呋塞米和氯化钙对家兔高钾血症的治疗效果对比实验目的1、掌握高钾血症动物模型的制备方法。2、掌握高钾血症对心脏的影响。3、掌握呋塞米和氯化钙对家兔高钾血症的治疗效果的比较。4、了解高钾血症过程中心电图改变的特征。实验原理•血清钾浓度高于5.5mmol/L时称为高钾血症。高钾血症对机体的危害主要表现在心脏。•产高钾血症的原因主要有:(1)钾摄入过多(2)钾排出减少(3)细胞内钾转运到细胞外(4)假性高钾血症•此次实验通过经静脉补充大量钾而导致动物出现高钾血症。高钾血症对机体的影响也是多方面的,尤其是对心脏的影响较为突出,并可通过心电图观察到。•轻度高钾血症兴奋性和传导性均增高,而随着血钾浓度的继续增高,急性中毒高钾血症可导致严重传导阻滞和兴奋性消失而导致心跳停止。高钾血症使心脏兴奋性改变、自律性降低、传导性降低、收缩性减弱。故严重高钾血症心电图表现为Q-T延长,T波狭窄而高耸。(1)去除引起高钾血症的原因(2)降低体内总钾量(3)使细胞外钾转入细胞内(4)应用钙剂和钠盐拮抗高钾血症的心肌毒性作用(5)纠正其他电解质代谢絮乱防治基础呋塞米(又称:速尿)为高效利尿药,抑制髓袢升支管腔膜侧的Na+-K+-2Cl-共转运抑制了NaCl的重吸收,同时对钾离子重吸收也减少,降低了肾的稀释与浓缩功能。常用于急性肺水肿和急性脑水肿、其他严重水肿、急慢性肾衰竭、高钙血症和加速某些毒物的排出。钙离子是保持神经、肌肉和骨骼正常功能所必需的,对维持正常的心、肾、肺和凝血功能,以及细胞膜和毛细血管通透性也起重要作用。钙离子的主要生理功能有:心脏工作肌收缩、动静脉(冠状、肺、外周)收缩、平滑肌收缩、腺体分泌和神经细胞递质释放等。常用于治疗钙缺乏、急性血钙过低、碱中毒及甲状旁腺功能低下所致的手足搐搦症;过敏性疾患;镁中毒时的解救;氟中毒的解救;心脏复苏时应用(如高血钾或低血钙,或钙通道阻滞引起的心功能异常的解救)。实验动物:健康家兔10只,体重2.0—2.5kg,雌雄各半主要仪器:BL-420F实验系统、兔手术台、哺乳动物手术器械一套、动脉插管(连有三通)、注射器、动脉夹、离心管、离心机、试管、试管架、721分光光度计、7号针头4颗、心电引导电极一套、头皮针、输液器主要试剂和药品:250g/L乌拉坦溶液、50g/L氯化钾溶液、1g/L呋塞米、100g/L氯化钙溶液、肝素生理盐水溶液、1%四苯硼化钠、钾标准液、蒸馏水实验方法与步骤1、称重,麻醉,固定2、动脉插管分离一侧颈总动脉,结扎其远心端,于结扎处向近心端约3cm处用动脉夹夹闭颈总动脉以阻断血流。然后提起远心端结扎线牵引颈总动脉,用眼科剪在其前壁剪一斜口,向心脏方向插入已充满肝素溶液的动脉插管,并结扎固定。移开动脉夹即见血液喷向塑料动脉插管内。3、测正常血钾浓度:通过颈总动脉取血1ml加入事先加有0.2ml肝素的离心管中,摇匀,待测。4、将7号针头弯曲后,分别插入四肢踝部皮下,再将心电图电极分别夹住这4个7号针头,用于描记监护Ⅱ导联(或称模拟Ⅱ导联)心电图。5、开机并启动BL-420F实验系统,从“实验项目”菜单中选择“循环实验”中“全导联心电”项。根据需要调节参数,开始记录。6、记录一段正常心电图,观察正常心电图的主要波形。7、再分别通过耳缘静脉或输液装置,缓慢滴注50g/L的氯化钾溶液,并且观察心电图变化,直至心电图出现典型的高钾血症心电图波形后由颈总动脉分别取1ml血,加入事先加有0.2ml肝素的离心管中,摇匀。8、观察到高钾血症的心电图改变后,立即停止滴注氯化钾,迅速准确的在甲组家兔另一侧静脉注射1g/L呋塞米(5mg/kg),乙组家兔另一侧静脉注射100g/L氯化钙(2ml/kg)。9、注射药物后观察心电图的变化,并在注药后5min、15min、30min各取1ml血放入事先加有0.2ml肝素的离心管中,摇匀,待测。10、将上述离心管放入离心机中离心(2000r/min,10min),使血液中蛋白沉淀,取上清液1ml,放入编号相应的试管中备测血钾浓度。血钾浓度的测定血钾浓度的测定可采用火焰法、电极法以及比浊法。比浊法的基本原理:无蛋白血滤液中钾离子与四苯硼化钠反应,形成难溶于水的四苯硼化钾混浊液,然后用分光光度计测定其OD值,并计算其浓度。血钾浓度的测定方法,按下表操作各管混匀后,用721分光光度计比浊,选择波长520nm,蒸馏水调“0”,按下面公式计算钾离子浓度(mmol/L)=(R-S)/(S-B)X5试剂标准管(S)测定管(R)空白管(B)蒸馏水——1ml无蛋白滤液—1ml—钾标准液1ml——1%四苯硼化钠4ml4ml4ml实验结果统计表呋塞米组心率血钾浓度(次/分)(mmol/l)氯化钙组心率血钾浓度(次/分)(mmol/l)注射KCl之前注射KCl之后5min后15min后30min后预期结果:呋塞米降血钾的效果比氯化钙好,氯化钙提高心率的效果比呋塞米好,二者在治疗高钾血症中各有长处。