消毒剂消毒效力及有效期验证方案04-19

CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：1/151CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：2/15TabletofContent目录1.目的和范围...................................................................................................错误!未定义书签。2......................................................................................................................错误!未定义书签。3......................................................................................................................错误!未定义书签。4.定义与缩写...................................................................................................错误!未定义书签。5.参考文件..................................................................................................................................36.概述.........................................................................................................................................37.确认前准备..............................................................................................................................58.消毒剂消毒效力试验................................................................................................................69.消毒剂有效期确认试验..........................................................................................................1310.验证偏差和变更..........................................................................................错误!未定义书签。11.附录列表..............................................................................................................................15CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：3/15消毒剂的选用原则：目的：确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染的目的，并在消毒剂有效期内能确保其消毒效力能符合要求。范围：本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。1.参考文件1.1.药品生产验证指南2003版1.2.微生物检测验证技术（中国医药科技出版社）2.概述2.1.本公司的洁净区分为A级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有七种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、0.3%新洁尔灭溶液、0.1%醋酸洗必泰、0.5%醋酸洗必泰、40mg/L的二氧化氯、60mg/L的二氧化氯。本次验证方案将选用以上7种消毒剂分别进行验证试验。作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：4/15消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期序号名称消毒对象消毒方法有效期175%乙醇用于设备表面、器具和手消毒。采用擦拭或喷洒方式密闭保存C级：7天D级：30天240mg/L二氧化氯溶液用于地面、墙面和器具的消毒采用擦拭方式密闭保存C级：7天D级：30天360mg/L二氧化氯溶液用于工作服、清洁布和拖布的消毒采用浸泡方式密闭保存C级：7天D级：30天40.1%新洁尔灭溶液用于地面、墙面、器具、工作服、清洁布、拖布和洁净鞋的消毒采用擦拭或浸泡方式密闭保存C级：7天D级：30天50.3%的新洁尔灭溶液用于水池和地漏的消毒用于液封密闭保存C级：7天D级：30天60.5%醋酸洗必泰溶液用于水池和地漏的消毒用于液封密闭保存C级：7天D级：30天70.1%醋酸洗必泰溶液用于工作服、清洁布、拖布和洁净鞋的消毒采用浸泡方式密闭保存C级：7天D级：30天2.2.为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。其中，用定量悬浮试验法和表面实验法进行实验室考察试验部分。洁净区设施表面材质基本都是不锈钢和玻璃两种，故表面试验法选用不锈钢载片和玻璃裁片模拟洁净区设施表面进行验证试验。两种试验方法作用的消毒剂见表。序号试验方法消毒剂1表面实验法75%乙醇240mg/L二氧化氯溶液30.1%新洁尔灭溶液4定量悬浮试验法0.3%的新洁尔灭溶液50.1%新洁尔灭溶液660mg/L二氧化氯溶液70.1%醋酸洗必泰溶液80.5%醋酸洗必泰溶液CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：5/15现场考察试验部分选择固体车间（D级）的制粒一、小容量注射剂车间(C级)的配液间、灌封间层流罩（A级）设备表面消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。3.确认前准备3.1.验证用试剂与材料3.1.1.菌种序号名称序列号1金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]2大肠埃希菌[CMCC(B)44102]3枯草杆菌芽孢[CMCC(B)63501]白色念珠菌[CMCC(F)98001]3.1.2.培养基序号名称备注1营养琼脂培养基培养基经121℃，20min灭菌备用2营养肉汤培养基3改良马丁琼脂培养基4改良马丁培养基5大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟（编号：BZW12085）规格：：55mm，取样面积为25m26玫瑰红钠琼脂培养接触碟（编号：BZW15129）CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：6/153.1.3.消毒液拟定选用的中和剂序号消毒剂名称中和剂备注175%乙醇1%卵磷脂+0.1%聚山梨酯80中和剂经121℃，20min灭菌备用。20.1%新洁尔灭溶液30.3%的新洁尔灭溶液40.5%醋酸洗必泰溶液50.1%醋酸洗必泰660mg/L二氧化氯溶液0.5%硫代硫酸钠740mg/L二氧化氯溶液3.1.4.稀释液0.9%无菌氯化钠溶液（NS）3.1.5.器具及设备序号名称1无菌移液管2锥形瓶3无菌试管4漩涡混合器5恒温水浴锅6恒温恒湿培养箱7恒温恒湿培养箱3.2.验证用试剂与材料记录见附录1。4.消毒剂消毒效力试验4.1.中和剂鉴定试验4.1.1.试验目的通过该试验，确认所用的中和剂对对应的消毒剂有良好的中和作用，对试验用菌剂及其CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：7/15恢复期培养示范有害或不良影响。4.1.2.菌液的制备及计数4.1.2.1.金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌工作菌液的制备接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时。取上述培养物用0.9％无菌氯化钠溶液做10倍系列稀释成1×108~5×108CFU/ml的工作菌液（如肉汤培养物的浓度已为1×108~5×108CFU/ml，可不再用0.9％无菌氯化钠溶液稀释）。计数时，将1×108~5×108CFU/ml的工作菌液10倍系列稀释成含50～100CFU/ml菌液，并同时采用营养琼脂培养基30～35℃培养2天计数。计算该稀释级的平均菌落数，将计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。4.1.2.2.白色念珠菌工作菌液的制备接种白色念珠菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，23～28℃培养24～48小时。取上述培养物用0.9％无菌氯化钠溶液做10倍系列稀释成1×108~5×108CFU/ml的工作菌液（如肉汤培养物的浓度已为1×108~5×108CFU/ml，可不再用0.9％无菌氯化钠溶液稀释）。计数时，将1×108~5×108CFU/ml的工作菌液10倍系列稀释成含50～100CFU/ml菌液，并同时采用改良马丁琼脂培养基23～28℃培养3天计数。计算该稀释级的平均菌落数，将计数结果换算成每毫升浓菌液的菌落数。4.1.3.鉴定试验操作4.1.3.1.配制75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、0.3%新洁尔灭溶液、0.1%醋酸洗必泰、0.5%醋酸洗必泰、40mg/L的二氧化氯、60mg/L的二氧化氯，具体操作执行《清洁剂和消毒剂管理》。将配置好的消毒剂置20℃±1℃恒温水浴锅中备用。4.1.3.2.分组操作CleaningandSanitizingCompoundstheEffectoftheProgrammeValidationProtocol消毒剂消毒效力及有效期确认验证方案Doc.No./编号：2008244712045Page/页码：8/15试验分组及稀释操作方法简表具体操作第1组目的：观察消毒液对试验菌有无杀灭或抑制能力。操作：取消毒剂4.5ml+工作菌液0.5ml，混匀作用10min后，取混合