搜索
[目的与要求]1学习直接测定家兔动脉血压的急性实验的方法2观察神经,体液因素对心血管活动的影响[基本原理]在正常人体内,任何高等动物的动脉血压时相对稳定的.这种相对稳定是通过神经和体液调节来实现的,其中以静动脉窦-主动脉弓压力感受性反射最为重要.此反射即可使升高的血压下降,又可使降低血压升高,故有血压缓冲反射之称.家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察起作用本实验是应用液导系统直接测定动脉血压,即由动脉插管与压力传感器连通,其内充满抗凝液体,构成液导系统,将动脉插管插入动脉,动脉内的压力及其变化,可通过封闭的液导系统传导压力感受器,由计算机采集系统记录下来[动物与器材]家兔,手术台,常用手术器械,止血钳,眼科剪,支架,双凹管,气管插管,动脉插管,三道管,动脉夹,计算机采集系统,压力传感器,保护电极,照明灯,纱布,棉球,丝线,注射器(1ml,5ml,20ml),生理盐水,4%柠檬酸钠,20%-25%氨基甲酸已酯,肝素(200U/ml),肾上腺素(1:5000),已酰胆碱(1:10000)【方法与步骤】1、实验仪器的准备打开计算机采集系统，接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条，使显示器显示压力读数。2、连通液导系统并制压将压力传感器的下方支管，通过输液管连接三通管，再连接动脉插管。上侧管供制压时排除管内空气使用。先用装有20ml4%柠檬酸钠的注射器，通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注，使之充满液体（不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管）后，再用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然后继续向三通管内推注，直至充满压力传感器的上方支管，并用塞子塞住（注意：液导系统内不可有气泡）。继续向三通管内推注，同时观察显示器上压力变化。当加压到120mmHg时既可关闭三通管。观察压力是否变化，如果压力下降，则需要检查液导系统的漏液原因，并重新制压。调节血压显示器的灵敏度，使30~130mmHg的变化都能在显示器上明显的反映出来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。3、动物的准备（1）按照实验4-9方法，麻醉家兔并进行颈部手术，插入气管插管、分离主动脉神经。同时分离迷走神经并穿线备用。再将止血钳从颈总动脉下方穿过，轻轻张开止血钳，分离出2~3cm长的颈总动脉。分离出的颈总动脉外壁应该十分光洁，外面并无结缔组织及脂肪等物。在动脉上穿两条备用棉线，分别打上活结。将两线分别拉至分离出的动脉两端备用。同样方法分离另一侧血管与神经（一侧动脉用于插管侧压，另侧动脉实验用）。由于家兔的品种不同，个体之间也有差异，常发现3条神经的解剖位置有些变异。主动脉神经的最后确认，蓄意对血压的影响为准。（2）动脉插管首先用5ml注射器从耳缘静脉注入肝素（200U？kg体重）以防凝血。然后在一侧动脉行动脉插管术以记录血压。其方法如下：将动脉头端的备用线尽可能靠头端结扎（务必扎紧，以防渗血），然后在另一备用线的向心侧（尽可能近心端），用动脉夹夹闭。轻轻提起动脉头端的结扎线，用锐利的眼科剪在靠近扎线的稍后方，沿向心方向斜向剪开动脉上壁（注意：不可只剪开血管外膜，也切勿剪断整个动脉，剪口大小约为管径的一半）。一手持弯头眼科镊，将其一个弯头从剪口处插进动脉少许，轻轻挑起剪开的动脉上壁，另一手将准备好的动脉插管由开口处插入动脉管内。如果插入较浅，可用一手轻轻捏住进入插管的动脉管壁，另一手拿住动脉插管，顺势轻轻推进至6~8mm左右（如果手感滞涩，说明插管并未进入动脉，必须退出插管，重新剪口再插），用备用线将动脉连同进入的插管扎紧（插管不可因扎线松动而滑出，亦不可漏液），并将余线系在插管的固定侧支上，以免滑脱。注意：插管应与动脉血管的方向一致，以防插管尖端扎破动脉管壁。轻轻取下向心端动脉夹，可见动脉血与插管内液体混合。再取下通向压力传感器的止血钳，此时显示器上出现血压的波动曲线。4、实验观察（1）观察正常血压曲线调节扫描速度与增益，可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢，观察正常血压曲线。（2）轻轻提起对侧完好颈总动脉上的备用线，用动脉夹夹闭30s（于夹闭前记录动脉通畅时的血压曲线），观察并记录血压变化。出现变化后即取下动脉夹，记录血压的恢复过程。（3）记录对照血压曲线后，用手指按压颈动脉窦（下颌下方内侧），观察并记录血压变化。当血压明显下降时，则停止按压，待血压恢复（如果血压反而升高，说明按压的是血管，需重新寻找按压位置）。（4）刺激主动脉神经使刺激输出端连接保护电极，轻轻提起主动脉神经上的备用线，小心地将神经置于保护电极之上。记录对照血压曲线后，再用中等强度的连续电脉冲信号，通过保护电极，刺激神经10~20s。血压出现明显下降后即可停止刺激，并待血压恢复。如果血压并不下降，可调整刺激强度或刺激频率再行刺激。任何刺激都无效时，则表示此神经并非主动脉神经。需要重新辨认神经后再行实验。（5）分别刺激主动脉神经中枢端和外周端双结扎主动脉神经后（务必结扎），从两扎线结之间剪断神经。记录对照血压后，同法分别刺激神经的中枢端和外周端，观察并记录血压变化。（6）刺激迷走神经记录对照血压后，用同样的方法刺激迷走神经，观察血压下降曲线与（4）有何不同（如果血压下降很快、很低，应立即停止刺激）。（7）结扎并剪断迷走神经同时结扎双侧迷走神经后剪断，观察血压有何变化。（8）刺激迷走神经外周端分别刺激两侧迷走神经外周端，观察并记录血压变化有何不同。（9）肾上腺素对血压的影响记录对照血压曲线后，用1ml注射器，从耳缘静脉注入0.1~0.3ml肾上腺素溶液，观察并记录血压变化及恢复曲线。（10）乙酰胆碱对血压的影响同法注入0.1~0.2ml乙酰胆碱溶液，观察并记录注射前后血压变化。（11）失血对血压的影响从另一侧动脉插管后慢慢放血，观察放血量对血压的影响。5、整理实验结果，并将实验结果填入下表家兔血压实验记录表实验前血压对照实验时血压变化极值恢复稳定值夹闭另一侧颈总动脉按压颈动脉窦刺激主动脉神经刺激主动脉神经中枢端刺激主动脉神经外周端剪断双侧迷走神经刺激左侧迷走神经外周端刺激右侧迷走神经外周端注入肾上腺素溶液注入乙酰胆碱溶液失血1（ml）失血2（ml）失血3（ml）【思考题】1、讨论各项实验结果，说明血压正常及发生变化的机理。2、如何证明主动脉神经是传入神经？3、如何证明迷走神经外周端对心脏有调节作用？4、试分析主动脉神经放电与血压变化的关系。5、根据实验结果，说明神经、药物对心率与呼吸的影响。三、参数设置：（一）RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：4通道时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度500ms/div。连续单刺激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30Hz。（二）实验内容1.正常血压曲线。2.夹闭右侧颈总动脉。3.刺激减压神经：（1）刺激完整减压神经（2）刺激减压神经中枢端（3）刺激减压神经外周端。4.刺激迷走神经外周端。5.静脉注射NE0.5ml。（三）注意事项：1.分离减压神经注意：减压神经要从向心端开始往头端分离，避免损伤神经，分离时不使神经上带有结缔组织膜，分离后滴加生理盐水以防干燥，穿2根线备用。2.连接仪器：注意避免动脉插管滑出。3.夹闭颈总动脉时勿牵拉动脉（夹闭，血压增高；牵拉，血压下降）。4.刺激减压神经，如神经损伤，向头端移动（与减压神经放电移动方向相反）。5.刺激右侧迷走神经末梢端，血压.心率变化更为明显。三、实验报告要求：（10分）1.实验结果：各种影响因素引起动脉血压变化曲线图。（不要求观察定量变化）2.实验讨论：（各1分）1）夹闭颈总动脉，血压升高：夹闭颈总动脉→颈动脉窦血压下降→颈动脉窦压力感受器受到刺激减弱→窦神经传入冲动↗心迷走中枢（抑制）→迷走神经传出冲动减少→心跳加快.加强→心输出量增多↘↑↑减少→心交感中枢（兴奋）↘↗小静脉收缩→回心血量增多→血压升高交感神经传出冲动增多↘交感缩血管中枢（兴奋）↗↘小动脉收缩→外周阻力增大↗2）刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化3）刺激迷走神经末梢外周端，引起血压下降在实验中，多用刺激右迷走神经外周端，其中的副交感神经纤维兴奋，释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，产生负性变时，变力，变传导作用，出现心率减慢，心输出量下降，血压下降。4）静脉注射去甲肾上腺素后血压升高：[实验结果]各种影响因素引起动脉血压变化曲线图[结果分析]1.夹闭一侧颈总动脉15s后，观察到兔动脉血压升高的现象：这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢，是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端，颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后，远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降，传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱，心交感和心缩血管紧张加强，作用于心脏，使心率加快，心输出量增加，血管收缩，血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。若血压下降过大，交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统，是静脉收缩，促进血液回心，使每博输出量增加。2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化。3.刺激迷走神经后观察到，刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应，而刺激迷走中枢端则没有减压反应，只是稍有轻微抬升变化：迷走神经中含从延髓下行的传出纤维，通向心脏。节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维，能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。从而使心输出量变小，平均动脉压降低。此外，还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行，化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以，刺激迷走中枢不能引起减压反应，却可以使血压轻微抬高。此外，若切断两侧迷走神经，迷走紧张消失，迷走吸气兴奋反射通路也断了，动物的吸气变深，周期变长，二级曲线周期性变得不明显。4.加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后，观察到平均动脉压抬高。这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的α和β2甲肾上腺素能受体结合，使血管收缩，管径变小，外周阻力增加，从而使平均动脉压升高。此外，去甲肾上腺素还可以使心率增加，心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后，观察到一级曲线周期变慢，平均动脉压下降。Ach能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。心率变慢则流向外周的血量变多，舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。但是因为血回心时间变长，因此，回心血量较多，脉压增加。而大多数血管没有Ach受体，Ach对外周阻力影响不大。兔动脉血压调节(ZT)2008-07-2917:53:27兔动脉血压调节【实验目的】观察神经和体液因素对血压和心率的影响；学习哺乳动物动脉血压（bloodpressure）的直接描记方法。【实验原理】心血管活动主要受神经、体液和自身调节。神经调节一般是通过反射(reflex)的形式实现的，包括压力感受性反射(baroreceptorreflex)、心肺容量感受性(cardiopulmonaryreceptor)反射、化学感受性(chemoreceptor)反射等，通过改变交感及副交感传出神经的紧张性活动，