影响酶促反应速度的因素生化实验

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实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解,生成一系列水解产物,即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。在不同温度,不同PH值下,唾液淀粉酶活性不同,催化淀粉水解程度不一,生成的产物也就不同。此外,激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性,影响淀粉的水解。因此可根据在不同反应条件下,溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度,从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。淀粉呈蓝色糊精蓝色、紫色、红色麦芽糖+葡萄糖无色?淀粉酶淀粉酶I2I2I2【操作】1.温度对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:试管号加入物(滴)123pH6.8缓冲液2020201%淀粉溶液101010置37℃水浴5分钟置沸水浴5分钟置冰水浴5分钟稀释唾液555置37℃水浴10分钟置沸水浴10分钟置冰水浴10分钟碘液111现象2.PH对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:试管号加入物(滴)123pH3.0缓冲液20--pH6.8缓冲液-20-pH8.0缓冲液--201%淀粉溶液101010稀释唾液555摇匀,置37℃水浴保温,每隔1分钟从2号管中吸取1滴反应液于白瓷板上,加碘液1滴检查反应进行情况,直至反应液不与碘液反应时,向各管各加入1滴碘液,摇匀,观察并记录颜色变化。现象3.激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管,编号,按下表操作:试管号加入物(滴)12341%淀粉溶液10101010pH6.8缓冲液202020201%NaCl溶液-10-1%CuSO4溶液--101%Na2SO4---10蒸馏水10稀释唾液5555混匀,置37℃水浴中保温10分钟,取出,各管加入碘液各1滴,观察并记录颜色变化。现象【结果及分析】观察各管颜色变化,说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。【实验注意事项】

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