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1简述微生物在生命科学发展中的地位并描绘其前景（1）促进许多重大理论问题的突破：生命科学由整体或细胞研究水平进入分子水平，取决于许多重大理论问题的突破，其中微生物学起了重要甚至关键的作用，特别是对分子遗传学和分子生物学的影响最大。（2）对生命科学研究技术的贡献：20世纪中后期，由于微生物学的消毒灭菌、分离培养等技术的渗透和应用的拓宽及发展，动、植物也可以像微生物一样在平板或三角瓶中培养，可以在显微镜在进行分离，甚至可以像微生物的工业发酵一样，在发酵罐中进行生产。20世纪70年代，由于微生物学的许多重大发现，包括质粒载体、限制性内切酶、连接酶、反转录酶等，才导致了DNA重组技术和遗传工程的出现，使整个生命科学翻开了新的一页。（3）微生物与“人类基因组计划”：微生物起到了先行的模式生物的作用，加快了人类基因组计划的进展前景：微生物基因组学研究将全面展开；与环境密切相关的微生物学研究将获得长足发展；微生物生命现象的特性和共性将更加受到重视；与其他学科实现更广泛的交叉，获得新的发展；微生物产业将呈现全新的局面。2试述列文虎克巴斯德和科赫在微生物学发展史上的杰出贡献。为什么说巴斯德和科赫是微生物学的奠基人列文虎克：自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体；出于个人爱好对一些微生物进行形态描绘。是微生物学的先驱者。巴斯德：A、对微生物研究从形态转向生理，微生物致病作用的发现，对发酵的研究有突出贡献；B、医学上使免疫学成为一门独立科学，奠定了传染病微生物病原说的基础，同时发明了制造疫苗的方法和预防接种；C、证实微生物活动，否定了微生物自然发生说，提出了生命只能来自生命的胚种学说；D、创造了有效的灭菌方法。是微生物学的奠基人。科赫：A、具体证实了炭疽病、肺结核病的病原菌；B、发明了科赫定理。用来验证一种特殊类型的细菌引起一种特有的疾病，为疾病的病原说建立了牢固的基础。C：建立微生物学基本研究技术。是细菌学的奠基人。3何为无菌技术，列举属于无菌技术范围的具体实验操作环节及注意事项在分离转接及培养纯种微生物时防止其被环境中的微生物污染企业，其自身也不污染环境的技术4如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌,你该如何设计实验?根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在这种培养基上生长的细菌其氮素应来自固氮作用将环境用品，例如土样，稀释涂布到选择平板上，放置于厌氧罐中对厌氧罐，采用物理化学方法除去氧气保留氮气培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌和兼性厌氧固氮菌挑选一定数量的菌落，对应点种到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐中，外保温培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在厌氧罐外的平板上不生长，在厌氧罐内的平板上生长的既为可能的厌氧固氮菌。对分离得到的厌氧固氮菌菌落样品进行系列稀释，涂布于相应的选择平板，重复上述步骤，直到获得厌氧固氮菌的纯培养5细菌的一般构造和特殊构造作一介绍。一般机构细胞壁细胞膜细胞质内含物储藏物间体核糖体核区特殊结构糖被荚膜微荚膜粘液层凝胶团鞭毛、菌毛、性菌毛芽孢6请列表比较细菌的鞭毛、菌毛和性毛间的异同。依据鞭毛的数目和着生位置不同,可将鞭毛菌分为哪几种类型?单端鞭毛菌，端生丛毛菌，两端鞭毛菌和周毛菌7阐述革兰氏染色的主要步骤（按顺序）、所用染料试剂、两种染色结果（颜色）、染色机制和关键步骤。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。2）草酸铵结晶紫染1分钟。3）自来水冲洗。4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。5）水洗，用吸水纸吸去水分。6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。草酸铵结晶紫碘液蕃红染色液（稀）革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物G+细菌由于其细胞壁较厚丶肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄丶外膜层类脂含量高丶肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色了。染色时，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌，脱色时间一般为20~30s。8简述革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的主要不同特性。试列表比较G+与G-细菌间的10种主要差别。革兰氏染色反应紫红磷壁酸多数有无外膜无有LPS无有类脂和脂蛋白含量低高是否产生芽孢有的产无产毒素外毒素为主内毒素为主对机械力的抗性强弱碱性染料的抑菌作用强弱对阴离子去污剂是否敏感是否鞭毛结构基本着生两个环基本着生四个环G+G-9简述革氏阴性(G-)细菌与革氏阳性(G+)细菌细胞壁的主要区别。革兰氏阳性菌细胞壁较厚，约20～80nm。肽聚糖含量丰富，有15～50层，每层厚度1nm,约占细胞干重的50～80%，还含有磷壁酸。较厚的细胞壁，加上肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。所以菌体呈紫色。而革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，仅2-3层肽聚糖，另外还有脂多糖、细菌外膜和脂蛋白。肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红花红或沙黄复染后呈红色。10什么是缺壁细菌，试简述四类缺壁细菌的形成.特点及实践意义。细胞壁是细菌细胞的最基本构造,而缺壁细菌是指在自然界长期进化中或在实验室菌种的自发突变中发生缺壁细胞壁的细菌；此外，在实验室中，还可用人为的方法抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得缺壁细菌。缺壁细菌共有四类：（1）L-型细菌：指细菌在特定的条件下，由基因自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株，多形态，有的可通过细菌滤器而又称滤过型细菌，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌落。（2）原生质体：是指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞。一般由革兰氏阳性细菌形成。3）原生质球：又称球状体，是指在人为条件下，用溶菌酶去除革兰氏阴性细菌细胞壁或用青霉素抑制革兰氏阴性细菌新生细胞壁合成后，还残留着部分细胞壁而形成的细菌细胞，它呈圆球形。（4）支原体：是在长期进化过程中形成的.适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。因它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇。所以即使缺乏细胞壁，其细胞膜仍有较高的机械强度。上述原生质体和球状体的共同特点是：无完整的细胞壁，细胞呈球状，对渗透压极其敏感，革兰氏染色阴性，即使有鞭毛也无法运动，对相应噬菌体不敏感，细胞不能分裂等。当然，如在形成原生质体和球状体以前已有噬菌体侵入，则它仍能正常复制.增殖和裂解；同样，如在形成原生质体前正在形成芽孢，则该芽孢也仍能正常形成。原生质体或球状体比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质，故是研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。11试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。原核生物真核生物细胞核无核膜和核仁，有拟核。有核膜和核仁。染色体无染色体一个细胞只有一条染色体.一个细胞有几条染色体和RNA和蛋白质连在一起和RNA，不和蛋白质结合一起细胞器有分散的核糖体，没其他细胞器。有线粒体，叶绿体高尔基体等复杂细胞器。细胞壁成分是肽聚糖，氨基酸，胞壁酸。植物是纤维素，果胶等细胞膜一样一样分裂方式无丝分裂，二分分裂能进行有丝分裂例子细菌，蓝藻，放线菌，衣原体，支原体绝大多数动植物细胞，真菌12什么是碳源？什么是氮源？微生物常用的碳源和氮源物质有哪些？被微生物用来合成各种代谢产物是微生物细胞蛋白质和核酸的重要成分碳源物质有机碳源物质糖类、葡萄糖、蔗糖；无机碳源物质二氧化碳或可溶性碳酸盐氮源物质空气中的分子态氮；无机氮化合物铵态氮、硝态氮和简单的有机氮化物；有机氮化合物蛋白质、氨基酸13比较微生物营养类型异同?自养型与异养型自养型还分为光能自养和化能自养；异养型可从碳源、氮源来比较异同。14培养基有哪些种类?按用途可将培养基分为哪些种类?简述微生物培养基的配制原则2.按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。按照培养基的物理状态分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。按照微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。按照培养基用途分培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。3.选择适宜的营养物质；营养物质浓度及配比合适；控制pH条件；控制氧化还原电位；原料来源的选择；灭菌处理15什么是选择培养基和鉴别培养基？它们在微生物学工作中有何重要性？试各举一例，并分析其原理11微生物生化功能多样性的鉴定。2于所需微生物的生长。例能分解纤维素或石蜡油的微生物。16为维持微生物的正常生长代谢，在设计培养基时，应考虑ＰＨ的问题，请写出几种通过培养基内在成分控制pH的方法，并说明其原理。①磷酸缓冲作用：K2HPO4/KH2PO4：K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等克分子混合溶液的pH值为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。②CaCO3备用碱调节：有些微生物，如乳酸菌能大量产酸，在培养基中添加难溶的碳酸盐（CaCO3）来进行调节，CaCO3难溶于水，不会使培养基pH过度升高，但它可以不断中和微生物产生的酸，同时释放出CO2，将培养基pH控制在一定范围内。17营养物质进出微生物细胞的方式主要包括哪几种类型？并比较它们之间的异同点主动运输、被动运输和胞吞胞饮。主动运输是需要能量需要载体的，并且是逆浓度梯度运输，一些离子，比如钾钠离子泵的钾、钠离子进出就是通过主动运输的方式；被动运输包括自由扩散和协助运输，自由扩散比如氧气、二氧化碳、甘油等进出细胞不需要能量也不需要载体，从高浓度到低浓度。协助运输又包括载体介导的（葡萄糖等）和通道介导的（一些带电离子）。；胞吞胞饮是一些大分子物质还有病毒等一些通过这样的方式进出细胞18试从狭义和广义两方面来说明发酵的概念1.狭义的发酵是微生物生理学严格定义的“发酵”：有机物被生物体氧化降解成氧化产物并释放能量的过程统称为生物氧化。微生物生理学把生物氧化区分为呼吸和发酵，呼吸又可进一步区分为有氧呼吸和无氧呼吸。因此，发酵是生物氧化的一种方式。发酵是这样一种生物氧化方式：2.广义的发酵是工业生产上定义的发酵；工业生产上笼统地把一切依靠微生物的生命活动而实现的工业利用秸秆发酵制成沼气生产均称为“发酵”。这样定义的发酵就是“工业发酵”。包括：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。19试列表比较呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点。环境条件终电子受体来源性质能进行代谢产能方式的微生物呼吸有氧环境外源性环境外源性胞内内源性无氧呼吸无氧分子氧化合物（通常视为无机物）代谢中间物发酵无氧专性好氧微生物兼性好氧微生物微嗜氧微生物专性厌氧微生物兼性好氧微生物兼性好氧微生物耐氧厌氧微生物专性厌氧微生物20试述EMP途径21试述WD途径22什么叫次生代谢物？次生代谢途径与初生代谢途径之间有何联系？阐述次级代谢及次级代谢的特点某些微生物生长到稳定期前后，以结构简单、代谢途径明确、产量较大的初生代谢物为前体，通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物次生代谢是指生物合成生命非必需物质并储存次生代谢产物的过程；初生代谢是指所有生物的共同的代谢途径。合成糖类，氨基酸类,普通的脂肪酸类，核酸类以及由它们形成的聚合