怎样有效引发基因沉默

怎样有效引发基因沉默？小干扰RNAs（siRNAs）可通过转染进入细胞，作用于序列特异的目标基因，引发基因表达下调或基因沉默。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent是一种优化的脂质体多组分试剂，为siRNAs的真核细胞转染提供了方便、可靠和有效的解决方案。罗氏应用科学部推荐您使用X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent进行基因沉默研究，以获得可靠的细胞学和功能学效应数据。高效引发基因沉默通过提高转染效率，高效引发基因沉默，研究相应的细胞学和功能学变化高度灵活应用同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验获得高附加值应用X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent始终获得稳定、有效的基因沉默siRNAs转染—基因沉默实验中的核心步骤图1：X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent和其他转染方法(A-E)的基因沉默效率比较。使用不同的转染方法将次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT)特异结合的siRNA转染到NIH3T3细胞。每种转染方法均采用各自对应的说明书流程及通用实验流程分别进行两次转染实验。转染后的基因沉默效率通过LightCycler®System定量计算。表型研究和基因型研究的有力结合图2：应用罗氏xCELLigenceSystem确定基因表达分析中的理想研究时间点。在E-Plate96孔板中，将Eg5siRNA或对照siRNA转染到HeLa细胞，应用xCELLigenceSystemReal-TimeCellAnalyzer连续记录CellIndex指数(CI)，CI值与细胞效应相关。根据连续监测结果，在转染后27小时（图中短划线处）基因沉默的效率达到最高，收获E-Plate96孔板中的细胞进行RNA分析。图3：应用LightCycler®System定量Eg5RNA和对照RNA的表达水平。收获E-Plate96孔板中的转染细胞，使用罗氏应用科学部HighPureRNAIsolationKit提取细胞总RNA。(A)qRT-PCR实验显示了Eg5RNA表达水平的变化；(B)比较Eg5mRNA和对照RNA的表达水平，细胞内Eg5mRNA的基因沉默效率约为65%。产品列表：产品名称产品货号产品包装目录价X-tremeGENEsiRNATransfectionReagentRs-044760930011ml(400transfectionsina24-wellplate)￥2818Rs-044761150015x1ml(2,000transfectionsina24-wellplate)￥11982