旋光度测定法操作规程

WA1302·014-01第1页共3页起草：日期：审核：日期：批准：日期：生效日期：签字：拷贝号：变更记载：制定（变更）原因及目的：公司更名。修订号批准日期生效日期002001年5月8日2001年5月15日0102分发部门生产技术部[]份质量部QA[]份质量部QC[]份一车间[]份二车间[]份三车间[]份设备动力科[]份物控部[]份总经办[]份综合部[]份旋光度测定法操作规程1.适用范围适用于本厂检验中旋光度的测定。2.职责检验员：严格按操作规程进行检验。3.原理旋光度测定法是利用平面偏振光，通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。使偏振光向右旋转者(顺时针方向)称为右旋物质，常以“+”号表示。使偏振光向左旋转者(反时针方向)，称为左旋物质，常以“-”号表示。影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。当偏振光通过长ldm、每1m1中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长通常用为钠光D线(589.3nm)或汞的404.7、546.lnm等谱线，测定温度为20℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[a]D20表示。比旋度是物质的物理常数。因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故而还可以用来测定含量。中国药典2000年版规定用读数至0.01°并经过检定的旋光计。4.样品测定操作WA1302·014-01第2页共3页4.1.比旋度测定按各品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定。中国药典要求:如无特殊规定，旋光度的测定温度，应在(20士0.5度)。测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除空白读数。如调节室温有困难，宜用具有夹层可联通恒温水溶的试样管，盛供试品溶液，恒温后测定。不得已时，可在恒温水浴中配制供试品溶液，再迅速移入试样管测定。药典规定常用测定比旋度的溶液多为水溶液，有时也用稀释的盐酸溶液或氢氧化钠试液，或有机溶剂如乙醇、氯仿、二氧六环等溶液，主要是按照供试品在各种溶剂中的溶解情况决定。药典配制溶液的浓度大都根据药品的比旋度大小，使配成的测定液旋光度一般应在左旋或右旋2-8度范围，测定值太小，在读取旋光度时容易造成误差，且在称量上也易产生误差，一些溶解度小的可以例外。用旋光法作含量测定时应当称取2份做平行试验。装入测定溶液时应避免产生气泡，旋紧测试管两端螺帽时，不应用力过大以免产生应力，造成误差，测定旋光度应重复读取3次，取平均值，按规定公式计算结果。4.2.用旋光法测定供试品的含量测定时要求按照各该品种含量测定项下规定操作，配制浓度太大或太小，有时会影响测定结果的准确度，其它操作按3·1操作。5.测定操作注意事项5.1.温度对旋光度影响不大的供试品，一般可在室温测定。对温度有严格要求约供试品，必须按规定执行，否则会造成误差。5.2.接通电源前应检查仪器样品室内有无异物，钠光灯和其它示数开关是否放在关或规定的位置，仪器放置位置是否合适。钠光灯启辉后仪器不许搬动，以免损坏钠光灯。5.3.钠光灯启辉后至少5分钟后发光才能稳定，测定或读数时应在钠光灯稳定后读取。5.4.测定零点或停点时，必须按动复测按纽数次，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位，减少仪器的机械误差。检查仪器的重复性和稳定性，必要时也可用旋光标准石英管校正仪器的准确度。5.5.测定管若有气泡，应先使气泡浮于凸颈处或除去。透光面两端的玻璃应用软布擦干，测定管两端的螺帽应旋至适中位置，过紧容易产生应力，过松容易漏液。定管旋转时应注意标记的位置和方向。读取零点应重复3次。5.6.往测试管加入供试品溶液时，应反复用供试品溶液冲洗测试管数次，以免供试液浓度改变。5.7.浑浊或含有小颗粒的溶液不能测定，应先将溶液离心或滤过，弃去初滤液后取滤液测定。在测定液长有强吸收的溶液也不能测定。WA1302·014-01第3页共3页5.8.仪器的各个光学镜片应保持干燥清洁，防止灰尘和油污的污染，钠灯有一定的使用寿命，连续使用一般不超过4小时，不准瞬间内反复开关。5.9.测定结束后测试管必须洗净晾干，以备下次再用，不准许将盛有供试品的测试管长时间的放置在仪器的样品室内。仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。6.计算与结果判断6.1.供试品的比旋度[a]按下列公式计算：a液体样品[a]tD=1d100a固体样品[a]tD=lc式中：D为钠光谱的D线；t为温度；l为测试管长度dm；a为测得的旋光度；d为液体的相对密度；c为100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）6.2.结果的判断旋光法多用于比旋度测试，药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，可根据上述计算公式得出供试品比旋度，判断样品是否合格。测定含量时，2份供试品测定读数结果相差在0.02°以内，否则重做。7.编制依据《中国药品标准检验操作规程》2000年版《中国药典》2000年版附录