波谱学复习课-光谱色谱

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仪器分析-荧光、色谱学部分复习纲要荧光分析法Fluorescence化学发光分析Chemiluminescence(简略)色谱法Chromatography:理论基础、GC、HPLC毛细管电泳(简略)Chap6.分子发光光谱之FS法P308一、重点内容:1、分子荧光、磷光的产生原理(无辐射跃迁有哪几种?)2、荧光激发光谱、发射光谱与同步荧光光谱;荧光光谱特征(stokes位移、镜像对称。。。)3、重点:影响荧光/磷光强度的因素(分子结构、所处的化学环境):要求能分析实际例子分子结构:跃迁类型、共轭效应、取代基效应、结构刚性效应;环境:溶剂效应、温度、pH、淬灭、内滤作用4、荧光仪器:组成部分、仪器特殊性(90度、两个单色器。。。);与UV对比?定量分析:If=kC间接分析:荧光试剂衍生5、磷光(简略):原理、特点、低温\室温磷光6、化学/生物发光(简略):原理、主要类型、仪器二、公式:荧光量子产率P311、荧光/磷光强度三、重点概念:单重态、三重态、无辐射跃迁、振动弛豫、系间串越、内转移、外转移、重原子效应、荧光猝灭、荧光量子产率及其影响因素Chap7.色谱法基础(重点章节):1、掌握色谱流出曲线、术语:基线、死时间、保留时间、死体积、保留体积、调整保留时间(体积)、峰高、半峰宽、峰底宽;计算2、分离过程参数定义及其意义:分配系数K、分配比k(容量因子..)、相比、相对保留值(选择性因子)、组分/流动相线速度、基本保留方程3、理解塔板理论:柱效物理意义、公式;计算4、速率理论对谱带展宽的影响以及对分离的指导意义;范氏方程、最佳流速/柱效(计算)5、掌握分离度的几种计算方法,以及影响分离度的主要色谱参数重点内容:色谱法定义、分类、特点、分离原理选择性和热力学性质;柱效和速率理论、动力学因素分离度计算(掌握不同的计算方法)影响色谱分离的因素:n,k,基本分离方程式(记忆公式,灵活运用n,k,的换算)公式:保留值、流动相线速度、柱效、H、VanDeemter方程分离度计算公式、基本分离方程式概念:分配系数、相比、分配比、选择性因子、峰宽、标准偏差、理论(有效)塔板数、理论(有效)塔板高度、分离度。。。Chap8.GC法:一、了解GC优点、适用范围;理解固定相及其选择的原则:GC固定相主要种类与特点、表征固定液的特征参数(保留指数I计算、麦氏或罗氏常数);固定液选择原则(能判断组分流出顺序)、流动相选择(相似相容原理;对分离的影响);二、了解GC仪器结构;重点理解常用检测器原理、所属类型(浓度型or质量型?;通用or选择性?)、优缺点和范围(热导\FID-有机物\ECD-含电负性元素\FPD-S,P:要求能根据实例判断);三、掌握常用定性(几种方法?)、定量方法(计算:归一化、内标法、。。。校正因子(绝对、相对。。))及其优缺点四、概念:担体、固定液及流失、GC填充柱和开管柱(主要了解特点:中空、柱效高、柱长);程序升温;检测器灵敏度、检测限、最小检出量、线性范围Chap9.HPLCP157一、HPLC原理、优点(与GC、经典LC比较;为何高效?)、适用范围二、HPLC仪器的组成(哪几部分组成?)常用检测器(表8.1:UV\PDA\FS\示差折光\电化学检测器)的基本原理、所属类别(通用or选择性?)、优缺点和适用范围(能根据实例判断)三、各种HPLC分离方式的原理、所用的固定相和流动相、适用对象和选择原则(要求能判断各种HPLC分离法的出峰次序):(液固色谱、重点-化学键合相色谱(正相、反相)、离子对色谱、离子色谱(离子交换、离子)、尺寸排阻色谱)四、固定相、流动相选择原则五、其他主要概念:梯度洗脱、化学键合相、正相色谱、反相色谱、离子对、抑制柱、排斥极限与全渗透极限重点知识点:HPLC和GC比较(分析对象、改变选择性的途径、分离效率、平衡时间、操作温度、仪器设备)梯度洗脱(与程序升温对比)HPLC的分离模式原理、应用五、毛细管电泳的原理、优点电渗流、影响选择性和柱效的因素(简单判断分离次序)考试类型:选择题+填空题、简答题、计算题大约3:3:4光谱、色谱、电分析各占1/3来源:课后习题、上课讲解、重要知识点

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