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第三章：氨基酸、肽类、蛋白质化学一、填充题1组成蛋白质氨基酸的结构通式是（）。2具有紫外吸收能力的氨基酸有（）、（）和（），其中以（）的吸收最强。3脯氨酸是（）氨基酸，与茚三酮反应生成（）色物质。4（）和（）是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。5范斯莱克（VanSlyke）法测定氨基氮主要利用（）与（）作用生成（）。6实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱来滴定（）上放出的（）。7赖氨酸带三个解离基团，它们的pK分别为2.18，8.95及10.53。赖氨酸的等电点为（）。8肽链的N末端可以用（）法、（）法、（）法和（）法测定，而（）法和（）法是测定C末端氨基酸最常用的方法。）。9蛋白质分子的α-螺旋结构，每圈螺旋包含（）个氨基酸残基，螺距为（）nm，每个氨基酸残基沿轴上升高度为（）nm。天然蛋白质分子中的α-螺旋大多属于（）手螺旋。二、是非题1某化合物和茚三酮反应呈蓝紫色，因而可以断定它是氨基酸或是蛋白质。（）2亮氨酸疏水性比缬氨酸强。（）3氨基酸在水溶液或在晶体状态时都以两性离子形式存在。（）4合成的多聚谷氨酸在pH7时，其γ-羧基电离为-COO-，由于静电相斥，分子较松散，在pH4时并不电离，容易形成螺旋结构。（）5溶液的pH可以影响氨基酸的pI值。（）6组氨酸是人体的一种半必需氨基酸。（）7蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。（）8二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就没有三级结构。（）9凝胶过滤法可用于测定蛋白质的分子量，分子量小的蛋白质先流出柱，分子量大的后流出柱。（）10蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。（）三、选择题1下列哪种氨基酸溶液不能引起偏振光的旋转（）A丙氨酸B甘氨酸C亮氨酸D丝氨酸2下列氨基酸在生理pH范围内缓冲能量最大的是（）AGlyBHisCCysDAsp3分子中含有两个不对称碳原子的氨基酸是（）AProBTyrCThrDArg4氨基酸不具有的化学反应是（）A双缩脲反应B茚三酮反应CDNFB反应DPITC反应5用纸层析分离丙氨酸、亮氨酸和赖氨酸的混合物，则它们之间Rf的关系应为（）AAla＞Leu＞LysBLys＞Ala＞LeuCLeu＞Ala＞LysDLeu＞Lys＞Ala7下列哪种氨基酸有米伦（Millon）反应（）ATrpBTyrCPheDArg8Pauly试剂是将对氨基苯磺酸的重氮化合物喷洒到滤纸上，定性检测蛋白质的试剂，在蛋白质的地方显橘红色。它的生色反应是发生在蛋白质内的（）A色氨酸的吲哚环B半胱氨酸的巯基C组氨酸的α氨基D酪氨酸的酚羟基9在组蛋白的组氨酸侧链上进行（）以调节其生物功能。A磷酸化B糖基化C乙酰化D羟基化11如果要测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中选择一个你认为最合适的（）A茚三酮BCNBrC胰蛋白酶D异硫氰酸苯酯13蛋白质可与碱共热水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来定量蛋白质的()ASerBCysCThrDTrp14在pH7的水溶液里，在典型的球状蛋白分子中，处于分子的内部的氨基酸残基经常是（）AGluBPheCThrDAsn16胰蛋白酶专一水解多肽键中（）A碱性残基N端B酸性残基N端C碱性残基C端D酸性残基C端17羧肽酶C专门水解C端倒数第二位是哪个氨基酸形成的肽链（）AArgBLysCCysDPro18下列蛋白质中，（）不是糖蛋白A免疫球蛋白B溶菌酶C转铁蛋白D胶原蛋白19血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于（）AO2分压的减少BCO2分压的减少CCO2分压的增加DpH值的增加20SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量是根据各种蛋白质（）A在一定pH值下所带净电荷的不同B分子大小不同C分子极性不同D溶解度不同四、问答及计算题1试命名下列氨基酸（均存在于蛋白质中）（1）用强酸或强碱处理能转变成存在于蛋白质中的另一种氨基酸。（2）空气中即可氧化为存在于蛋白质中的另一种氨基酸。（3）能在279nm强烈吸收紫外光，易为强酸所破坏。（4）在pH6～pH8内有缓冲能力。（5）与茚三酮反应生成一种黄色产物。（6）其水溶液无旋光性。2分析下列4个肽的混合物，在Dowex-1（一种阴离子交换树脂）的离子交换柱上以从pH10→1.0连续变化的缓冲系统作洗脱，试说出每种肽洗脱的相对次序。A赖-甘-丙-甘B赖-甘-丙-谷C谷-甘-丙-谷D组-甘-丙-谷3某一条肽经酸水解组成分析含5种氨基酸，其N端非常容易环化。经CNBr处理后得一游离碱性氨基酸，Pauly反应阳性。若用胰蛋白酶作用则得两个肽段；其一为坂口反应阳性，另一在280nm有强的光吸收，并呈Millon氏阳性反应。求此肽段氨基酸排列顺序，并指出它的等电点应该是大于、等于或小于pH7。4蛋白质化学中常用的试剂有下列一些：CNBr，尿素，β-巯基乙醇，胰蛋白酶，过甲酸，丹磺酰氯，6mol/LHCl，茚三酮，异硫氰酸苯酯和胰凝乳蛋白酶等。为完成下列各项试验，请回答每项的最适试剂是什么？（1）一个小肽的氨基酸顺序的测定（2）多肽链的氨基末端的测定（3）一个没有二硫键的蛋白质的可逆变性（4）芳香族氨基酸残基的羧基一侧肽键的水解（5）甲硫氨酸的羧基一侧肽键的裂解（6）通过氧化途径将二硫键打开参考答案二、是非题1错2对3对4对5错6对7对8错9错10错11错12错13对14对15错16对17错18对19错20对21错22错23错24对25对26错27对28对29错30错三、选择题1B2B3C4A5C6C7B8D9A10C11D12A13D14B15C16C17D18B19C20B21B22D23D24A25C26D27A28B29C30A31B32A33D34A35D四、问答及计算题1(1)谷氨酰胺或天冬酰胺（2）半胱氨酸（3）色氨酸（4）组氨酸（5）脯氨酸（6）甘氨酸24个肽被洗脱下来的先合顺序依次为A→B→D→C。3该五肽的顺序为：谷氨酰-精氨酰-酪氨酰-甲硫氨酰-组氨酰。此肽段的等电点大于7。4（1）异硫氰酸苯酯（2）丹磺酰氯（3）尿素（4）胰凝乳蛋白酶（5）CNBr（6）过甲酸。第三章：酶化学一、填充题1全酶是由（）和（）组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中（）决定酶的专一性和高效率，（）起传递电子、原子或化学基团的作用。2酶活性中心往往处于酶分子表面的（）中，形成（）区，从而使酶与底物之间的作用加强。3T.R.Cech和S.Altman因各自发现了（）而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。4金属离子对酶的激活作用有两种，一是作为（），二是作为（）。5乳酸脱氢酶有（）种（）个亚基组成。体内有（）种乳酸脱氢酶的同工酶，在临床诊断上有应用价值。6胰蛋白酶的专一性就是在（）残基右侧的肽键上水解；羧肽酶B专一性地从蛋白质的羧羰切下（）氨基酸。7同一种酶有n个底物，就有（）个Km值，其中Km值最（）的底物，便为该酶的最适底物。8测定酶活力时，底物浓度应（），反应温度应选在（），反应pH选在（），反应时间应在反应的（）期进行。9表示酶量的多少常用（）表示。二、是非题1与非酶反应相比，酶反应能使更多的底物变成为产物。（）2酶影响它怕催化反应的平衡的到达时间。（）3辅基与辅酶的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同，并无严格的界限。（）4氧化酶都含有细胞色素。（）5酶反应最适pH只取决于酶蛋白本身结构。（）6在极低底物浓度时，酶促反应初速度与底物浓度成正比。（）7做为辅因子的金属离子，一般并不参与酶活性中心的形成。（）8底物与酶的活性中心靠共价键结合，以提高催化效率。（）9测定反应的最适温度时，先将酶在不同温度下保温一段时间，然后在30℃下测定酶活性。（）10Km值是酶的一种特征性常数，有的酶虽可以有几种底物，但其Km值都是固定不变的。三、选择题1在测定酶活力是，用下列哪种方法处理酶和底物才合理（）A其中一种用缓冲液配制即可B分别用缓冲液配制，然后混合进行反应C先混合，然后保温进行反应D分别用缓冲液配制，再预保温两者，最后混合进行反应2假定一种酶只有当某一特定的组氨酸残基侧链未被质子化时，酶分子才具有活性，降低pH对于该酶会发生下列哪一种类型的抑制作用。（）A反竞争性B非竞争性C竞争性D混合型3酶的纯粹竞争性抑制具有下列哪种动力学效应（）AVmax不变，Km增大BVmax不变，Km减少CVmax增大，Km减小DVmax增大，Km不变4酶与底物分子间的关系可以恰当地表述成（）A一种临时性结合B通过共价键的一种稳定结合C酶在其中发生永久性改变的一种结合D随机的非互补结合5已知胰凝乳蛋白酶的转换数是100s-1，DNA聚合酶是15s-1。下列说法正确的是（）A胰凝乳蛋白酶的底物结合常数高于DNA聚合酶B胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶反应速度更大C在一定的酶浓度和饱和底物水平下胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶在相同条件下更低D在饱和底物水平下，胰凝乳蛋白酶的反应速度大约是DNA聚合酶反应速度的6.7倍四、问答及计算题1何为酶的活力和比活力？测定酶活力时应注意什么？为什么测定酶活力时以测定初速度为宜，并且底物浓度远远大于酶浓度？2已糖激酶溶液在45℃，12min内会丢失50%活性。但是当有大量底物葡萄糖存在时，该酶在45℃只丢失3%活性。试解释此现象。9甘油醛-3-磷酸脱氢酶，相对分子质量为4万，由4个相同亚基组成，每个亚基上有一个活性位点，在最适条件下，5ug纯酶制品每分钟可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸转化为甘油酸-3-磷酸。请计算酶的比活力和单个活性位点的转换数。10α-糜蛋白酶（Mr24000）可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活为45.0umol/min/mg酶。已知α-糜蛋白酶只有一个活性位点。求转换数。11（1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当[S]=Km时，若υ=35umol/min，Vmax是多少umol/min？（2）当[S]=2×10-5mol/L，υ=40umol/min，这个酶的Km是多少？（3）若I表示竞争性抑制剂，KI=4×10-5mol/L，当[S]=3×10-2mol/L和[I]=3×10-5mol/L时，υ是多少？12在不同底物浓度的反应体系中，分别测有无抑制剂存在时的υ，数据如下：[S]无I有I（2.2×10-4mol/L）mol/L(×10-4)v(µmol/min)v(µmol/min)1.028171.536232.043295.065507.57461求有无抑制剂存在时的Vmax和Km(Kˊm),并判断这种抑制剂是什么类型的抑制剂。13称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液，从中取出0.1mL酶液，以酪蛋白为底物，用Folin-酚比色法测定酶活力，得各每小时产生1500ug酪氨酸。另取2mL酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。若以每分钟产生1ug酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，根据以上数据，求出：（1）1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位；（2）比活力；（3）1g酶制剂的总蛋白量及总活力。参考答案一、填充题1酶蛋白辅酶因子酶蛋白辅酶因子2凹穴疏水3核酶（具有催化作用的RNA）4酶的辅助因子直接的激活剂52456碱性氨基酸碱性7n小8远远超过酶浓度最适温度最适初9酶的活力单位数108111绝对立体12–1/Km1/Vmax13亚基解离14正碳离子五价磷过渡态Zn2+-活化水四面体肽键氧阴离子活化水15无酶时不反应被靶酶专一性激活与靶酶反应必须比解离更为迅速，即K1＞＞Kdis16最慢的第一步反应17酶活性中心18别构酶共价调节酶齐变序变19丝氨酸20蛋白激酶蛋白磷酸酯酶21糖基化乙酰化γ-羧基化ADP-核糖基化22天冬氨酸组氨酸23腺苷酰化脱腺苷酰化24比活力总活力25增大变小二、是非题1错2对3对4错5错6对7错8错9错10错11对12对13错14对15错16错17错18错19对20对21对22错23对24错25对26对27错28错29错30对三、选择题1D2B3A4A5D6D7D8B9A10C11C12B1