微生物检测技术

微生物检测技术一、名词解释1微生物：个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括：细菌、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体以及病毒，它个体微小、种类繁多、与人类关系密切。2间歇灭菌：各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。3细菌性食物中毒：是指患者摄入被细菌和/或其毒素污染的食物或水所引起的急性中毒性疾病，根据病原体不同可有不同的临床表现。4菌落：是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。5培养基：是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。6鉴别培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。7巴氏灭菌：亦称低温消毒法，冷杀菌法，是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法，常常被广义地用于定义需要杀死各种病原菌的热处理方法。二、填空题1巴斯德的主要贡献2常用显微镜的种类：普通光学显微镜、相差显微镜、电子显微镜、荧光显微镜、扫描电子显微镜3细菌的形状：球状、杆状、螺旋状4培养基装量：固体培养基占试管1/5、液体培养基占试管1/4、半固体占试管1/3、占三角锥瓶的1/25细菌分类：界、门、纲、目、科、属、种6实验室灭菌：121度20分钟7微生物生长6大要素8平板计数cfu指菌落形成单位，一般2单位9细菌总数测定方法：直接测定法、间接测定法10微生物的命名：种名加属名11菌丝状态：基内丝、气生丝、孢子丝12血清医学反应：抗原和抗体13噬菌体入侵5大步骤14青霉素主要破坏细胞壁15紫外线用于表面灭菌：穿透力弱16微生物营养吸收方式：主动运输、被动运输、协助扩散、基团移位17血球计数法包括死菌、活菌18平板倒置的原因：保证干燥、防止污染19引起沙门氏菌细菌中毒的预防措施：防止污染、抑制繁殖、杀死病源三、简答题1巴斯德的主要贡献是什么？答：①发现了旋光性,立体化学的创始人.——诺贝尔化学奖②细菌学说的主要创始人和发展者,使细胞致病原理深入人心.③发明狂犬病疫苗,治愈狂犬病.④发明了免疫接种学说,即疫苗,对于使人类寿命提高了30年有最大的贡献.⑤发现了发酵时由酵母菌引起的,对世界造酒工业有重大贡献.⑥巴氏灭菌法,专利费用偿还了法国的战争欠款.2微生物的主要特点有哪些？答：①个体微小,结构简单：在形态上,个体微小,肉眼看不见,需用显微镜观察,细胞大小以微米和纳米计量.②繁殖快：生长繁殖快,在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代.③代谢类型多,活性强.④布广泛：有高等生物的地方均有微生物生活,动植物不能生活的极端环境也有微生物存在.⑤数量多：在局部环境中数量众多,如每克土壤含微生物几千万至几亿个.⑥易变异：相对于高等生物而言,较容易发生变异.在所有生物类群中,已知微生物种类的数量仅次于被子植物和昆虫.微生物种内的遗传多样性非常丰富.3从微生物的角度分析，低（非）酸性食品（PH4.5）和酸性食品（PH4.5）如要长期保藏，应分别采用什么温度杀菌？为什么？答：低（非）酸性食品：一般采用高温高压灭菌。因为PH4.5，AW0.85的低酸度下，各类微生物均可生长。若杀菌温度在100℃时，芽孢菌（120℃）可以生长，其他酵母菌、霉菌、乳酸菌也是可以生长的，所以，采用高温高压才可达到灭菌效果，一般为121℃/15-20min。酸性食品：其PH4.5，一般采用常压下，100℃，15min灭菌。因为酸性条件下，细菌和芽孢受到抑制，以酵母菌和霉菌生长为主。酵母菌和霉菌耐热性较差，所以杀菌仅100℃沸水煮开即可4引发食物变质的主要微生物的类型有哪些？答：①消毒牛奶（室温）；原料是消毒牛奶，经巴氏灭菌后，酵母菌和霉菌灭得差不多了，细菌营养体也应灭了，最有可能的是细菌芽孢的萌发，牛奶属非酸性食品，室温下适于芽孢的萌发。可以通过低温保藏的方法防止。②真空包装的蜜饯产品：原料是蜜饯，含有高糖粉，渗透压高，水分活度低，不适于细菌生长，而且是真空包装，霉菌多属好氧菌，也不易生长。最可能的是喜糖的耐高渗透压酵母。③面粉；面粉中水分活度很低，不适于酵母和细菌的生长（细菌的适宜水活度为0.94-0.99，酵母菌0.88-0.94，霉菌0.8-0.94，甚至0.65都可生长）。而且一般面粉中不缺氧气，适合于干性霉菌生长。④充CO2不足的碳酸饮料；碳酸饮料属酸性食品，PH较低，不适于细菌生长，其保存依赖于低酸度及充有CO2，低氧环境抑菌。如果充CO2不足，则好氧的霉菌可能生长，另在酸性环境中，兼性厌氧的酵母菌、耐氧的乳酸菌也可能生长。⑤杀菌不足的肉类罐头。肉类罐头属非酸性食品，保持依赖罐头的无氧环境，如果杀菌不足，可能残留了细菌芽孢。厌氧芽孢在适当温度压力下发生萌发，导致变质。如：肉毒梭状芽孢杆菌。E-coil(大肠杆菌)：石蜡油封藏法。因为大肠杆菌是兼性厌氧菌，该法可创造低温、缺氧条件。A-niger(黑曲霉)：是一种曲，属好氧菌，产孢子，所以采用砂土保藏法。如果是休眠体，则采用冷冻干燥保藏法。5从微生物角度分析，酸奶生产的关键点有哪些？答：制酸奶过程：牛奶+6-8%的糖→90-95℃下杀菌15min→冷却（42-45℃）→接种（乳酸菌）→培养（40-42℃）（4-6h）→冷藏（24h或48h）。关键：①牛奶原料要取材新鲜，无污染，杂菌含量不多，无致病微生物等；②菌种：选用保加利亚乳酸菌（产香），嗜热链球菌（产酸）；比例要合适，才能产生风味、质地较好的酸奶，接种量要合适；③尽量缩短延滞期，接种处于指数期后期的菌，培养温度为最适合产酸的温度；④控制冷藏时间、温度（过高适合于各种菌生长，过低破坏蛋白质）。6如何检测奶粉中的细菌总数？7食醋酿造过程中有哪些微生物参与了，各自有什么作用？8芽孢的特点以及生理意义？答：细菌在生长发育后期，个体不断缩小，细胞壁不断增厚，形成芽孢。芽孢小而轻，可随风四处飘散，对不良环境有很强的抵抗能力，一旦遇到合适的环境，又会重新萌发成细菌。芽孢是用来抗极端环境保住细菌本身的生命的，这是生物进化适应恶劣环境的产物。芽孢可抗干旱，高热，高酸碱、高渗环境，在恶劣环境下处于休眠状态，遇到适宜的条件又可萌芽生长。待到适宜温度又可以变成细菌。9大肠菌群的含义是什么？为什么要检测以及意义是什么？10测定微生物的方法以及特点，优缺点有哪些？四、论述题1噬菌体侵染细菌的过程2革兰氏染色法的方法步骤以及机制是什么？答：革兰氏染色法的机制：（1）结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。（2）乙醇脱色：G+细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色，G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。（3）复染G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。3试述鲜奶腐败过程中微生物的变化