植酸预处液对月季切花中SOD活性和MDA含量的影响

12009届毕业生毕业论文题目:植酸预处液对月季切花中SOD活性和MDA含量的影响院系名称：国际学院专业班级：生物制药0501学生姓名：张晏宁学号：20054970124指导教师：景红娟教师职称：讲师2009年6月21日I摘要在切花工业中，月季是当今世界上最重要的切花之一，它易种植，产量高，用途广泛，已成为全球花卉贸易中重要的商品。但是由于月季切花的自然寿命很低，如何延长其瓶插寿命及延缓衰老一直是人们研究的热点。现在虽然对月季采后保鲜的研究很多，却鲜有植酸应用于月季切花保鲜的报道。植酸作为一种天然存在的有机化合物，广泛存在于植物组织中，它含量丰富又容易提取，如果能够作为切花的保鲜剂将会有效降低切花工业的成本。本实验主要研究了两种浓度分别为0.7%与1.3%的植酸预处液对月季切花的保鲜效果，同时以蒸馏水为对照，每个处理重复三次。研究对象是一种名为“Shasha90号”的红色月季，通过测定切花的瓶插寿命，MDA含量、SOD活性等生理指标来判断植酸保鲜液对月季切花的影响。结果表明，0.7%与1.3%的植酸预处液均能够延有效地延缓MDA含量的增加,但1.3%的植酸保鲜液由于酸性过强对切花造成伤害而导致切花死亡。所以0.7%的植酸保鲜液的保鲜效果最好。关键词：植酸月季切花超氧化物歧化酶丙二醛IITitleEffectsofPretreatmentsContainedPhyticAcidonMDAContentandSODActivityofCutRoseFlowersAbstractInthecut-flowerindustry,roseiscurrentlytheworld'smostimportantcutflowersinoneeasycultivation,highyield,widerangeofuses,theglobalflowertradehasbecomeanimportantcommodity.However,duetothenaturallifeofcutroseflowersisverylow,howtoprolongtheirvaselifeandanti-agingresearchhasbeenahotspot.Althoughroseisnowonpost-harvestpreservationofmanyofthestudies,butrarelyusedinphyticreportsfreshcutrose.Phyticacidasanaturallyoccurringorganiccompounds,widelypresentinplanttissue,ithasrichcontentandeasytoextract,ifthefreshcutflowerscanbeusedasagentswillbeeffectivetoreducethecostofcutflowersindustry.Experimentalstudiesofthetwoconcentrationswere0.7%and1.3%ofthephyticacidpretreatmentonthepreservationoftheeffectofcutroseflowers,whiledistilledwaterascontrol,eachrepeatedthreetimestodealwith.StudyiscalledShasha90No.RedRose,bydeterminingthevaselifeofcutflowers,MDAcontent,SODactivityandotherphysiologicalindicatorstodeterminethefreshnessofphyticacidontheimpactofcutroseflowers.Theresultsshowedthat0.7%and1.3%solutionofphyticacidpretreatmentwereabletodelaytheextensionoftheeffectiveincreaseinMDAcontent,but1.3%solutionofphyticacidasaresultoftoomuchharmtocuttheleadtodeaths.Therefore,0.7%ofthephyticacidpreservationofthebestpreservationsolution.Keywords:PhyticAcidCutFlowerSODMDAIII目次1.绪论..………………………………………………………………………………….……..11.1影响月季切花保鲜的因子………………………………………………………….…..11.2月季切花的化学保鲜技术………………………………………………………….….21.3植酸的抗氧化功能与切花保鲜…………………………………………………….…31.4前景展望…………………………………………………………………………….…..41.5本次课题研究内容………………………………………………………………….….52.实验仪器、药品、材料及实验方法…………………………………………….……..52.1实验仪器…………………………………………………………………………….….52.2实验药品……………………………………………………………………….………….62.3实验材料………………………………………………………………………...………62.4实验处理………………………………………………………………………………….72.5实验溶液制备…………………………………………………………………………….72.6实验方法………………………………………………………………………………......82.6.1硫代巴比妥酸法测定MDA的含量……………………………………………………82.6.2测定SOD酶活性………………………………………………………………….…83结果……………………………………………………………………………………….…93.1对月季切花花瓣中丙二醛(MDA)含量的影响……………………………………….…93.2对月季切花花瓣中超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响.…………………………..…114.讨论…………………………………………………………………………………………125.致谢…………………………………………………………………………………………136.参考文献……………………………………………………………………………………1411.绪论月季切花是一种较为常见且颇具观赏价值的花卉，其产量和规模正在日益扩大。然而其瓶插寿命短，观赏品质易下降，严重阻碍商品化生产和发展，因而关于月季切花的保鲜研究国内外一直较为活跃。目前，花卉保鲜通常还是采用传统的方法，如加人乙烯抑制剂AgNO3、STS等作为保鲜剂，或者用低温冷藏、气调储运等方法，但由于这些方法都有一些缺陷，如温控、气调的成本太高，另外，绝大部分保鲜剂都有毒性，对环境会造成污染。采用切花保鲜剂是近年发展起来的一种切花保鲜方法，由于效果显著，已被越来越多地应用于切花保鲜。植酸又称肌醇六磷酸酯、环已六醇六磷脂，是肌醇磷酸酯的混和物，包括肌醇二磷酯、肌醇三磷酯、肌醇四磷酯、肌醇五磷酯、肌醇六磷酯等。植酸为淡黄色或红褐色透明糖浆状液体，易溶于水、丙二醇、甘油等，难溶于醚、苯、氯仿,受强热可水解为肌醇和磷脂。主要以钙镁复盐的形式存在于植物种子及胚芽中，属天然营养品。是国际市场上流行的新型食品防腐剂、抗氧剂、保鲜剂。植酸的工业生产方法是用强酸水溶液浸泡米糠、麸皮等，使其中的植酸钙溶解出来，然后用碱金属或铵盐中和，再经酸解，精制的成品，它的环状对称结构使其具有12个可解离的酸性氢离子，因此呈强酸性，并具有极强的螯合能力。植酸是市场上流行的新型食品防腐剂、抗氧剂、保鲜剂，但作为切花保鲜剂方面的研究还很薄弱，为了寻找一种价廉、丰富、易得、保鲜作用显著的保鲜剂，本文对鲜切花的衰老机理及植酸这一天然存在的有机化合物作为切花保鲜剂的研究现状和发展前景进行了讨论，以拓宽天然产物研究开发的新途径。[22]1.1影响月季切花保鲜的因子切花脱落母体后，原有的平衡条件，加上环境和微生物的不良影响及其内部发生的一系列生理生化反应，最终导致切花衰老[1]，切花衰老的因素主要包括环境因子和内部影子两方面，内部因子在衰老过程中起主导作用。影响月季切花的因子包括：1.1.1环境因子环境因子主要是光、温度、湿度和其他微生物因子等，它们总是通过影响切花花蕾的生理变化来影响其衰老过程的。21.1.2内部因子a水分代谢，水分亏缺是切花月季衰老较快得主要原因之一。月季对水分胁迫得耐性相对较弱，短暂的水分胁迫即出现僵蕾、僵花、萎蔫、弯茎等现象，影响花朵正常开放和瓶插寿命[2]。b呼吸代谢，采后月季的呼吸作用与衰老有着密切关系。众多资料表明，切花月季在衰老的时候，呼吸强度得增强和乙烯得释放量呈相关性[3]。c细胞内含物得变化，切花衰老过程中可溶性蛋白质，游离氨基酸,游离碱性氨基酸，花青素等的含量都有着影响[4]。淀粉的分解维持可溶性糖含量水平[5]。d细胞膜的变化，月季切花衰老过程中用来衡量膜脂过氧化及细胞膜透性的指标分别是丙二醛(MDA)含量和相对电导率.月季切花衰老过程中细胞膜的相对透性增加[6]。总得来说，月季切花采后得衰老是一个复杂得生理过程，内在机制是由于气水分代谢失调，导致呼吸消耗增强，生物大分子降解和乙烯生成，最后引起生物膜结构和功能破坏得结果。1.2月季切花的化学保鲜技术化学保鲜以保鲜剂最为普遍，保鲜剂得主要生理功能是改善水分平衡，降低乙烯生成，降低细胞膜通透性，抑制花瓣中的丙二醛得生成等多方面，保鲜剂根据其成分和作用机理可分为：1.2.1杀菌剂杀菌剂得主要成分是防止菌类得产生和繁殖，以免阻塞水分的吸收和运输。1.2.2糖等能源物质常用的切花保鲜糖源为蔗糖，蔗糖得保鲜效应是改善水分代谢和细胞通透性，减缓可溶性糖分解，有利于延长瓶插寿命，但月季品种繁多，不同得品种对含糖量得要求有差异，且外源糖得浓度不宜过高，以免引起组织坏死[7]。1.2.3植物生长调节剂月季插花衰老与体内激素水平得平衡密切关系。其中SOD活性，MDA含量都有重要影响[8]。1.2.4乙烯抑制剂和拮抗剂月季切花对乙烯抑制剂和拮抗剂得反应因品种而异。31.2.5无机盐N、P、K、Ka、Co、Zn、Mn等无机盐能够增加溶液得渗透性和细胞的膨压有利于保持水分平衡[9]。1.2.6有机酸及盐类苯甲酸钠和抗坏血酸可以显著减缓切花蛋白质含量下降，维持膜的完整性[10]。同时柠檬酸，苯甲酸钠，抗坏血酸等还能降低PH值，抑制微生物生长，促进鲜花吸水。1.2.7基因工程的应用ETR1cDNA片段得获得，为延长月季切花的寿命得延长等方面奠定了基础[11.17]。1.3植酸的抗氧化功能与切花保鲜植酸是一类天然的含磷有机化合物，广泛存在于谷物、豆类及油科植物种子中，属天然食品添加剂。由于植酸对金属的独特螯合作用和天然抗氧化作用使其在食品、环保、医疗等方面的应用备受人们关注，催化铁自由基的形成和随后的氧化损伤已经被很完善的记录了。虽然许多铁螯合剂可能促进氧自由基产生和脂质过氧化，但是植酸（在豆类、谷类、和种子中含量丰富）作为一种铁螯合物，通过富集铁离子介导把有害的超氧自由基转化为过氧化氢原子，还能拦截铁驱动的OH-的产生和抑制膜脂质过氧化。植酸最显著的特征是与金属离子有极强络合作用和抗氧化性，这种特性使之具有广泛用途。此外，高浓度的植酸通过抑制多酚氧化酶的活性，能够防止各种水果和蔬菜的褐变和腐烂。这些观察结果表明：植酸在种子休眠时，可以作为一种重要的抗氧化剂，并且植酸可替代目前使用的防腐剂。植酸的抗氧化特性在于它能产生还原性氢，破坏自氧化过程中产生的过氧化物，使之不能继续形成醛、酮等产物，而产生良好的抗氧化性，故对于切花离开植物体后的保鲜具有重要意义。因为切花切口