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养胃颗粒抗溃疡作用的药效学研究摘要：目的进行养胃颗粒对大鼠不同胃溃水浸拘束疡模型的药效学研究。方法采用大鼠水浸应激法、大鼠醋酸灼烧法、大鼠消炎痛法及小鼠利血平法等实验方法，建立不同的实验性胃溃疡模型，观察养胃颗粒对各型溃疡的影响，以溃疡指数及溃疡面积表示大鼠胃粘膜损伤程度，比较养胃颗粒组和模型对照组及阳性对照组（雷尼替丁）的差别。结果结论关键词：养胃颗粒实验性胃溃疡药效学养胃颗粒是我院自制的中药复方制剂，由黄芪、威灵仙、桂枝、元胡、白芍等中药组成。临床上用于治疗胃溃疡，具有养胃健脾，生津止血之功效。本研究通过建立不同实验性胃溃疡大鼠模型，观察养胃颗粒的抗溃疡药理作用。1材料1.1实验动物SD大鼠，清洁级，雌雄兼用，（200±20)g，昆明种小鼠，雌雄兼用，（18±2)g购自徐州医学院实验动物中心，动物质量合格证号：1.2药品和试剂养胃颗粒（深褐色颗粒，由解放军第九七医院制剂室提供，批号：，剂型：颗粒剂），用0.9%氯化钠注射液配制成10％、5％的浓度供试验；雷尼替丁胶囊（）；无水乙醇（）；利血平注射液（1ml,1mg／支）；醋酸（）1.3仪器和设备2方法2.1养胃颗粒对大鼠水浸应激性溃疡的影响[1]SD大鼠50只，雌雄兼用，随机分为5组，每组10只（雌雄各半），即模型对照组，雷尼替丁组，养胃颗粒低中高剂量组。雷尼替丁阳性药对照组每天灌胃给予雷尼替丁0.03g/(kg.d)；养胃颗粒低中高剂量组每天灌胃给予养胃颗粒（2g/kg、4g/kg、8g/kg）；模型对照组每天灌胃给予等体积的0.9%氯化钠；每天1次，共3天。第二天给药后开始禁食24h，不禁水，末次给药1h后，将各组大鼠轻度乙醚麻醉后四肢固定于鼠板上以限制其活动，待大鼠清醒后将其头部向上垂直侵入(20±0.5)℃水浴，液面保持在剑突水平，共水浸20h，从而复制水浸应激性模型。造模结束后立即将所有大鼠处死，用手术剪于大鼠剑突下剖开腹部，先结扎幽门，从食道向胃内注入10%福尔马林10ml，结扎贲门，将胃从幽门贲门处剪下，再将胃放置于福尔马林溶液中浸泡30min后取出，沿胃大弯剪开，用生理盐水冲洗胃内残留物，检查溃疡病变。以溃疡长度的总和作为溃疡指数，计算溃疡抑制百分率。溃疡抑制百分率（%）：（溶媒对照组溃疡长度指数—实验组溃疡长度指数）/溶媒对照组溃疡长度指数×100%表1养胃颗粒对大鼠应激性胃溃疡的影响(±s)组别动物数(只)剂量(g/kg)溃疡指数(±SD)溃疡抑制率（%）模型对照组10—雷尼替丁组100.03养胃颗粒低剂量组100.75养胃颗粒中剂量组101.5养胃颗粒高剂量组1032.2养胃颗粒对大鼠乙酸烧灼致胃溃疡的影响[2]采用改良Okabe法，各组大鼠于术前禁食不禁水24h，按文献报道的方法[3]，用水合氯醛腹腔注射麻醉下，按无菌操作要求，消毒，打开腹腔，将胃轻轻拉至腹部，用内径6mm，长2cm的玻璃管，紧贴于胃体部与幽门交界处，向玻璃管内注入100％乙酸0．1ml，lmin后立即用棉签拭去乙酸，然后用蘸生理盐水的棉球轻轻抹洗2次，将胃还纳于腹腔内，缝合手术切口，用碘酒外消毒，手术的当天小鼠禁食不禁水，3d成模，于术后第3天随机分为5组(n=10)，各组均采用等容积不等浓度灌胃给药，每天1次，连续治疗14天，末次给药后，禁食26h，处死大鼠，取胃，10%福尔马林固定，沿胃大湾剪开，将胃壁展开，观察胃溃疡发生情况，测量溃疡最大纵径（d1）和横径（d2），计算溃疡面积和溃疡愈合率，溃疡面积=π*（d1/2）*（d2/2），溃疡愈合百分率=（对照组溃疡面积总和均值—给药组溃疡面积总和均值）/对照组溃疡面积总和均值*100%。结果见表2。表2养胃颗粒对大鼠乙酸烧灼性胃溃疡的影响组别动物数(只)剂量(g/kg)溃疡面积(±SD)溃疡愈合率（%）模型对照组10—雷尼替丁组100.03养胃颗粒低剂量组100.75养胃颗粒中剂量组101.5养胃颗粒高剂量组1032.3养胃颗粒对大鼠消炎痛诱发胃溃疡的影响[4]大鼠随机分为5组（n=10）：生理氯化钠溶液组，雷尼替丁组和养胃颗粒低中高剂量组，给药组大鼠每日上午灌胃给药，连续6d，第5天给药前禁食不禁水24h，末次给药后0.5h灌胃消炎痛40mg/kg（5%碳酸氢钠溶解），灌胃消炎痛后大鼠禁食不禁水，5h后处死，取出胃，注入2ml生理盐水，混匀后，抽出1ml，注入2ml离心管内，备用。再将胃用多聚甲醛固定，计算溃疡指数。计分方法：出血点长度小于lmm的计1分，lmm--一2mm计2分，2---3mm计3分，3--一4mm，计4分；大于4mm者，计5分；损伤宽度超过lmm时分数加倍；每组溃疡分数的均值为胃溃疡指数，并计算溃疡抑制率。溃疡抑制百分率=(模型组溃疡指数一给药组溃疡指数)／模型组溃疡指数X100％。组别动物数(只)剂量(g/kg)溃疡指数(±SD)溃疡抑制率（%）总酸度mmol/mL总酸排出量mmol模型对照组10—雷尼替丁组100.05养胃颗粒低剂量组100.75养胃颗粒中剂量组101.5养胃颗粒高剂量组103胃酸测定[5]：各取胃液上清液0.5ml于烧杯中，加入两滴酚酞指示剂，用20mmol/L氢氧化钠滴定，同时不断摇晃，至红色消失，继续滴定直至微红色不退为止，记录氢氧化钠的消耗体积。计算出总酸度及酸度排出量。总酸度=氢氧化钠毫升数*20.总酸排出量=总酸度*胃液量*2.2.4养胃颗粒对小鼠利血平致胃溃疡的影响[6]昆明小鼠50只，雌雄兼用，随机分为5组(n=10)，养胃颗粒给药剂量为：（3.5g/kg、7g/kg、14g/kg），雷尼替丁0.05g/kg，灌胃给药，每天1次，共6天，禁食不禁水24h后，于末次灌胃给药后1h，各组皮下注射利血平10mg/kg，并停止饮水和禁食，6h后处死动物，摘除全胃，见3.1，观察腺胃粘膜溃疡形成情况，计算溃疡指数，方法见2.3。结果见表4。表4养胃颗粒对小鼠利血平致胃粘膜损伤的影响组别动物数(只)剂量(g/kg)溃疡指数(±SD)溃疡抑制率（%）模型对照组10—雷尼替丁组100.05养胃颗粒低剂量组100.75养胃颗粒中剂量组101.5养胃颗粒高剂量组1034讨论养胃颗粒经口灌胃给予0.5g/kg和1.0g/kg两剂量均可明显抑制小鼠水浸应激性胃溃疡、大鼠幽门结扎型胃溃疡和无水乙醇引起的大鼠胃粘膜损伤。对利血平所致的大鼠胃溃疡模型，1.0g/kg剂量组可显著地抑制溃疡发生，0.5g/kg剂量组与对照组比较虽没有统计学意义，但呈明显的减轻损伤的趋势。对乙酸烧灼型大鼠慢性胃溃疡的形成可减小溃疡面积，但溃疡深度未见减小，这可能与乙酸从浆膜面烧灼，造成溃疡底部大部分组织变性坏死有关，而溃疡面减小则可能是由于溃疡周围的正常组织在药物作用下加速向溃疡面增生而致。综上述实验结果表明：养胃颗粒在多种胃溃疡动物模型上具有明显的抗溃疡作用。通过药效学研究了解和证实该药物的有效性、药理反应特点及量效关系，为临床研究提供科学依据。参考文献1.徐叔云，卞如濂，陈修。药理学实验方法学[M].第三版.北京：人民卫生出版社，2002．1316~1318．2.王滨，赵红晔，周丽.溃疡平对胃溃疡大鼠胃黏膜组织中EGF和EGFRmRNA表达的影响[J].北京中医药大学学报.2008,31(11),759-7623.OkabeS,RothJL,PfeifferCJAmethodforexperimental,penetratinggastricandduodenalulcersinrats.Observationsonnormalhealing.TheAmericanJournalofDigestiveDiseases.1971;16(3):277-84.4.徐叔云，卞如濂，陈修.药理学实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2000．1141．5.张国民，莫新民，刘慧萍等.疏肝和胃丸抑制胃溃疡大鼠胃酸和胃蛋白酶分泌作用的实验研究[J]，山西中医学院学报，2007,8(1)：16-176.沈鸿，张英华，田甲丽等.胃舒安胶囊对动物实验性胃溃疡的影响[J].中国实验方剂学杂志.2010.16（13）174-176