曹华梅毕业论文定稿

河南科技大学毕业设计（论文）铜绿假单孢菌色素产生最佳培养条件及色素稳定性研究THEOPTIMUMCULTURECONDITIONSANDTHESTABILITYOFTHEPIGMENTOFPSEUDOMONASAERUGINOSAPIGMENTPRODUCTION姓名：曹华梅院系：动物科技学院专业：动物医学指导教师：刘一尘2014年6月3日I毕业设计（论文）任务书（指导教师填表）填表时间：2014年1月2日学生姓名曹华梅专业班级动医102班指导教师刘一尘课题类型论文题目铜绿假单孢菌色素产生的最佳培养条件及色素稳定性研究主要研究内容1.采用正交方法对产色素的最佳培养条件进行优化：如环境因素中的温度光照等，营养因素中的碳源、氮源、无机盐及pH值等，并确定最佳培养基组分。2.不同温度、pH、金属离子、光照、氧化剂、还原剂等外界因素对色素稳定性的影响，并确定最佳保存条件。主要技术指标(或研究目标)对实验室筛选保存的铜绿假单孢菌产色素的最佳培养条件进行优化，并进一步外界环境因素对色素稳定性的影响进行研究。试验结束后，完成10000字以上的毕业论文写作，并需要完成大约10000英文字符（大约2000汉字）的英文资料的翻译工作。进度计划2014.1.7-2014.2.28查阅国内外资料，撰写开题报告；2014.3.1-2014.3.31产色素的最佳培养条件优化；2014.4.1-2014.4.30外界因素对色素稳定性的影响；2014.5.1-2014.6.15整理试验数据，撰写毕业论文，准备论文答辩。主要参考文献[1]丛延广，刘俊康，袁泽，等.形态受培养温度影响的绿脓杆菌菌株[J].微生物学通报，2001，28(2)：76-78.[2]李永明，徐玲，陈宏远.鸡源铜绿假单胞菌的生物学特测定[J].中国兽医杂志，2004，40(9)：21-22.[3]龚良玉，王修林，李雁宾，等.铜绿假单胞菌产吩嗪类色素的分离纯化及其对赤潮生物生长的影响[J].复旦学报，2004，43(4)：494-499.[4]徐海津，单志英，林伟利，等.铜绿假单胞菌色素代谢相关基因的研究[J].微生物学报，2005，45(1)：14-18.教研室主任签字：年月日II铜绿假单孢菌色素产生的最佳培养条件及色素稳定性研究摘要铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa）是在机体免疫力低下等特殊情况下引起机体感染的一种条件致病菌，含绿脓素等多种致病因子。绿脓素为蓝绿色的吩嗪类化合物，与该菌的感染性和致病性密切相关。同时，该色素又可作为抗菌剂和食品着色剂进行应用。另外，对铜绿假单胞菌产色素培养特性的观察是微生物学本科实验教学中的项目之一，而色素的产生及产生的浓度受诸多因素影响，在学生试验中很多学生并不能观察到色素的产生现象或产生色素现象不明显。本实验通过对铜绿假单胞菌培养组分不同碳源下、不同氮源下、不同无机盐下分别接种细菌观察色素产生情况。在最佳培养组分基础上，培养条件不同温度、不同pH、不同光照下产色素的情况进行研究，可以发现在不同培养组分条件下，铜绿假单胞菌的最佳碳源为乳糖，最佳氮源为蛋白胨，最佳无机盐K2HPO4。在不同培养条件下，铜绿假单胞菌的最佳培养温度为37℃，最佳pH为7.2，最佳光照条件为黑暗。本研究有利于对铜绿假单胞菌绿脓素合成机制的研究，有利于学生实验教学的顺利开展，也为该色素进一步的开发应用奠定基础。关键词:铜绿假单胞菌，色素，培养组分，条件IIITHEOPTIMUMCULTURECONDITIONSANDTHESTABILITYOFTHEPIGMENTOFPSEUDOMONASAERUGINOSAPIGMENTPRODUCTIONABSTRACTPseudomonasaeruginosa(P.Aeruginosa)isaconditioncausedbytheinfectionofthepathogenintheimmunocompromisedandotherspecialcircumstances,includingpyocyaninandotherpathogenicfactors,pyocyaninasblue-greenphenazinecompounds,andiscloselyrelatedtotheinfectionandpathogenicity.Atthesametime,thepigmentcanbeusedasantibacterialagentandcolouringagentforfoodapplication.Therefore,toobservetheculturalcharacteristicsofpigmentsproducedbyPseudomonasaeruginosaisoneoftheprojectsofundergraduateexperimentalteachinginmicrobiology.Andthepigmentproductionandconcentrationisaffectedbymanyfactors,inthestudenttestmanystudentscannotproducethephenomenonobservedpigmentorpigmentproducingphenomenonisnotobvious.TheexperimentbasedonPseudomonasaeruginosaculturecomponentsunderdifferentcarbonsources,differentnitrogensources,inorganicsaltswereinoculatedwithbacteriaobservedpigmentproduction.Attheoptimumcompositionbasedonthecultureconditions,differenttemperature,differentPH,differentlightonpigmentproduction,canbefoundinthedifferentculturecomponentsundertheconditions,thebestcarbonsourceofPseudomonasaeruginosatolactose,peptonewasthebestnitrogensource,thebestinorganicsaltK2HPO4.Underdifferentcultureconditions,theoptimalculturetemperatureofPseudomonasaeruginosawas37℃,theoptimumPHis7.2,thebestlightintodarkness.ThisresearchisconducivetoPseudomonasaeruginosapyocyaninsynthesismechanism,benefitstudentsexperimentalteaching,butalsolaythefoundationforthedevelopmentandapplicationofthepigmentfurther.KEYWORDS:Pseudomonasaeruginosa，pigment，trainingcomponent，conditionsIV目录1.前言....................................................11.1铜绿假单胞菌的生物学特性..............................21.2铜绿假单胞菌的流行病学................................21.3铜绿假单胞菌的致病性..................................31.3.1绿脓素...............................................31.3.2外毒素A.............................................41.3.3胞外酶S.............................................51.3.4铜绿假单胞菌的防制...................................61.4本研究的目地及意义.....................................62材料与方法.............................................72.1实验材料..............................................72.1.1菌株来源.............................................72.1.2实验试剂...........................................72.1.3试验所用器材及仪器..................................72.1.4普通培养基的配制...................................72.2实验方法...............................................82.2.1细菌的复苏培养......................................82.2.2细菌的纯化培养.......................................82.2.3不同培养基组份对绿脓假单胞菌产色素的影响.............82.2.4不同培养基条件对绿脓假单胞菌产色素的影响.............83结果...................................................93.1细菌的复苏和纯化培养结果...............................93.2细菌在不同培养组分与条件下培养产生色素的结果..........103.2.1不同培养基组分对绿脓假单胞菌产色素的影响............103.2.2不同培养基条件对绿脓假单胞菌产色素的影响............184讨论..................................................244.1铜绿假单胞菌的致病性方面.............................244.2不同培养组分对铜绿假单胞菌色素产生的影响..............254.3不同培养条件对铜绿假单胞菌色素产生的影响..............265结论...................................................265.1铜绿假单胞菌在不同培养基组分下的色素的情况............265.2铜绿假单胞菌在不同培养条件下的色素的情况..............26V参考文献................................................27致谢...................................................29外文资料译文及原文.......................................3011前言铜绿假单胞菌是1882年首先由Gersard氏从伤口脓液分离得到[1]。铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa）原称绿脓杆菌，在自然界分布广泛，土壤、水、空气，正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有该菌存在。铜绿假单胞菌为条件致病菌，在特定的情况下能引起人及动物感染发病。常从正常禽的肠道、呼吸道和卵中分离出来，能引起各种年龄的禽发病，致死率在1%-90%以上[2]。应激是幼禽暴发绿脓杆菌病的主要原因。该菌给规模化养殖场和人类的健康造成了很大威胁。在人医上铜绿假