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，及时送送检。(五)骨髓临床医师穿刺，抽吸量不得超过0.2ml，涂片送检。胃及十二指肠液一般均在门诊或病房采集后送检，收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(ABO)、最大胃酸分泌(MAO)等，十二指肠液分甲、乙、丙、丁管。甲管来自总胆管为橙黄色，乙管来自胆囊为黄绿色，丙管来自胆道为柠檬色，丁管来自十二指肠液为灰黄或淡黄色，细菌培养应从乙管取样接种培养基。(七)痰液标本采集晨间第一口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已用药，则应选血液药物浓度最低水平时采样。7(八)阴道分泌物由妇产科医师采样后即时送检，如不能及时送检，可在37℃加温数分钟后检查，否则影响滴虫动力，易于漏检。(九)精液和前列腺液采集精液应在禁欲3～5天后进行，且于排精后30min内保温送达检验科，容器以广口玻璃小好，不可贮存于避孕套或塑料瓶内，收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样，收到标本后亦应立即检查。(十)其他标本根据具体检验项目而定，临床医师在开申请单前，应同检验科相关部门联系并询问详细后，注明检查要求，再采样并及时送检。总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予以重视。三、标本保存和运送标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响，可能使检验结果受或大或小的误差，因此必须正确掌握标本保存和运送。(1)采样后须立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。(2)采样后0.5h内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。(3)采样后1～2h内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激8素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。(4)采样后2h以上才能送检者，则常对标本采取必要的保存手段。对血糖或乳酸可直接分离血清后冷冻保存，或用NaF作稳定剂2～8℃密封保存；K+必须分离血清后密封2～8℃存放；ACP须加稳定剂后分离血清冷冻保存；对其他一般项目，可加盖密封后直接2～8℃存放，但血沉和细胞学检查不能采用此方法。(5)标本保存1个月：一般对检测物分离后，-20℃存放。标本需长期保存(3个月以上者)：对检测物分离后(包括菌种)-70℃保存，还应避免反复冻融。