搜索
一、选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。1．以下哪种物质在PCR反应中不需要（）A．TaqDNA聚合酶B．dNTPsC．Mg2+D．RNA酶E．合适pH缓冲液2．以下哪种酶可耐高温（）A．TaqDNA聚合酶B．HindⅢC．T4连接酶D．RNA酶E．Klenow片段3．PCR反应正确过程应为（）A．退火→变性→延伸B．变性→退火→延伸C．退火→延伸→变性D．变性→延伸→退火E．延伸→变性→退火4．PCR技术的本质是（）A．核酸杂交技术B．核酸重组技术C．核酸扩增技术D．核酸变性技术E．核酸连接技术5．TaqDNA聚合酶酶促反应最适温度为（）A．37℃B．50℃～55℃C．70℃～75℃D．80℃～85℃E．94℃～95℃6．能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪7．在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光实时PCR仪E．定性PCR仪8．PCR基因扩增仪最关键的部分是（）A．温度控制系统B．荧光检测系统C．软件系统D．热盖E．样品基座9．“位置的边缘效应”是指（）A．温度的准确性欠佳B．温度的均一性欠佳C．边缘升降温速度快D．边缘升降温速度慢E．梯度模式和标准模式温度不一致10．PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外（）A．缩短反应时间B．提高工作效率C．消除位置的边缘效应D．缩短非特异性反应时间E．提高反应特异性11、PCR技术扩增DNA,需要的条件是()①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥12、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（）A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/D、0.5-2mmol/L13、多重PCR需要的引物对为（）A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物14、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（）A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子15、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增()A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高16、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是A．dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作DNA合成的原料B．dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C．DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋D．CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一17、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：（）A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高18、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（）A．PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段B．PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等C．PCR技术需在体内进行D．PCR技术是利用碱基互补配对的原则19、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A．640B．8100C．600D．864020、对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）A．MB．NC．QD．W21、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是①降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A.②④③B.②④③①C.③④①D.②④①22、PCR的发明人是A.MullisB.牛顿C.KennyD.James23、退火温度一般比引物的熔解温度（Tm）低多少合适A.7℃B.10℃C.5℃D.2℃E.20℃24、引物的最佳浓度为A.0.1-0.5μMB.1-2μMC.5-10μMD.100μME.200μM25、专门用于制备单链DNA的PCR技术是A、对称PCRB、反向PCRC、RT－PCRD、不对称PCRE、嵌套PCR26、PCR变性温度一般为A．96℃B.85℃C.72℃D.55℃E.100℃27、pre-mRNA内含子的5'-末端一般为（）A、AUB、GUC、AGD、CGE、AC28、在大肠杆菌的DNA损伤修复时，对于填补缺口可能最重要的酶是A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、RNA聚合梅E、以上都不是29、可用于扩增未知序列的PCR方法是（）A、对称PCRB、反向PCRC、RT-PCRD、不对称PCRE、嵌套PCR30、在聚合酶链反应（PCR）中最常用的DNA聚合酶是A．T4DNA连接酶B．T7DNA聚合酶C．TaqDNA聚合酶D．E.coliDNA聚合酶IE．E.coliDNA聚合酶II31、下列关于PCR引物设计的说法错误的是（）A．设计引物时应考虑使3’端引物和5’端引物具有相似的Tm值B．每条引物自身不应有稳定的发夹结构C．上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构D．引物的5’和3’端必须和模板严格配对结合E．引物与非特异扩增区的序列无同源性32、TaqDNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3’末端加上一个碱基为（）A.GB.AC.TD.CE.I33．PCR反应中，所设计引物的长度一般为（）A．5～10核苷酸B.15～30核苷酸C.50个核苷酸D.长度任意E.以上答案均不对34．引物设计时G＋C含量在引物中一般占（）A.20～40﹪B.30～60﹪C.45～55﹪D.越高越好E.含量随意35．以下说法错误的是（）A引物中的碱基组成应该尽可能的随机分布。B引物自身不应该存在互补序列C设计引物时应考虑使3‘端引物和5‘端引物具有相似的Tm值D引物的5‘和3’端必须和模板严格配对结合E引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70﹪36．下列说法正确的是（）C.PCR反应常用的缓冲液为10－50mmol/L的Tris-HCl（室温PH8.3－8.8）D.10mmol/L的KCl能促进引物的退火E.加入的BSA有利于破坏模板的二级结构F.二甲基亚砜有利于保护TaqDNA酶的活性。E.Mg2+能降低TaqDNA聚合酶的活性。37.TaqDNA聚合酶活性需要以下哪种离子（c）A．K+B.Na+C.Mg2+D.Ca2+E.Cl-38．适用于DNA序列中单个碱基突变的检测的方法是：(d)A．筑巢PCRB.多重PCRC.锚定PCRD.LCR39．以下哪种PCR技术广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究（a）A．原位PCRB．差异显示PCRC．不对称PCRD．反向PCR40.已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC,其Tm值为（）A.78B.80C.82D.84E.无法计算41．以下关于dNTP的说法错误的是（）B.dNTP具有较强的酸性，使用时应将pH调至7.0-7.5C.PCR反应中，四种dNTP必须按比例配制，以减少反应的错配率。D.dNTP的浓度过高会增加碱基的错配率E.dNTP的浓度低，反应速度下降，但特异性提高42.TaqDNA聚合酶可以不要模板在dsDNA的末端加上一个()碱基.A.dGTPB.dCTPC.dATPD.dTTP43.有关PCR的描述哪个不对()A.是一种酶促反应B.引物决定扩增的特异性C.扩增的对象是DNA序列D.扩增的对象是氨基酸序列44.催化PCR的酶是()A.RNA聚合酶B.DNA聚合酶C.TaqDNA聚合酶D.反转录酶45.PCR产物具有特异性是因为()A.TaqDNA酶保证了产物的特异性B.合适的变性,退火,延伸温度C.选择特异性的引物D.引物的Tm值不同.46．LCR的说法正确的是()A.体系中采用DNA聚合酶B.须设计一对引物C.反应需经过变性,复性,连接D.LCR中,酶将dNTP加到引物的3-OH端E.LCR具有高度敏感性二、多项选择题1．下列关于退火温度说法正确的是（）A.合适的退火温度应低于引物Tm值5℃左右。B.引物与模板的退火温度一般在45－55℃之间C.在Tm值允许的范围内，选择偏低的退火温度可以提高PCR反应的特异性。D.退火时间至少需要一分钟。2．进行PCR实验时以下措施有助于防止污染和结果的假阳性（）B.隔离不同的操作区C.分装试剂，减少重复取样所致的污染D.严格实验操作E.设立实验对照3．适用于扩增3‘或5‘端未知序列的PCR技术是（）A．反向PCRB.锚定PCRC.多重PCRD.不对称PCR4．以下关于PCR技术应用说法正确的是（）B.筑巢PCR和共享引物PCR有利于增强PCR反应的特异性，适用于模板含量极少的样品的检测C.不对称PCR可以大量制备单链DNA，可用于DNA的序列测定D.彩色PCR适用于基因诊断和自动化DNA序列测定E.定量PCR可用于基因表达和调控的研究F.差异显示PCR可用于筛选和克隆受发育，突变等各种因素影响下差异表达的基因5.关于引物设计说法正确的是（）B.为保证PCR反应的特异性，所设计的引物长度一般30个核苷酸C.引物设计时G＋C含量在引物中一般为45～55﹪D.按经验，引物自身存在的连续互补序列一般不超过3个碱基E.两个引物之间不应存在互补序列，尤其避免3‘端的互补重叠F.引物的3‘端可以游离而不影响PCR反应的进行6.以下关于PCR的说法正确的是（）A.PCR的模板可以是DNA也可以是RNAB.PCR的模板必须从组织细胞中分离出来C.PCR反应的特异性取决于引物和模板DNA的结合位点。D.PCR反应初期，目的DNA片断的增加呈指数扩增。E.PCR反应一般需要含102－105拷贝的模板7．以下关于PCR反应条件错误的是（）B.PCR缓冲液中加入二甲基亚砜有利于破坏模板的二级结构，提高反应的特异性。C.Mg浓度过高会降低TaqDNA酶的活性，Mg浓度过低又会使酶催化非特异性扩增增强。D.4种dNTP应以等摩尔浓度配制，以减少错配误差。E.引物浓度一般为0.5-1umol/L8.PCR反应时应设立哪种对照（）A.阴性对照B.阳性对照C.试剂对照D.以上答案都正确9.逆转录反应体系包括（）B.RNA模板，四种dNTPC.RNA酶抑制剂D.合适的缓冲液体系E.逆转录酶F.寡聚胸腺嘧啶核苷酸引物10.有关PCR的模板说法正确的是()A.模板可以是DNA也可以是RNAB.大多数PCR反应中对DNA模板纯度要求不高C.模板用量低D.标本处理的基本要求是除去杂质11.以下有关RT-PCR反应的说法你认为正确的有()A.反应体系一般有20μlB.反应体系中有缓冲液,四种dNTP,MgCl2,DTT,牛血清白蛋白,Oligo(dT)引物RNA模板和逆转录酶C.逆转录于42℃进行,随后即进行PCRD.RT-PCR的最终反应过程依然是以DNA为模板的PCR反应12.PCR的产物累积的特征是()B.