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氨基移换反应及其产物的鉴定1、原理–氨基移换反应：在氨基移换酶（转氨酶）的催化下，氨基酸的α-氨基和α-酮酸的α-酮基之间发生的互换反应。–转氨酶的种类很多，任何一种氨基酸进行转氨作用时都由其专一的转氨酶催化。转氨酶的最适pH接近7.4，在各种转氨酶中，谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性最强。–本实验即利用纸层析法，通过检查α-酮戊二酸和丙氨酸在谷丙转氨酶的作用下所生成的谷氨酸，来证明组织内的转氨作用。有关原理如下：氨基移换反应及其产物的鉴定⑴、转氨反应原理⑵、纸层析原理–纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。分配层析是利用不同物质在两个互不相溶的溶剂中分配情况（溶解度）的不同来分离混合物的一种技术。COOHCHNH2CH3COOHCO(CH2)2COOHCOOHCOCH3COOHCHNH2(CH2)2COOH++谷丙转氨酶Alaα-KGGlu氨基移换反应及其产物的鉴定–层析时展层溶剂由有机溶剂和水组成。吸附在滤纸上的一层水分子为层析的固定相，与固定相不相混溶的有机溶剂为层析的流动相。进行分离时由于被分离物质的组分在两相中的分布不同，随着流动相的移动，物质将在两相间进行连续的、动态的不断分配，从而造成不同组分移动的速度也不相同。易溶于流动相中的组分移动快，在固定相中溶解度大的组分移动慢，于是得到分离。–物质分离后在滤纸上的位置可用比移值（Rf）来表示。展层后斑点中心与原点之间的距离Rf=原点与溶剂前缘间的距离氨基移换反应及其产物的鉴定–用滤纸层析法分离氨基酸，是根据氨基酸样品的R基的化学结构或极性大小的不同，将样品氨基酸溶解在适当的溶剂（水、缓冲液或有机溶剂）中，点样在滤纸的一端，再选用适当的溶剂系统，通过毛细现象向另一端展层，展层完毕后，用茚三酮作为显色剂，即可得到氨基酸样品的分离图谱。⑶、茚三酮的显色原理氨基酸+茚三酮紫红色复合物570nm处具特征光吸收，可据此定量测定各种氨基酸氨基移换反应及其产物的鉴定2、实验材料及试剂–实验材料：新鲜动物肝脏–实验试剂：试剂的配制及注意事项参191。3、实验步骤–操作过程及注意事项参192。4、实验结果及处理–认真观察实验现象，并对层析后氨基酸的显色情况进行分析。